公开(公告)号：CN108753860A

公开(公告)日：2018-11-06

申请号：CN201810697679.2

申请日：2018-06-29

申请人： 天津科技大学

发明人： 谢希贤 ,  鄢芳清 ,  徐庆阳 ,  陈宁 ,  韩亚昆 ,  门佳轩 ,  李燕军 ,  马倩 ,  张成林 ,  范晓光

IPC分类号： C12P13/22 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

CPC分类号： C12P13/227 ,  C07K14/245 ,  C12N9/0006 ,  C12N9/88 ,  C12N15/70 ,  C12Y101/01095 ,  C12Y401/02

摘要： 本发明涉及一株大肠杆菌基因工程菌及利用其快速高效生产L‑色氨酸的方法。所述基因工程菌是通过代谢工程的方法(包括基因整合和点突变与启动子替换)对大肠杆菌中L‑色氨酸合成相关基因进行对应改造组合，又在其基因组上引入来自嗜酸乳杆菌的谷氨酰胺合成酶编码基因glnA后得到的。利用该菌株进行摇瓶发酵可在24h内积累L‑色氨酸达10‑12g/L，为目前国内报导的最高值；该菌株在5L发酵罐发酵35‑40h可积累L‑色氨酸达40‑45g/L，相比现有携带质粒的L‑色氨酸工业化菌株提高了15.1％，说明该菌株具有良好的工业化生产L‑色氨酸的潜力。

公开(公告)号：CN106867952B

公开(公告)日：2019-10-18

申请号：CN201710012891.6

申请日：2017-01-09

申请人： 天津科技大学

发明人： 谢希贤 ,  马明利 ,  陈宁 ,  鄢芳清 ,  徐庆阳 ,  马倩 ,  刘涛 ,  王俊朋

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12P13/08 ,  C12R1/19

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一株大肠杆菌基因工程菌及利用其生产L‑苏氨酸的方法。所述基因工程菌是将出发菌株的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(ppc)的启动子Pppc替换为6‑磷酸葡萄糖脱氢酶基因(zwf)的启动子Pzwf，从而达到能通过甜菜碱调节其L‑苏氨酸生产能力的目的。在发酵过程中通过添加甜菜碱，可以使摇瓶发酵L‑苏氨酸产量达到50‑55g/L；5L发酵罐产量达到120‑150g/L，糖酸转化率达到59‑61％。

公开(公告)号：CN108707573A

公开(公告)日：2018-10-26

申请号：CN201810503190.7

申请日：2018-05-23

申请人： 天津科技大学

发明人： 马倩 ,  谢希贤 ,  陈宁 ,  张权威 ,  鄢芳清 ,  侯正杰 ,  莫晓琳 ,  徐庆阳 ,  李燕军 ,  张成林 ,  范晓光

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12P19/26 ,  C12R1/19

CPC分类号： C12N9/1288 ,  C07K14/245 ,  C12N9/1096 ,  C12N9/1205 ,  C12P19/26 ,  C12Y207/01011

摘要： 本发明公开了一种产生N‑乙酰氨基葡萄糖的基因工程菌及其应用,所述基因工程菌利用阿拉伯糖或鼠李糖同时诱导N‑乙酰氨基葡萄糖合成途径的强化，以及旁路代谢途径的弱化，实现精准调控。本发明所构建的大肠杆菌基因工程菌W3110‑GLA‑1(阿拉伯糖诱导型)、W3110‑GLA‑2(鼠李糖诱导型)以葡萄糖为底物可高效合成N‑乙酰氨基葡萄糖，在5L发酵罐发酵72h后N‑乙酰氨基葡萄糖的产量达到168g/L、160g/L，转化率约48％、47％，具有较强的工业化生产潜力。

公开(公告)号：CN106754603A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201710012845.6

申请日：2017-01-09

申请人： 天津科技大学

发明人： 谢希贤 ,  吴雪娇 ,  陈宁 ,  鄢芳清 ,  马倩 ,  麻杰 ,  张红超

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12P17/12 ,  C12R1/19

CPC分类号： C12N9/0006 ,  C12N9/1029 ,  C12N9/1096 ,  C12N9/1217 ,  C12N9/127 ,  C12N9/88 ,  C12P17/12 ,  C12Y101/01003 ,  C12Y203/01178 ,  C12Y206/01076 ,  C12Y207/02004 ,  C12Y207/07048 ,  C12Y401/01031 ,  C12Y402/01108

摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种利用木糖诱导产生四氢嘧啶的基因工程菌及其构建方法与应用。所述菌株是在大肠杆菌染色体上异源表达来自伸长盐单胞菌中的ectABC基因簇，重构四氢嘧啶合成通路，构建无质粒系统，利用木糖启动子诱导来源于T7噬菌体的RNA聚合酶，同时结合T7强启动子系统启动目的基因高效表达，从而达到摇瓶发酵20‑28h后四氢嘧啶的产量达到了12‑16g/L，5L发酵罐发酵24‑40h后四氢嘧啶的产量达到了35‑50g/L的效果。

公开(公告)号：CN108707573B

公开(公告)日：2021-01-22

申请号：CN201810503190.7

申请日：2018-05-23

申请人： 天津科技大学

发明人： 马倩 ,  谢希贤 ,  陈宁 ,  张权威 ,  鄢芳清 ,  侯正杰 ,  莫晓琳 ,  徐庆阳 ,  李燕军 ,  张成林 ,  范晓光

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12P19/26 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种产生N‑乙酰氨基葡萄糖的基因工程菌及其应用,所述基因工程菌利用阿拉伯糖或鼠李糖同时诱导N‑乙酰氨基葡萄糖合成途径的强化，以及旁路代谢途径的弱化，实现精准调控。本发明所构建的大肠杆菌基因工程菌W3110‑GLA‑1(阿拉伯糖诱导型)、W3110‑GLA‑2(鼠李糖诱导型)以葡萄糖为底物可高效合成N‑乙酰氨基葡萄糖，在5L发酵罐发酵72h后N‑乙酰氨基葡萄糖的产量达到168g/L、160g/L，转化率约48％、47％，具有较强的工业化生产潜力。

公开(公告)号：CN108753860B

公开(公告)日：2019-08-02

申请号：CN201810697679.2

申请日：2018-06-29

申请人： 天津科技大学

发明人： 谢希贤 ,  鄢芳清 ,  徐庆阳 ,  陈宁 ,  韩亚昆 ,  门佳轩 ,  李燕军 ,  马倩 ,  张成林 ,  范晓光

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P13/22 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及一株大肠杆菌基因工程菌及利用其快速高效生产L‑色氨酸的方法。所述基因工程菌是通过代谢工程的方法(包括基因整合和点突变与启动子替换)对大肠杆菌中L‑色氨酸合成相关基因进行对应改造组合，又在其基因组上引入来自嗜酸乳杆菌的谷氨酰胺合成酶编码基因glnA后得到的。利用该菌株进行摇瓶发酵可在24h内积累L‑色氨酸达10‑12g/L，为目前国内报导的最高值；该菌株在5L发酵罐发酵35‑40h可积累L‑色氨酸达40‑45g/L，相比现有携带质粒的L‑色氨酸工业化菌株提高了15.1％，说明该菌株具有良好的工业化生产L‑色氨酸的潜力。

公开(公告)号：CN106754603B

公开(公告)日：2019-03-05

申请号：CN201710012845.6

申请日：2017-01-09

申请人： 天津科技大学

发明人： 谢希贤 ,  吴雪娇 ,  陈宁 ,  鄢芳清 ,  马倩 ,  麻杰 ,  张红超

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12P17/12 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种利用木糖诱导产生四氢嘧啶的基因工程菌及其构建方法与应用。所述菌株是在大肠杆菌染色体上异源表达来自伸长盐单胞菌中的ectABC基因簇，重构四氢嘧啶合成通路，构建无质粒系统，利用木糖启动子诱导来源于T7噬菌体的RNA聚合酶，同时结合T7强启动子系统启动目的基因高效表达，从而达到摇瓶发酵20‑28h后四氢嘧啶的产量达到了12‑16g/L，5L发酵罐发酵24‑40h后四氢嘧啶的产量达到了35‑50g/L的效果。

公开(公告)号：CN106867952A

公开(公告)日：2017-06-20

申请号：CN201710012891.6

申请日：2017-01-09

申请人： 天津科技大学

发明人： 谢希贤 ,  马明利 ,  陈宁 ,  鄢芳清 ,  徐庆阳 ,  马倩 ,  刘涛 ,  王俊朋

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12P13/08 ,  C12R1/19

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一株大肠杆菌基因工程菌及利用其生产L‑苏氨酸的方法。所述基因工程菌是将出发菌株的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(ppc)的启动子Pppc替换为6‑磷酸葡萄糖脱氢酶基因(zwf)的启动子Pzwf，从而达到能通过甜菜碱调节其L‑苏氨酸生产能力的目的。在发酵过程中通过添加甜菜碱，可以使摇瓶发酵L‑苏氨酸产量达到50‑55g/L；5L发酵罐产量达到120‑150g/L，糖酸转化率达到59‑61％。