一种表面展示脂肪酶的肉葡萄球菌及构建方法和应用

    公开(公告)号:CN116396975A

    公开(公告)日:2023-07-07

    申请号:CN202310267537.3

    申请日:2023-03-20

    摘要: 本发明公开了一种表面展示脂肪酶的肉葡萄球菌及构建方法和应用。所述表面展示脂肪酶的肉葡萄球菌为含有重组质粒pBT2‑SPP‑LIP‑CBD‑XM的S.carnosus TM300菌株。利用纤维素进行细胞固定化后,细胞表面展示的脂肪酶最适温度可达45℃,比游离细胞的脂肪酶更能够耐受高温,并且在40℃保温3h后仍能保留80%左右的酶活,温度稳定性较好。另外,本申请构建得到的S.carnosus TM300/P‑SPP‑LIP‑CBD‑XM重组菌株能够用于生产生物柴油,生物柴油转化率能够达到77%。本申请为生物柴油的制备提供了新思路和有应用价值的实验材料,具有较好的应用前景。

    一种重组大肠杆菌产indigoidine培养基及发酵和制备色素粗品方法

    公开(公告)号:CN111518718A

    公开(公告)日:2020-08-11

    申请号:CN202010353283.3

    申请日:2020-04-29

    IPC分类号: C12N1/20 C12P1/04 C12R1/19

    摘要: 本发明公开了一种重组大肠杆菌产indigoidine培养基及发酵和制备色素粗品方法。上述培养基,按1L体积计算,是由如下重量的原料组成:胰蛋白胨5g,酵母浸粉10g,氯化钠10g,3‑(N‑吗啉)丙磺酸5g,剩余为水;发酵过程采用变温培养方式控制,前期37℃以菌体生长为主,后期28℃以生产产物为主;色素粗品采用旋转蒸发和真空冷冻干燥的方法制备。本发明的培养基配方营养丰富,促进大肠杆菌生长代谢,且发酵过程采用变温培养的方式适合大肠杆菌前期生长和后期产素的需求,发酵周期较短。制备色素粗品的方法适合于实验室水平小量制备,并可应用于indigoidine标准曲线的制作。

    一种从富含γ-氨基丁酸的发酵液中制备粉状γ-氨基丁酸的方法

    公开(公告)号:CN110684810A

    公开(公告)日:2020-01-14

    申请号:CN201910929670.4

    申请日:2019-09-27

    摘要: 本发明公开了一种新型的γ-氨基丁酸(GABA)制备方法。本发明属于生物技术领域,特别属于微生物发酵产物提取领域,是一种从富含γ-氨基丁酸的发酵液中制备粉状γ-氨基丁酸的方法。本发明的特征是以短乳杆菌(Lactobacillus brevis)CGMCC No.3414为发酵菌株,将得到的发酵液经过固液分离、脱色、除盐等多步处理后,利用喷雾干燥技术进行制粉,研究不同工艺参数对发酵液喷雾干燥速率和产品品质的影响,通过单因素与响应面实验优化获得最佳喷雾干燥工艺,此方法与传统的GABA提取方法相比较,减少了环境污染,提高了生产效率与生产安全性。

    一种阿维链霉菌合成培养基及其发酵液的制备方法

    公开(公告)号:CN107338210A

    公开(公告)日:2017-11-10

    申请号:CN201710788636.0

    申请日:2017-09-05

    IPC分类号: C12N1/20 C12P19/62 C12R1/465

    CPC分类号: C12N1/20 C12P19/623

    摘要: 本发明公开了一种阿维链霉菌合成培养基,按1L体积计算,是由如下重量的原料组成:一水麦芽糖8~25g,无水葡萄糖3~14g,苏氨酸0.8~2.5g,七水硫酸镁0.3~0.5g,七水硫酸亚铁0.005~0.015g,三水磷酸氢二钾0.15~0.45g,一水硫酸锰0.01~0.02g,氯化钠0.3~0.6g,3-(N-吗啉)丙磺酸4~6g,剩余为水;还公开了阿维链霉菌发酵液的制备方法。本发明的阿维链霉菌合成培养基配方搭配合理,营养丰富,培养基成分明确,且适合阿维链霉菌的生长和产素需求以及相关的基础科学研究,通过本发明方法获得的阿维菌素B1a有效成分是清亮培养基的2.84倍。

    一株赭曲霉毒素A的产生菌

    公开(公告)号:CN104388318A

    公开(公告)日:2015-03-04

    申请号:CN201410577019.2

    申请日:2014-10-24

    IPC分类号: C12N1/14 C12R1/685

    CPC分类号: C12R1/685

    摘要: 本发明涉及一株赭曲霉毒素A的产生菌,分类命名为:黑曲霉(Aspergillus niger),保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会微生物中心(简称CGMCC),保藏编号为:9668,保藏日期为:2014年9月16日,所述菌株的最适产毒pH为7.0,最适产毒温度为25℃,静置培养5d产毒量达到最大。本发明的赭曲霉毒素A的产生菌所产赭曲霉毒素A的最适pH为7.0,最适温度为25℃,发酵5d产量达到最高,其在30℃以上虽然菌体生长良好但不会产生赭曲霉毒素A。本发明筛选的赭曲霉毒素A产生菌具有较高的毒素产量,其发酵液经纯化后可获得赭曲霉毒素A纯品,可作为赭曲霉毒素A标准品的生产菌株;亦可作为模式菌,用于涉及黑曲霉发酵生产各种代谢产物过程中,产赭曲霉毒素A菌株的检测及其产生机理的研究。

    一种高产γ-氨基丁酸的生产方法及应用

    公开(公告)号:CN102559552B

    公开(公告)日:2014-06-11

    申请号:CN201210003931.8

    申请日:2012-01-09

    摘要: 本发明公开了一种高产γ-氨基丁酸的生产方法及应用,其中的高产γ-氨基丁酸(GABA)生长棉子糖肠球菌M1,保藏号为CGMCC?No.5584。其生产方法包括菌种分离筛选获得一株高产γ-氨基丁酸的Entercoccus?raffinosus?TCCC?11660(CGMCC?No.5584)菌株;发酵培养基和发酵条件的优化以及10L发酵罐实验。此法具有原料低廉、生产能耗低、生产成本低,产品安全性好、易实现工业化生产等优点。其菌株应用于谷氨酸发酵生产γ-氨基丁酸,有良好的社会和经济效益潜力。

    一种产异丁醇的运动发酵单胞菌基因工程菌及其构建方法

    公开(公告)号:CN102876625A

    公开(公告)日:2013-01-16

    申请号:CN201210386012.3

    申请日:2012-10-12

    IPC分类号: C12N1/21 C12N15/74 C12R1/01

    摘要: 本发明涉及产异丁醇的运动发酵单胞菌(Zymomonasmobilis)ATCC10988基因工程菌及其构建方法。本发明克隆得到乳酸乳球菌(Lactococcuslactis)1.2829中的2-酮异戊酸脱羧酶基因(kivd)和醇脱氢酶基因(adhA),并将其连接到含有氯霉素抗性的质粒pZY507上,构建得到重组质粒pZY507KA。将重组质粒电转化入Z.mobilis中,筛选具有氯霉素抗性的菌株即为目标工程菌。本发明得到的基因工程菌经诱导后可以分解葡萄糖合成异丁醇,这是首次利用运动发酵单胞菌发酵法生产异丁醇,也显示了运动发酵单胞菌的巨大潜力与价值。

    一种低产氨基甲酸乙酯葡萄酒酵母的筛选及应用

    公开(公告)号:CN102220252A

    公开(公告)日:2011-10-19

    申请号:CN201110129484.6

    申请日:2011-05-19

    摘要: 本发明公开了一种低产氨基甲酸乙酯的葡萄酒酵母的筛选方法及在葡萄酒生产中应用。此方法采用精氨酸的结构类似物—刀豆氨酸抗性平板,可从自然界分离的、市售售(商品)活性干酵母以及化学诱变剂诱变的突变株中筛选出低产氨基甲酸乙酯的菌株。此法是应用酵母氨基酸代谢理论设计的,方法简便,能快速分离并获得目的菌株。本发明将获得刀豆氨酸抗性菌株B1,编号为FI5-1-5菌株(CGMCC NO.4727)应用于小型发酵容器葡萄酒的酿造中,在具备优良的葡萄酒酿造性能的基础上,能有效地显著降低葡萄酒生产中的氨基酸甲酸乙酯的含量,具有工业化生产应用的潜力。

    一种高产γ-氨基丁酸菌株的诱变选育方法

    公开(公告)号:CN110964760A

    公开(公告)日:2020-04-07

    申请号:CN201811144561.3

    申请日:2018-09-28

    摘要: 本发明公开了一种通过二次诱变选育高产γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的短乳杆菌(Lactobacillus brevis)的方法,包括短乳杆菌的常压室温等离子体诱变(ARTP)和高产菌株的筛选方法。本发明的特征是在前期经过多功能等离子体诱变系统(MPMS)(载体为氮气)诱变获得的高产菌种的基础上,通过ARTP(载体为氦气)再次进行诱变获得更高的γ-氨基丁酸产量,并对此高产菌株进行了5L发酵罐放大实验,证明了二次ARTP的诱变方法,可以使菌株的目的产物的产量更高。本发明中菌株诱变方法比常规诱变方法效率高,筛选过程简单迅速,得到的诱变菌株γ-氨基丁酸产量更高,得到的突变株最终产量为115.72g/L,比出发菌株提高9.80%,摩尔转化率为93.95%,比出发菌株提高3.93%,为产业化的提高提供了坚实的理论基础和数据参考。

    一种肉葡萄球菌破壁提取质粒的方法及其应用

    公开(公告)号:CN110964714A

    公开(公告)日:2020-04-07

    申请号:CN201811143666.7

    申请日:2018-09-28

    IPC分类号: C12N15/10 C12R1/44

    摘要: 本发明公开了一种肉葡萄球菌破壁提取质粒的方法及其应用,其具体步骤如下:将肉葡萄球菌(Staphylococcus carnosus)ATCC 51365培养12~16h,移取2mL菌液于EP管中,12000rpm离心2min,弃去上清液,用滤纸吸取残留的液体。加入100μL 50mg/mL的溶菌酶、5μL 20mg/mL溶葡萄球菌素于37℃、180rpm作用90min,然后按照传统提取质粒的方法提取肉葡萄球菌的质粒。采用本发明的方法,极大地提高了肉葡萄球菌细胞壁的破壁效率,更高效地提取质粒,便于后续实验。