一种MnSOD-Hemolin融合蛋白及其结晶方法

    公开(公告)号:CN103060280A

    公开(公告)日:2013-04-24

    申请号:CN201310001456.5

    申请日:2013-01-04

    IPC分类号: C12N9/02 C12N15/70

    摘要: 本发明涉及一种MnSOD-Hemolin融合蛋白及其结晶方法,属于DNA重组技术和蛋白纯化技术领域。本发明通过引物设计,构建重组表达载体pET-28a-MnSOD-Hemolin,诱导表达得到大量重组目的蛋白,然后20mM/L的咪唑溶液洗杂蛋白,200mM/L的咪唑溶液洗脱重组目的蛋白;将得到的重组目的蛋白在经过superdex75分离,可以得到较纯的重组目的蛋白,再将该重组目的蛋白进行点晶条件的探索,液滴中可以看到不规则结构形成。本发明提供的方法,流程简单,对蛋白结晶的一种全新的探索方法,具有重要意义。

    家蚕蚕蛹中30kD蛋白群的纯化方法

    公开(公告)号:CN102977184A

    公开(公告)日:2013-03-20

    申请号:CN201210452817.3

    申请日:2012-11-13

    IPC分类号: C07K1/36 C07K1/34 C07K1/30

    CPC分类号: C07K1/36 C07K14/43586

    摘要: 本发明公开了一种家蚕蚕蛹中30kD蛋白群的纯化方法,属于蛋白纯化技术领域,该方法的纯化步骤为:取家蚕蚕蛹进行破碎细胞,细胞破碎液离心后取上清进行硫酸铵分级沉淀,沉淀重悬后经过80kD~100kD超滤膜超滤,流出液再经过30kD~50kD超滤膜超滤,收集截留液,最终获得30kD蛋白群。本发明的纯化方法减少了对目的蛋白的损伤及损耗,能够利用最简单的步骤获得大量较纯的目的蛋白,操作简单且成本低廉。