公开(公告)号：CN116590355B

公开(公告)日：2023-11-07

申请号：CN202310133746.9

申请日：2023-02-08

申请人： 安徽斯拜科生物科技有限公司 ,  江苏省中国科学院植物研究所

发明人： 汪仁 ,  查建生 ,  谢光蓉 ,  李洁 ,  高萌 ,  周正雄 ,  张越

IPC分类号： C12P7/58 ,  C12N9/04 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19 ,  C12R1/84

摘要： 本发明公开了一种利用葡萄糖脱氢酶催化麦芽糖合成麦芽糖酸的方法，属于生物医药领域。该方法以大肠杆菌为模板，克隆出葡萄糖脱氢酶基因Ecgdh；构建重组表达葡萄糖脱氢酶基因Ecgdh体系，表达出葡萄糖脱氢酶；再以麦芽糖为底物，以NADH为电子供体，经葡萄糖脱氢酶催化制备麦芽糖酸；所述的葡萄糖脱氢酶基因Ecgdh的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的葡萄糖脱氢酶，与以PQQ为辅因子的醌蛋白葡萄糖脱氢酶相比大大提高，相较于其他醌蛋白葡萄糖脱氢酶对于麦芽糖具有更强的底物偏好性，适合大规模的制备麦芽糖酸，为麦芽糖酸的合成提供了新的方式。

公开(公告)号：CN116590355A

公开(公告)日：2023-08-15

申请号：CN202310133746.9

申请日：2023-02-08

申请人： 安徽斯拜科生物科技有限公司 ,  江苏省中国科学院植物研究所

发明人： 汪仁 ,  查建生 ,  谢光蓉 ,  李洁 ,  高萌 ,  周正雄 ,  张越

IPC分类号： C12P7/58 ,  C12N9/04 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19 ,  C12R1/84

摘要： 本发明公开了一种利用葡萄糖脱氢酶催化麦芽糖合成麦芽糖酸的方法，属于生物医药领域。该方法以大肠杆菌为模板，克隆出葡萄糖脱氢酶基因Ecgdh；构建重组表达葡萄糖脱氢酶基因Ecgdh体系，表达出葡萄糖脱氢酶；再以麦芽糖为底物，以NADH为电子供体，经葡萄糖脱氢酶催化制备麦芽糖酸；所述的葡萄糖脱氢酶基因Ecgdh的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的葡萄糖脱氢酶，与以PQQ为辅因子的醌蛋白葡萄糖脱氢酶相比大大提高，相较于其他醌蛋白葡萄糖脱氢酶对于麦芽糖具有更强的底物偏好性，适合大规模的制备麦芽糖酸，为麦芽糖酸的合成提供了新的方式。

公开(公告)号：CN116496916A

公开(公告)日：2023-07-28

申请号：CN202310133741.6

申请日：2023-02-08

申请人： 安徽斯拜科生物科技有限公司 ,  江苏省中国科学院植物研究所

发明人： 孙彬 ,  查建生 ,  谢光蓉 ,  汪仁 ,  周正雄 ,  李洁 ,  张越

IPC分类号： C12N1/19 ,  C12N15/12 ,  C12N15/61 ,  C12N15/55 ,  C12N15/81 ,  C12P21/02 ,  C12R1/84

摘要： 本发明公开了一种高产HBD‑2的毕赤酵母工程菌株及其制备方法和应用，属于生物医药技术领域。本发明以毕赤酵母为表达菌株，通过共表达编码人β‑防御素的基因hβD‑2、编码硫氧还蛋白的基因Trxa、编码蛋白质二硫键异构酶的基因DscA和肠激酶基因rEK，构建人β‑防御素2的合成途径，获得人β‑防御素2的积累菌株。本发明为人β‑防御素2的合成提供了新的策略，其生产效率比酶法切割重组防御素及化学法合成防御素明显提高，生产成本大大降低，为防御素的工业化大规模生产奠定了基础。

公开(公告)号：CN117187274B

公开(公告)日：2024-01-26

申请号：CN202311473002.8

申请日：2023-11-07

申请人： 江苏省中国科学院植物研究所

发明人： 周正雄 ,  汪仁 ,  高萌 ,  徐晟 ,  李洁 ,  孙彬 ,  张越

IPC分类号： C12N15/54 ,  C12N9/10 ,  C12N15/70 ,  C12N15/64 ,  C12N1/21 ,  C12P17/12 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了2,4‑二氨基丁酸乙酰转移酶突变体基因及其表达蛋白和应用，属于基因工程技术领域。本发明的2,4‑二氨基丁酸乙酰转移酶突变体基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明构建了2,4‑二氨基丁酸乙酰转移酶突变体基因的重组表达载体，将所构建的重组表达载体转化到大肠杆菌中，构建重组大肠杆菌表达菌株E.coli BL21 pET28a(+)‑T7‑ectB‑T7ter‑T7‑ectAm‑T7ter‑T7‑ectC‑T7ter。重组大肠杆菌表达菌株产四氢嘧啶的浓度为67.86±1.76 g/L。

公开(公告)号：CN115839937B

公开(公告)日：2024-01-09

申请号：CN202211642900.7

申请日：2022-12-20

申请人： 江苏省中国科学院植物研究所

发明人： 王涛 ,  束晓春 ,  庄维兵 ,  汪仁 ,  王忠 ,  李玲玉 ,  张凤姣 ,  王宁

IPC分类号： G01N21/64

摘要： 本发明公开了一种基于叶绿素荧光成像技术的红豆杉胁迫检测方法，主要包括红豆杉带叶小枝的采集和预处理，叶绿素荧光参数Fv/Fm值的测定和对应的RGB图像采集，以及胁迫分级标准的应用等。因在全年不同气候环境下，不同红豆杉种质针叶的叶绿素荧光动力学存在明显差异，通过筛选特定参数和分析成像特征能鉴定出红豆杉的健康程度或胁迫状态。本发明对红豆杉的生长和品质性状影响均很小，操作简单、结果重复性好、鉴定效率高；且在红豆杉资源保护与利用、环境耐受型红豆杉品种选育和突变株筛选等领域均有广泛的应用前景，为红豆杉的遗传改良提供技术基础。(56)对比文件P. ROBAKOWSKI 等.Winterphotoinhibition in needles of Taxusbaccata seedlings acclimated to differentlight levels.PHOTOSYNTHETICA.2009,第47卷(第4期),527-535.鲍思伟;谈锋.高温对曼地亚红豆杉叶绿素荧光参数的影响.福建林业科技.2009,(第03期),第1-2节.肖遥;张蕊;刘建慧;梁朔;周志春.不同产地南方红豆杉育种亲本叶绿素含量及荧光参数差异分析.南京林业大学学报(自然科学版).2017,(第03期),57-64.

公开(公告)号：CN111172050B

公开(公告)日：2022-05-17

申请号：CN201811330943.5

申请日：2018-11-09

申请人： 江苏省中国科学院植物研究所 ,  南京师范大学

发明人： 汪仁 ,  李晓丹 ,  陆玲 ,  周佳宇 ,  李宜奎 ,  王松风 ,  王蓉

IPC分类号： C12N1/20 ,  C12N1/38 ,  C12P17/18 ,  C12R1/01

摘要： 提高伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.HDXY‑02)的毒黄素产量发酵策略，属于微生物发酵技术领域。菌株HDXY‑02已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.14054。本发明确定最佳接种量为3%，培养温度为30℃。通过单因子实验和统计分析，确定最优培养基为：葡萄糖（19.24 g/L）、蛋白胨（20.45 g/L）、苯丙氨酸（0.472 g/L）、K2HPO4（1.5 g/L）、MgSO4（0.75 g/L），pH7.0。优化后毒黄素产量达1533 mg/L，较优化前提高了296%，为微生物发酵法高产毒黄素提供了一种可行的发酵策略。

公开(公告)号：CN113789335B

公开(公告)日：2022-03-15

申请号：CN202111353784.2

申请日：2021-11-16

申请人： 江苏省中国科学院植物研究所

发明人： 周正雄 ,  汪仁 ,  曾道平 ,  高萌 ,  徐晟 ,  李洁 ,  孙彬 ,  周佳宇

IPC分类号： C12N15/54 ,  C12N9/10 ,  C12N15/70 ,  C12N15/81 ,  C12N1/21 ,  C12N1/19 ,  C12P21/02 ,  C12R1/19 ,  C12R1/84

摘要： 本发明公开了一种水蛭酪氨酸磺酸转移酶基因及其应用，属于生物医药领域，本发明以日本医蛭转录组数据库为基础，通过生物信息学手段挖掘并鉴定水蛭酪氨酸磺酸转移酶cDNA序列，在此基础上，通过密码子优化、基因合成、微生物细胞表达合成水蛭酪氨酸磺酸转移酶，并利用该酶催化重组水蛭素磺酸化修饰为天然水蛭素。其催化能力与酰基磺酸转移酶、人源酪氨酸磺酸转移酶、牛源酪氨酸磺酸转移酶相比大大提高。本申请获得的水蛭酪氨酸磺酸转移酶，相较于其他酪氨酸磺酸转移酶对于重组水蛭素具有更强的底物偏好性，适合大规模的制备天然水蛭素，为天然水蛭素的合成提供了新的方式。

公开(公告)号：CN113789293B

公开(公告)日：2022-03-15

申请号：CN202111351835.8

申请日：2021-11-16

申请人： 江苏省中国科学院植物研究所

发明人： 汪仁 ,  周正雄 ,  高萌 ,  李洁 ,  孙彬

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/54 ,  C12N15/15 ,  C12P21/02 ,  C07K14/815 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种高产天然水蛭素的大肠杆菌工程菌株及其应用，属于生物医药技术领域。本申请以模式生物大肠杆菌为基础，通过游离质粒共表达编码水蛭素的基因hv和编码水蛭酪氨酸磺酸转移酶的基因TPS，构建天然水蛭素的合成途径，获得天然水蛭素的积累菌株。hv的核苷酸序列如SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.8所示，TPS的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明为天然水蛭素的合成提供了新的策略，其生产效率比酶法合成天然水蛭素及从动物组织中提取天然水蛭素明显提高，生产成本大大降低，为天然水蛭素的工业化大规模生产奠定了基础。

公开(公告)号：CN112342202B

公开(公告)日：2021-04-27

申请号：CN202110020960.4

申请日：2021-01-08

申请人： 江苏省中国科学院植物研究所

发明人： 汪仁 ,  李宜奎 ,  钱彬彬 ,  李洁 ,  李杨

IPC分类号： C12N9/10 ,  C12N9/88 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P17/12 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种四氢甲基嘧啶羧酸生物合成基因及其应用，属于基因工程和化合物生物技术生产领域。本发明所公开的四氢甲基嘧啶羧酸生物合成基因，是经密码子和mRNA空间结构等优化的人工合成的多核苷酸，可以通过可操作的方式与各种基因表达盒连接，获得基因表达量可调节的、适用于多种宿主的表达构建物以及重组细胞。所得的重组细胞可以以天冬氨酸为前体生产四氢甲基嘧啶羧酸，也可以在低至5.5‰（m/v）的总盐浓度下以葡萄糖等碳水化合物为碳源进行四氢甲基嘧啶羧酸的生物转化与发酵生产，产量可高达30 g/L。因此，本发明所提供的四氢甲基嘧啶羧酸生物合成基因及其各种基因簇、表达构建物和重组细胞，具有极高的应用价值。

公开(公告)号：CN112342254B

公开(公告)日：2021-04-23

申请号：CN202110020967.6

申请日：2021-01-08

申请人： 江苏省中国科学院植物研究所

发明人： 李宜奎 ,  汪仁 ,  钱彬彬 ,  李洁 ,  李杨

IPC分类号： C12P17/12 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种发酵生产四氢甲基嘧啶羧酸的方法，属于氨基酸衍生物生产技术领域。本发明包括：利用含有由人工密码子优化得到的四氢甲基嘧啶羧酸生物合成基因组装而成的基因簇的大肠杆菌，进行发酵生产四氢甲基嘧啶羧酸，包括活化培养、种子培养和发酵培养。通过控制发酵培养基中葡萄糖的浓度，显著提高了四氢甲基嘧啶羧酸的产量，使四氢甲基嘧啶羧酸的产量达到41.5 g/L。本发明所提供的四氢甲基嘧啶羧酸发酵生产方法，不需外源添加天冬氨酸等前体物质和抗生素及任何辅因子，不产生四氢甲基嘧啶羧酸结构类似物，具有低盐条件、过程简单、操控简便、生产成本低、产物得率高、分离方便等优点，具有极高的工业应用价值。