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公开(公告)号：CN108642031B
公开(公告)日：2022-01-07
申请号：CN201810708915.6
申请日：2018-07-02
申请人： 四川德博尔制药有限公司
IPC分类号： C12N9/66
摘要： 本发明涉及生物制药技术领域，提供了弹性蛋白酶的提取方法：将猪胰脏肉浆与0.1～0.5M、pH为4.0～7.0的第一磷酸盐缓冲液反应充分后，进行固液分离得初级提取液；将初级提取液过超滤膜得到次级提取液；用0.02～0.1M、pH为4.5～6.5的第二磷酸盐缓冲液平衡装有CM Bestarose FF的层析柱；调节次级提取液的pH后过滤得到上样液；将上样液以2～4ml/min的速度过柱；上样完毕后用第二磷酸盐缓冲液洗涤；用0.5～1.2M、pH为4.5～6.5的第三磷酸盐缓冲液洗脱，收集洗脱液；用超滤膜得弹性蛋白酶液。该方法制得的弹性蛋白酶品质高。本发明还提供了通过上述方法制得的弹性蛋白酶。
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公开(公告)号：CN104711243B
公开(公告)日：2019-06-11
申请号：CN201410767370.8
申请日：2008-12-04
申请人： 普罗特昂治疗公司
摘要： 本发明涉及制备、纯化、配制生物学上有活性的重组弹性蛋白酶蛋白质的方法及所述生物学上有活性的重组弹性蛋白酶蛋白质的用途。描述了制备治疗学有用的弹性蛋白酶蛋白质的重组方法及含所述弹性蛋白酶蛋白质的药物组合物。还公开了新的重组弹性蛋白酶蛋白质及蛋白质制剂。描述了使用含本发明的弹性蛋白酶蛋白质的药物组合物治疗和预防生物管道疾病的方法。
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公开(公告)号：CN108642031A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810708915.6
申请日：2018-07-02
申请人： 四川德博尔制药有限公司
IPC分类号： C12N9/66
摘要： 本发明涉及生物制药技术领域，提供了弹性蛋白酶的提取方法：将猪胰脏肉浆与0.1～0.5M、pH为4.0～7.0的第一磷酸盐缓冲液反应充分后，进行固液分离得初级提取液；将初级提取液过超滤膜得到次级提取液；用0.02～0.1M、pH为4.5～6.5的第二磷酸盐缓冲液平衡装有CM Bestarose FF的层析柱；调节次级提取液的pH后过滤得到上样液；将上样液以2～4ml/min的速度过柱；上样完毕后用第二磷酸盐缓冲液洗涤；用0.5～1.2M、pH为4.5～6.5的第三磷酸盐缓冲液洗脱，收集洗脱液；用超滤膜得弹性蛋白酶液。该方法制得的弹性蛋白酶品质高。本发明还提供了通过上述方法制得的弹性蛋白酶。
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公开(公告)号：CN103952388B
公开(公告)日：2017-10-03
申请号：CN201410187187.0
申请日：2008-12-04
申请人： 普罗特昂治疗公司
IPC分类号： C12N9/66
CPC分类号： C12N9/6448 , A61K9/19 , A61K38/00 , A61K38/486 , C07K1/14 , C07K2319/00 , C07K2319/02 , C07K2319/50 , C12N9/50 , C12N15/815 , C12P21/02 , C12Y304/21036 , C12Y304/21037
摘要： 本发明涉及制备、纯化、配制生物学上有活性的重组弹性蛋白酶蛋白质的方法及所述生物学上有活性的重组弹性蛋白酶蛋白质的用途。描述了制备治疗学有用的弹性蛋白酶蛋白质的重组方法及含所述弹性蛋白酶蛋白质的药物组合物。还公开了新的重组弹性蛋白酶蛋白质及蛋白质制剂。描述了使用含本发明的弹性蛋白酶蛋白质的药物组合物治疗和预防生物管道疾病的方法。
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公开(公告)号：CN103391997B
公开(公告)日：2016-08-03
申请号：CN201180021336.0
申请日：2011-03-11
申请人： 科学和工业研究委员会
发明人： 西塔·拉克斯曼·利亚里 , 哈里什·班希拉尔·坎德尔瓦 , 斯内哈尔·维贾伊·莫尔 , 卡玛拉卡尔·莫缇拉姆·卡拉尔 , 钱德拉·巴度·坎南·纳拉希姆汉 , 萨拉瓦南·帕拉尼韦尔 , 帕德马纳班·巴拉拉姆
IPC分类号： C12N1/14 , C12N9/20 , C12N9/42 , C12N9/48 , C12N9/58 , C12N9/66 , C11D3/386 , C14C1/06 , C12R1/645
CPC分类号： C12N1/14 , C12N9/20 , C12N9/244 , C12N9/2474 , C12N9/48 , C12N9/58 , C12N9/6448 , C12R1/645 , C12Y302/01006 , C12Y302/01035 , C14C1/065 , Y02P10/238
摘要： 本发明涉及一种登录号为MTCC 5185的耳霉属（Conidiobolus）的真菌。本发明还涉及制备耳霉属的蛋白酶、糖酶和脂肪酶的酶混合物的方法。这样的酶在皮革、丝及其他工业中具有用途。
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公开(公告)号：CN104630192A
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201510012744.X
申请日：2003-10-02
申请人： 催化剂生物科学有限公司 , 加利福尼亚大学董事会
IPC分类号： C12N9/76 , C12N9/56 , C12N9/74 , C12N9/64 , C12N9/66 , A61K38/49 , A61K38/48 , A61P35/00 , A61P29/00 , A61P19/02 , A61P7/00 , A61P31/04 , A61P31/18 , A61P31/16 , A61P9/00 , A61P11/06 , A61P25/00 , A61P25/28
CPC分类号： C12N9/6467 , C07K2319/50 , C12N9/6475 , C12Q1/37 , G01N2500/00 , C12N9/50 , A61K38/48 , A61K2300/00
摘要： 本发明公开了制备改变对应其剪切目标分子特异性蛋白酶的方法。本发明还公开了使用上述蛋白酶治疗涉及靶蛋白的疾病。使用蛋白酶在特定的底物序列剪切特定靶蛋白是一种治疗上述病症的方法。
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公开(公告)号：CN103436512B
公开(公告)日：2015-04-01
申请号：CN201310366716.9
申请日：2013-08-21
申请人： 山东省农业科学院生物技术研究中心
摘要： 本发明提供一种通过缺失单个盐键来提高PAE比活力的方法。利用定点突变技术，通过缺失催化腔附近的单个盐键，本发明提高了PAE的活力，本发明不但对揭示M4家族金属蛋白酶的结构和功能关系具有重要意义，同时，由于很多M4家族蛋白酶是重要的医学、工业用酶，因此本发明对该家族蛋白酶的分子改造研究和相关新产品的开发也具有重要指导意义。
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公开(公告)号：CN103451173B
公开(公告)日：2015-01-28
申请号：CN201310368569.9
申请日：2013-08-21
申请人： 山东省农业科学院生物技术研究中心
摘要： 本发明提供一种通过单点突变缺失结构中的盐键提高PAE酶活的方法。利用定点突变技术，通过缺失催化腔附近的单个盐键，将形成盐键3的Asp201-Arg205中的Asp201定点突变为Ala，构建突变体D201A，提高了PAE的活力。本发明不但对揭示M4家族金属蛋白酶的结构和功能关系具有重要意义，同时，由于很多M4家族蛋白酶是重要的医学、工业用酶，因此本发明对该家族蛋白酶的分子改造研究和相关新产品的开发也具有重要指导意义。
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公开(公告)号：CN101348779A
公开(公告)日：2009-01-21
申请号：CN200810107092.8
申请日：2008-09-12
申请人： 南昌市浩然生物医药有限公司
IPC分类号： C12N9/66
摘要： 一种从猪胰脏中提取纯化弹性蛋白酶的方法，它是将猪胰脏经过绞碎后形成胰糜，后者采用提取液进行提取后经过板框过滤、超滤后，采用离子交换树脂进行吸附，洗脱液用反胶束萃取方法进行正萃取和反萃取步骤，反萃取出来的弹性蛋白酶组分经过超滤脱盐浓缩和冷冻干燥后获得高纯度的弹性蛋白酶产品。本发明制得的弹性蛋白酶产品生物活性达到1200IU/mg以上，比活超过2200IU/mg·p，产品经SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定，分子量约25900Da，且电泳为单一带，可以作为医药工业用弹性蛋白酶制剂的原料。本发明的工艺路线也可以用于从猪胰脏中提取纯化其他种类的蛋白酶及生物活性分子。
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公开(公告)号：CN1279162C
公开(公告)日：2006-10-11
申请号：CN01138811.0
申请日：2001-12-09
申请人： 黑龙江省科学院应用微生物研究所
摘要： 生产弹性酶的枯草杆菌，是一种能够生产治疗动脉硬化、脂肪肝的弹性酶，以替代胰脏分离出的弹性酶的新型枯草杆菌。现有的菌源弹性酶成本高，产酶率低。本发明的菌种其菌落为圆形，皱褶、不规则、无光泽、不透明、白色直径2-3mm，在1%葡萄糖营养琼脂试管穿刺表面生长物变厚，菌体宽度0.7-0.8μM，长度2-3μM，其运动性为便毛运动，芽孢为0.5×1.5-1.8、对于过氧化酶、沙氏葡萄糖液固基生长、0.001%溶菌酶生长、柠檬酸与盐生长产碱，水解酪素时90%以上的菌株均显阳性，在卵黄反应、55℃0.02%重氮化合物以及7%NaCl中生长90%以上菌株呈阴性。
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