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公开(公告)号：CN115960852B
公开(公告)日：2024-08-20
申请号：CN202310065358.1
申请日：2023-01-16
申请人： 广西中烟工业有限责任公司
摘要： 本发明涉及一种烯酮还原酶及其制备方法与应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种烯酮还原酶，所述烯酮还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示；所述烯酮还原酶能够以β‑紫罗兰酮为底物高效催化合成二氢‑β‑紫罗兰酮，具有催化专一性高，产物转化率高，反应副产物少，反应时间短等优势；所述烯酮还原酶的最佳反应条件为：4.0U/mL的酶浓度、1mM的底物β‑紫罗兰酮浓度、1mM的辅酶因子NADH浓度、6.0的反应pH、60℃的反应温度、30min的反应时间；在该最佳反应条件下，所述烯酮还原酶(KaDBR1)在30min内可以产生0.98mM的二氢‑β‑紫罗兰酮，转化率为98.0％。
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公开(公告)号：CN115948479A
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202310066473.0
申请日：2023-01-19
申请人： 广西中烟工业有限责任公司
摘要： 本发明涉及一种制备叶黄素降解产物的方法及其应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种制备叶黄素降解产物的方法，所述方法为使用肠杆菌CGMCC No.1.4537降解叶黄素，得到叶黄素降解产物；使用所述方法降解叶黄素的降解率达到93.2％；本发明进一步提供了从叶黄素降解产物中分离纯化得到纯化叶黄素降解产物的方法，所得纯化叶黄素降解产物中含有β‑紫罗兰酮及其衍生物等香味物质；在卷烟中加入纯化叶黄素降解产物后，卷烟香气质柔和细腻，香气量丰满、杂气得到掩盖、刺激性明显减少，余味纯净舒适。本发明采用微生物降解转化制备β‑紫罗兰酮及其衍生物等香味物质，在食品、药品或化工产品领域具有重要的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN115181737A
公开(公告)日：2022-10-14
申请号：CN202210113085.9
申请日：2022-01-29
申请人： 广西中烟工业有限责任公司
IPC分类号： C12N9/88 , C12N1/20 , C07K1/30 , C07K1/14 , C07K1/34 , C07K1/18 , C07K1/36 , C12P7/26 , C12R1/01
摘要： 本发明公开了一种霍氏肠杆菌叶黄素裂解酶、其制备方法及其合成3‑羟基‑β‑紫罗兰酮的方法。所述霍氏肠杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.1.10608。所述叶黄素裂解酶，经菌种活化、发酵培养、菌体收集、细胞破碎、硫酸铵沉淀、过柱纯化等步骤制备而成。利用叶黄素裂解酶在标准反应体系中，在40℃‑55℃条件下水解反应降解叶黄素30min‑90min，获得3‑羟基‑β‑紫罗兰酮。本申请的方法使用霍氏肠杆菌制备叶黄素裂解酶，进而使用该酶合成3‑羟基‑β‑紫罗兰酮。本申请所用的叶黄素裂解酶制备、纯化步骤简单，产量高；转化反应中转化效率高，能够有效克服现有化学合成和生物工程法制备3‑羟基‑β‑紫罗兰酮的缺点。
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公开(公告)号：CN113073062B
公开(公告)日：2023-03-31
申请号：CN202110374152.8
申请日：2021-04-07
申请人： 广西中烟工业有限责任公司
摘要： 本发明涉及农业微生物技术领域，具体涉及一种复合微生物制剂及其制备方法和应用。所述复合微生物制剂采用市售酿酒酵母和中国普通微生物菌种保藏管理中心保藏的保藏编号为CGMCC NO.13905的嗜麦芽寡养单胞菌，经菌种活化、制备发酵液、离心、复配等步骤制备而成。烟叶经过所述复合微生物制剂发酵后，烟叶化学成分协调性改善，巨豆三烯酮等6种致香成分含量明显增加，新生成了1‑己烯‑3‑醇等6种致香物质成分，烟叶品质明显提升。
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公开(公告)号：CN113073062A
公开(公告)日：2021-07-06
申请号：CN202110374152.8
申请日：2021-04-07
申请人： 广西中烟工业有限责任公司
摘要： 本发明涉及农业微生物技术领域，具体涉及一种复合微生物制剂及其制备方法和应用。所述复合微生物制剂采用市售酿酒酵母和中国普通微生物菌种保藏管理中心保藏的保藏编号为CGMCC NO.13905的嗜麦芽寡养单胞菌，经菌种活化、制备发酵液、离心、复配等步骤制备而成。烟叶经过所述复合微生物制剂发酵后，烟叶化学成分协调性改善，巨豆三烯酮等6种致香成分含量明显增加，新生成了1‑己烯‑3‑醇等6种致香物质成分，烟叶品质明显提升。
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公开(公告)号：CN115181737B
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202210113085.9
申请日：2022-01-29
申请人： 广西中烟工业有限责任公司
IPC分类号： C12N9/88 , C12N1/20 , C07K1/30 , C07K1/14 , C07K1/34 , C07K1/18 , C07K1/36 , C12P7/26 , C12R1/01
摘要： 罗兰酮的缺点。本发明公开了一种霍氏肠杆菌叶黄素裂解酶、其制备方法及其合成3‑羟基‑β‑紫罗兰酮的方法。所述霍氏肠杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.1.10608。所述叶黄素裂解酶，经菌种活化、发酵培养、菌体收集、细胞破碎、硫酸铵沉淀、过柱纯化等步骤制备而成。利用叶黄素裂解酶在标准反应体系中，在40℃‑55℃条件下水解反应降解叶黄素30min‑90min，获得3‑羟基‑β‑紫罗兰酮。本申请的方法使用霍氏肠杆菌制备叶黄素裂解酶，进而使用该酶合成3‑羟基‑β‑紫罗兰酮。本
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公开(公告)号：CN115960852A
公开(公告)日：2023-04-14
申请号：CN202310065358.1
申请日：2023-01-16
申请人： 广西中烟工业有限责任公司
摘要： 本发明涉及一种烯酮还原酶及其制备方法与应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种烯酮还原酶，所述烯酮还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示；所述烯酮还原酶能够以β‑紫罗兰酮为底物高效催化合成二氢‑β‑紫罗兰酮，具有催化专一性高，产物转化率高，反应副产物少，反应时间短等优势；所述烯酮还原酶的最佳反应条件为：4.0U/mL的酶浓度、1mM的底物β‑紫罗兰酮浓度、1mM的辅酶因子NADH浓度、6.0的反应pH、60℃的反应温度、30min的反应时间；在该最佳反应条件下，所述烯酮还原酶(KaDBR1)在30min内可以产生0.98mM的二氢‑β‑紫罗兰酮，转化率为98.0％。
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公开(公告)号：CN114376257B
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202210114473.9
申请日：2022-01-30
申请人： 广西中烟工业有限责任公司
摘要： 本发明属提供了一种菌酶协同处理改善烟叶品质的方法，所述方法使用短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)和类胡萝卜素9,10’双加氧酶协同混合处理烟叶。经菌酶协同生物技术处理后烟叶的致香成分总体含量提高8.1％，由170.444ug/g提高到184.286ug/g。经感官质量评价，经菌酶协同处理后烟叶香气质有所改善，香气量和香气浓度增加，刺激性减少，杂气减少，余味干净舒适，烟叶的品质得到明显改善，可以较好的解决广西烟叶存在杂气重等问题。
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公开(公告)号：CN114376257A
公开(公告)日：2022-04-22
申请号：CN202210114473.9
申请日：2022-01-30
申请人： 广西中烟工业有限责任公司
摘要： 本发明属提供了一种菌酶协同处理改善烟叶品质的方法，所述方法使用短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)和类胡萝卜素9,10’双加氧酶协同混合处理烟叶。经菌酶协同生物技术处理后烟叶的致香成分总体含量提高8.1％，由170.444ug/g提高到184.286ug/g。经感官质量评价，经菌酶协同处理后烟叶香气质有所改善，香气量和香气浓度增加，刺激性减少，杂气减少，余味干净舒适，烟叶的品质得到明显改善，可以较好的解决广西烟叶存在杂气重等问题。
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