公开(公告)号：CN118516500A

公开(公告)日：2024-08-20

申请号：CN202410765207.1

申请日：2024-06-14

申请人： 广西壮族自治区兽医研究所 ,  广西大学

发明人： 覃绍敏 ,  刘金凤 ,  欧阳康 ,  杨丽华 ,  许力士 ,  秦树英 ,  韦珊珊 ,  马玲 ,  陈凤莲 ,  林俊 ,  韦珏 ,  陆晨阳 ,  杨磊 ,  彭娜

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

摘要： 本发明涉及分子标记技术领域，特别涉及一种快速检测猪肠病毒G型的检测试剂、试剂盒及其应用，本申请成功建立了一种快速检测EV‑G的RT‑RAA与CIRSPR/Cas12a相结合的技术手段，该方法从引物的选择和体系优化提高了整个体系的灵敏性，该方法的检测在37℃左右，30min内可以完成整个操作与检测，且结果直接通过在蓝光下肉眼观察判定，检测限可达到100copies/uL，具有可常温反应、耗时短、特异性强、灵敏度高及重复性好等优势，适用于条件较差的非实验室场所检测，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN113832261B

公开(公告)日：2024-07-16

申请号：CN202111211922.3

申请日：2021-10-18

申请人： 广西壮族自治区兽医研究所

发明人： 马玲 ,  秦树英 ,  覃绍敏 ,  刘金凤 ,  陈凤莲 ,  白安斌 ,  林俊 ,  杨磊 ,  吴健敏

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

摘要： 本发明公开了检测新型阿卡斑病毒M基因的荧光定量RT‑PCR引物，包括引物AKAVMF1和引物AKAVMR1，它们分别具有序列表SEQ.ID.No.1和SEQ.ID.No.2的碱基序列。据此，发明人还建立相应的荧光定量RT‑PCR检测方法并制备相应的荧光定量RT‑PCR试剂盒。实验表明，本发明具有特异、敏感、快速、简便的特点，而且检测灵敏度高，在标准品为1.0×102～1.0×1010copies/μL范围内都有较好的线性关系。本发明检测限低至1.0×102copies/μL、检测范围宽至9个数量级，灵敏度是普通RT‑PCR的107倍，可以从拷贝数低的样品中快速、高效检测新型阿卡斑病毒，满足动物疫病监测、防控的需求，填补了目前临床新型阿卡斑病毒荧光定量检测方法空白，具有较好的应用前景。

公开(公告)号：CN114457197A

公开(公告)日：2022-05-10

申请号：CN202210314762.3

申请日：2022-03-28

申请人： 广西壮族自治区兽医研究所

发明人： 吴健敏 ,  刘金凤 ,  覃绍敏 ,  宋瑞鹏 ,  马玲 ,  陈凤莲 ,  林俊 ,  秦树英 ,  韦珏 ,  许力士 ,  韦珊珊 ,  杨磊

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

摘要： 本发明属于生物技术领域，特别涉及RAA荧光法检测FPV的引物探针组及试剂盒，本发明的引物探针组经过简并设计后，能检测出更多的FPV基因型，经过与其它引物探针组进行对比发现该引物探针组具有灵敏性高、检测效果更好的特点，同时，本发明还制备了相应的RAA试剂盒并建立相应的RAA检测方法，经过试验表明，该试剂盒能在恒温条件下(37‑42℃)进行，5‑30min内即可实现对猫细小病毒的快速、定性检测，具有操作便捷、特异性强、灵敏度高、重复性好的特点，完全能满足猫细小病毒快速诊断，适合临床快速检测，具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN109111518B

公开(公告)日：2022-03-15

申请号：CN201811016402.5

申请日：2018-08-31

申请人： 广西壮族自治区兽医研究所

发明人： 吴健敏 ,  刘金凤 ,  覃绍敏 ,  张振江 ,  白安斌 ,  唐海波 ,  陈凤莲 ,  马玲 ,  林俊 ,  秦树英 ,  杨磊

IPC分类号： C07K16/08 ,  C07K16/02

摘要： 本发明公开了一种防治猫瘟热的特异性卵黄抗体，以FPV灭活苗和FPV亚单位疫苗为免疫原，通过免疫蛋鸡制得。据此建立了相应制备方法，该法创造性的以两种不同FPV免疫原接种蛋鸡，以FPV灭活苗为基础免疫原，以FPV亚单位疫苗为加强免疫原，并优化了免疫接种方法和接种剂量以产生高抗体效价；免疫蛋鸡后，收取高免蛋，分离蛋黄，提取卵黄抗体粗品，并对其进行纯化处理，制备获得抗猫瘟热病毒特异性卵黄抗体。试验表明，本发明的卵黄抗体安全性好、特异性强、抗体效价高，且成本低、产量高，可用于猫瘟热的治疗与紧急预防，增加患病猫的抵抗力，具有很好的推广应用前景。

公开(公告)号：CN113862397A

公开(公告)日：2021-12-31

申请号：CN202111210341.8

申请日：2021-10-18

申请人： 广西壮族自治区兽医研究所

发明人： 秦树英 ,  马玲 ,  覃绍敏 ,  刘金凤 ,  陈凤莲 ,  白安斌 ,  林俊 ,  杨磊 ,  吴健敏

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

摘要： 本发明公开了检测新型阿卡斑病毒S基因的荧光定量RT‑PCR引物，包括引物AKAVSF1和引物AKAVSR1，它们分别具有序列表SEQ.ID.No.1和SEQ.ID.No.2的碱基序列。据此，发明人还建立相应的荧光定量RT‑PCR检测方法并制备相应的荧光定量RT‑PCR试剂盒。实验表明，本发明具有特异、敏感、快速、简便的特点，而且检测灵敏度高，在标准品为1.0×101～1.0×109copies/μL范围内都有较好的线性关系。本发明检测限低至1.0×101copies/μL、检测范围宽至8个数量级，可以从拷贝数低的样品中快速、高效检测新型阿卡斑病毒，满足动物疫病监测、防控的需求。此外，本发明填补了目前临床新型阿卡斑病毒荧光定量检测方法空白，具有较好的应用前景。

公开(公告)号：CN110903387A

公开(公告)日：2020-03-24

申请号：CN201911298986.4

申请日：2019-12-17

申请人： 吉林省纽卓莱生物科技有限责任公司 ,  广西壮族自治区兽医研究所 ,  中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

发明人： 郝晓寒 ,  吴健敏 ,  崔尚金 ,  刘秀丽 ,  梁琳 ,  刘金凤 ,  覃绍敏 ,  白安斌 ,  马玲 ,  陈凤莲 ,  秦树英 ,  杨磊

IPC分类号： C07K16/10 ,  C07K16/06 ,  C07K1/22 ,  A61K39/42 ,  A61P31/14

摘要： 本发明提供一种犬冠状病毒免疫球蛋白F(ab′)2及其制备方法和应用，属于免疫学及基因工程领域。以北京地区分离鉴定的犬冠状病毒BJ02为基础毒株制备犬冠状病毒灭活疫苗，按一定程序免疫健康牛，定期采血监测抗体水平，产生高效价抗体后收集高免血，加入青霉素和链霉素，自然凝固分离高免血清，采用硫酸铵沉淀法分离高免血清中的免疫球蛋白，以胃蛋白酶酶切Fc’片段后，Protein A+G柱纯化回收获得高活性免疫球蛋白F(ab′)2。本发明制备的F(ab′)2特异性强，可作为犬接触感染犬冠状病毒时的紧急预防和治疗制剂，增加病犬机体免疫力和病毒抵抗力，具有效价高、安全性好、无临床副作用，具有良好的推广应用前景。

公开(公告)号：CN118653009A

公开(公告)日：2024-09-17

申请号：CN202410764959.6

申请日：2024-06-14

申请人： 广西壮族自治区兽医研究所

发明人： 刘金凤 ,  许力士 ,  于晶雪 ,  韦珊珊 ,  覃绍敏 ,  秦树英 ,  马玲 ,  林俊 ,  陈凤莲 ,  韦珏 ,  陆晨阳 ,  杨磊 ,  彭娜

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/113 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

摘要： 本发明涉及分子标记技术领域，特别涉及一种快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30‑like毒株的检测试剂、试剂盒及其应用，本发明通过将RAA技术与CRISPR/Cas12a系统相结合，成功开发了一种新型的NADC30‑like毒株核酸检测方法。该方法具有操作简便、检测速度快、特异性高、稳定性好等优点，该方法的检测下限达到了10copies/μL以内，满足临床诊断的需求，且仅对NADC30‑like毒株有特异性，此外，检测结果可以用侧流层试纸条显示，大大减少了设备依赖，可以用于资源匮乏的基层实验室或边境口岸进行快速鉴别诊断，为NADC30‑like毒株的防控和研究提供有力支持。

公开(公告)号：CN116003538A

公开(公告)日：2023-04-25

申请号：CN202211048656.1

申请日：2022-08-29

申请人： 广西壮族自治区兽医研究所

发明人： 刘金凤 ,  吴健敏 ,  沙奕羽 ,  覃绍敏 ,  林俊 ,  陈凤莲 ,  秦树英 ,  马玲 ,  韦珏 ,  许力士 ,  韦珊珊 ,  陆晨阳 ,  杨磊

IPC分类号： C07K14/165 ,  C12N15/866 ,  C12N5/10 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14

摘要： 本发明涉及分子标记技术领域，特别涉及猪流行性腹泻病毒(PEDV)细菌样颗粒及其制备方法，本申请以广西PEDV流行株的S1基因和COE基因为靶基因，利用昆虫细胞‑杆状病毒表达系统，成功表达了与锚钩蛋白PA融合的融合蛋白S1‑PA和COE‑PA；同时，热酸处理乳酸乳球菌MG1363去除菌体核酸和蛋白，成功制备GEM颗粒，并成功将融合蛋白S1‑PA和COE‑PA分别展示于其表面，得到S1‑GEM和COE‑GEM颗粒，两种颗粒与GEL‑01佐剂混合制备成两种细菌样颗粒疫苗，进行小鼠免疫，经免疫途径、免疫原及免疫剂量筛选证实24μg COE‑GEM滴鼻免疫小鼠能达到最优的免疫效果。

公开(公告)号：CN107227311B

公开(公告)日：2021-01-29

申请号：CN201710472742.8

申请日：2017-06-20

申请人： 广西壮族自治区兽医研究所

发明人： 吴健敏 ,  刘金凤 ,  杜毅超 ,  覃绍敏 ,  白安斌 ,  林俊 ,  陈凤莲 ,  唐海波 ,  马玲 ,  杨磊

IPC分类号： C12N15/62 ,  C12N7/04 ,  A61K39/23 ,  A61P31/20

摘要： 本发明公开了一种重组猪细小病毒样粒子，将TAT蛋白转导域与形成PPV空衣壳蛋白所需的抗原VP2基因连接起来，克隆到杆状病毒转移载体获得同源重组载体，包装产生含有PPV VP2蛋白和TAT蛋白转导域的重组杆状病毒，感染昆虫细胞，表达融合了PPV VP2蛋白和TAT蛋白转导域的重组TAT‑VP2蛋白，形成病毒样粒子(VLPs)。研究表明，本发明的重组病毒样粒子辅以佐剂接种动物，可有效刺激PPV特异性抗体产生，提高淋巴细胞产生细胞因子能力。因此，应用本发明可研制具有良好免疫效果的新型高效PPV亚单位疫苗。

公开(公告)号：CN109096393A

公开(公告)日：2018-12-28

申请号：CN201811016401.0

申请日：2018-08-31

申请人： 广西壮族自治区兽医研究所

发明人： 吴健敏 ,  刘金凤 ,  张振江 ,  覃绍敏 ,  白安斌 ,  唐海波 ,  陈凤莲 ,  马玲 ,  秦树英 ,  林俊 ,  杨磊

IPC分类号： C07K16/08 ,  C07K16/06 ,  C07K1/30 ,  C07K14/015 ,  C12N15/35 ,  C12N15/866

摘要： 本发明公开了一种猫瘟热治疗性抗体，以FPV灭活苗和FPV亚单位疫苗为免疫原，通过免疫马匹制得。据此建立了相应制备方法，该法创造性的以两种不同类型FPV免疫原按一定程序接种健康马匹，以FPV灭活苗为基础免疫原，以FPV亚单位疫苗为加强免疫原，产生高效价抗体后收集高免血，经IgG提纯、切除Fc’片段后制备获得高活性免疫球蛋白F(ab’)2。应用该法可大量制备马源抗FPV高免血清，提取和纯化高效价F(ab’)2抗体。试验表明，本发明制备猫瘟热治疗性抗体不仅具有较高的效价，同时具有确切的猫瘟热预防和治疗效果，可用于紧急预防和治疗猫瘟热，具有重要的现实意义和广阔的应用前景。