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公开(公告)号：CN118126880A
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202410232796.7
申请日：2024-03-01
申请人： 成都市农林科学院
摘要： 本发明公开了一种用于高通量筛选的无宿主背景干扰的植物内生细菌分离保藏方法，包含以下步骤：S1、植物预处理；S2、内生细菌培养物的获得；S3、确定内生细菌培养物的最佳培养浓度；S4、内生菌的分离培养；S5、内生菌筛选；S6.植物内生细菌16S全长基因扩增子纯化回收；S7.基于Nanopore平台的高通量测序及生物信息保藏。本发明的有益效果为：采用高通量培养法结合三代全长高通量测序技术进行植物内生细菌的快速鉴定，相较于现有的非培养方法可在测序完成后进行内生菌的保存，检测结果更完整；提供一种新的植物可培养内生细菌鉴定保藏方法，可有针对性的选择性培养植物内生细菌，极大提高植物内生菌的筛选及保藏效率。
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公开(公告)号：CN108823244A
公开(公告)日：2018-11-16
申请号：CN201810746000.4
申请日：2018-07-09
申请人： 成都市农林科学院
摘要： 本发明公开了一种无筛选过程的高效豇豆遗传转化方法及其应用，包含构建豇豆遗传转化的载体质粒、将上述载体质粒中转化到农杆菌中、制备遗传转化前农杆菌重悬液、豇豆子叶节的准备、超声波辅助农杆菌侵染、适度共培养、子叶节再生、转化苗生根及炼苗的步骤。本发明的有益效果是：提高了转化效率，取代了现有使用筛选剂进行筛选的方法，增加了豇豆转基因后续使用的安全性。
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公开(公告)号：CN107058535A
公开(公告)日：2017-08-18
申请号：CN201710217801.7
申请日：2017-04-05
申请人： 成都市农林科学院 , 成都隆纳生物科技有限公司
CPC分类号： C12Q1/6869 , C12Q2563/159 , C12Q2535/122 , C12Q2537/165
摘要： 本发明公开了一种用于高通量测序的无宿主背景干扰的豇豆内生真菌ITS基因扩增方法，本发明采用了经过修饰的寡聚核苷酸引物组合，通过多重PCR扩增的方法去除豇豆宿主来源的ITS基因的扩增，与此同时豇豆内生真菌的ITS基因的扩增不受影响，最终通过高通量测序的方法我们可对豇豆内生真菌(含致病微生物)的种类及丰度能够有一个详尽的调查和了解，对于豇豆内生真菌的鉴定提供了一个可靠的新途径。相对传统的分离纯化后鉴定的方法，本发明克服了已有的技术局限性。通过本发明可降低复杂操作过程中带来的环境污染，所需样本量极少，试验操作简便易行，可极大地提高豇豆真菌性病害研究水平。
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公开(公告)号：CN108823244B
公开(公告)日：2020-12-25
申请号：CN201810746000.4
申请日：2018-07-09
申请人： 成都市农林科学院
摘要： 本发明公开了一种无筛选过程的豇豆遗传转化方法及其应用，包含构建豇豆遗传转化的载体质粒、将上述载体质粒中转化到农杆菌中、制备遗传转化前农杆菌重悬液、豇豆子叶节的准备、超声波辅助农杆菌侵染、适度共培养、子叶节再生、转化苗生根及炼苗的步骤。本发明的有益效果是：提高了转化效率，取代了现有使用筛选剂进行筛选的方法，增加了豇豆转基因后续使用的安全性。
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