公开(公告)号：CN115558648B

公开(公告)日：2024-02-23

申请号：CN202110872222.2

申请日：2021-07-30

申请人： 扬州大学

发明人： 朱国强 ,  王鹏志 ,  王思权 ,  杨溢 ,  刘家奇 ,  段强德 ,  陶王敏 ,  夏芃芃 ,  洪天旗 ,  武荣飞 ,  常雅洁

IPC分类号： C12N5/20 ,  C07K16/12 ,  C07K16/06 ,  C07K1/30 ,  C12R1/91

摘要： 本发明公开两株抗细菌菌毛单克隆抗体、杂交瘤细胞株及其应用。本发明公开了简捷、快速制备抗细菌菌毛的单克隆抗体的制备方法，本发明的免疫原为在菌体表面展呈表达大肠杆菌F18菌毛的靶标抗原重组菌株S9H‑F18ab或沙门氏菌Peg菌毛的靶标抗原重组菌株S9H‑Peg，本发明制备方式简单，无需进行抗原的抽提、表达和纯化，抗原免疫注射时无需添加佐剂，免疫次数少，时间短；在杂交瘤细胞筛选过程中，无需利用ELISA，而是利用玻板凝集实验，可方便、快捷筛选出能分泌针对大肠杆菌F18菌毛凝集性抗体的杂交瘤细胞或针对沙门氏菌Peg菌毛凝集性抗体的杂交瘤细胞。本发明涉及到的方法可简便、高效的制备针对特定抗原靶标的单克隆抗体及其

公开(公告)号：CN115716867B

公开(公告)日：2023-08-08

申请号：CN202211495807.8

申请日：2022-11-24

申请人： 扬州大学

发明人： 朱国强 ,  刘家奇 ,  朱晓芳 ,  段强德 ,  朱丛睿 ,  武琥琮 ,  陶王敏 ,  连思琪 ,  羊扬 ,  夏芃芃 ,  孟霞 ,  王建业

IPC分类号： C07K14/165 ,  C12N15/50 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14 ,  G01N33/569 ,  C12R1/42

摘要： 本发明公开了鸡伤寒沙门氏菌V型分泌系统MisL及其展呈表达新型冠状病毒受体结合域B细胞表位靶标抗原中的应用。本发明基于鸡伤寒沙门氏菌V型分泌系统MisL能够在载体菌表面表达，同时在其膜外区域功能性展呈新型冠状病毒受体结合域的B细胞表位靶标抗原，该靶标抗原能够识别和特异性结合新型冠状病毒凝集抗体。鉴于本发明具有快速特异、敏感、便捷等优势，有望成为新型冠状病毒抗体诊断、检测监测和评估的重要技术和平台。

公开(公告)号：CN118620037A

公开(公告)日：2024-09-10

申请号：CN202410652934.7

申请日：2024-05-24

申请人： 扬州大学

发明人： 朱国强 ,  陶王敏 ,  刘家奇 ,  连思琪 ,  朱丛睿 ,  刘欣 ,  段强德 ,  羊扬 ,  夏芃芃

IPC分类号： C07K14/01 ,  C07K16/08 ,  G01N33/569 ,  C12N5/20

摘要： 本发明公开了非洲猪瘟病毒（ASFV）外囊膜p12蛋白表面B细胞中和表位及其筛选验证方法和应用，具体公开了ASFV外囊膜蛋白p12中两种筛选的B细胞表位GN08和MA11，其中抗表位GN08的单克隆抗体产生的杂交瘤细胞（保藏号CCTCC NO:C2023192），其分泌的细胞上清液和小鼠源腹水，利用ASFV病毒感染猪原代肺巨噬细胞（PAM）的细胞中和试验验证其具备中和ASFV病毒的活性，而抗MA11表位的杂交瘤细胞分泌的细胞上清液和小鼠源腹水不具备中和ASFV病毒活性。因此，GN08表位是ASFV外囊膜p12蛋白表面B细胞的中和表位，具备开发成为中和病毒表位靶点的应用潜力。

公开(公告)号：CN115716867A

公开(公告)日：2023-02-28

申请号：CN202211495807.8

申请日：2022-11-24

申请人： 扬州大学

发明人： 朱国强 ,  刘家奇 ,  朱晓芳 ,  段强德 ,  朱丛睿 ,  武琥琮 ,  陶王敏 ,  连思琪 ,  羊扬 ,  夏芃芃 ,  孟霞 ,  王建业

IPC分类号： C07K14/165 ,  C12N15/50 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14 ,  G01N33/569 ,  C12R1/42

摘要： 本发明公开了鸡伤寒沙门氏菌V型分泌系统MisL及其展呈表达新型冠状病毒受体结合域B细胞表位靶标抗原中的应用。本发明基于鸡伤寒沙门氏菌V型分泌系统MisL能够在载体菌表面表达，同时在其膜外区域功能性展呈新型冠状病毒受体结合域的B细胞表位靶标抗原，该靶标抗原能够识别和特异性结合新型冠状病毒凝集抗体。鉴于本发明具有快速特异、敏感、便捷等优势，有望成为新型冠状病毒抗体诊断、检测监测和评估的重要技术和平台。

公开(公告)号：CN118620042A

公开(公告)日：2024-09-10

申请号：CN202410652936.6

申请日：2024-05-24

申请人： 扬州大学

发明人： 朱国强 ,  陶王敏 ,  刘家奇 ,  刘欣 ,  段强德 ,  羊扬 ,  夏芃芃 ,  连思琪 ,  朱丛睿

IPC分类号： C07K14/165 ,  C12N15/50 ,  C07K16/10 ,  C12N5/20 ,  G01N33/569

摘要： 本发明公开一株分泌单克隆抗体（mAb）的杂交瘤细胞株，产生抗新型冠状病毒（SARS‑CoV‑2）囊膜刺突S蛋白表面SNNLDSKVGG（SG10）表位的mAb，公开了特异、简捷、快速筛选靶向SG10表位的mAb的制备筛选方法。将SG10插入沙门菌V型分泌系统MisL载客域，在菌体表面表达展呈该表位作为优势免疫原，免疫小鼠制备杂交瘤细胞的免疫小鼠B细胞；将SG10表位插入沙门菌PEG菌毛操纵子并导入惰性载体S9菌，该表位在S9菌体表面功能性表达展呈，基于表达该表位的重组S9菌建立的SG10表位直接介导的间接凝集检测方法能特异性识别分泌mAb的杂交瘤细胞上清，产生SG10表位‑mAb直接介导的特异性凝集试验，精准和便捷地筛选出分泌抗SG10表位的mAb的阳性杂交瘤细胞，病毒感染细胞的间接免疫荧光方法验证该mAb特异性。

公开(公告)号：CN116715737B

公开(公告)日：2024-02-23

申请号：CN202211488632.8

申请日：2022-11-24

申请人： 扬州大学

发明人： 朱国强 ,  刘家奇 ,  朱晓芳 ,  段强德 ,  朱丛睿 ,  杨斌 ,  牛琼 ,  武琥琮 ,  陶王敏 ,  李雅倩 ,  梁琰 ,  连思琪 ,  羊扬 ,  夏芃芃 ,  孟霞 ,  王建业

IPC分类号： C07K14/165 ,  C12N15/50 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  C07K16/10 ,  C12R1/42

摘要： 本发明公开了新型冠状病毒受体结合域B细胞表位的靶标抗原及其在鸡白痢沙门氏菌Peg菌毛展呈表达及其凝集抗体检测中的应用。本发明能检测到新冠灭活疫苗特异性凝集抗体，该敏感性显著高于传统血清学检测技术，且能检测到新冠灭活疫苗产生的特异性凝集抗体效价。鉴于本发明具有快速特异、敏感、便捷和成本低廉等优势，有望成为SARS‑CoV‑2早期感染诊断以及新冠疫苗免疫检测监测评估的重要技术和平台。

公开(公告)号：CN116715737A

公开(公告)日：2023-09-08

申请号：CN202211488632.8

申请日：2022-11-24

申请人： 扬州大学

发明人： 朱国强 ,  刘家奇 ,  朱晓芳 ,  段强德 ,  朱丛睿 ,  杨斌 ,  牛琼 ,  武琥琮 ,  陶王敏 ,  李雅倩 ,  梁琰 ,  连思琪 ,  羊扬 ,  夏芃芃 ,  孟霞 ,  王建业

IPC分类号： C07K14/165 ,  C12N15/50 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  C07K16/10 ,  C12R1/42

摘要： 本发明公开了新型冠状病毒受体结合域B细胞表位的靶标抗原及其在鸡白痢沙门氏菌Peg菌毛展呈表达及其凝集抗体检测中的应用。本发明能检测到新冠灭活疫苗特异性凝集抗体，该敏感性显著高于传统血清学检测技术，且能检测到新冠灭活疫苗产生的特异性凝集抗体效价。鉴于本发明具有快速特异、敏感、便捷和成本低廉等优势，有望成为SARS‑CoV‑2早期感染诊断以及新冠疫苗免疫检测监测评估的重要技术和平台。

公开(公告)号：CN115558648A

公开(公告)日：2023-01-03

申请号：CN202110872222.2

申请日：2021-07-30

申请人： 扬州大学

发明人： 朱国强 ,  王鹏志 ,  王思权 ,  杨溢 ,  刘家奇 ,  段强德 ,  陶王敏 ,  夏芃芃 ,  洪天旗 ,  武荣飞 ,  常雅洁

IPC分类号： C12N5/20 ,  C07K16/12 ,  C07K16/06 ,  C07K1/30 ,  C12R1/91

摘要： 本发明公开两株抗细菌菌毛单克隆抗体、杂交瘤细胞株及其应用。本发明公开了简捷、快速制备抗细菌菌毛的单克隆抗体的制备方法，本发明的免疫原为在菌体表面展呈表达大肠杆菌F18菌毛的靶标抗原重组菌株S9H‑F18ab或沙门氏菌Peg菌毛的靶标抗原重组菌株S9H‑Peg，本发明制备方式简单，无需进行抗原的抽提、表达和纯化，抗原免疫注射时无需添加佐剂，免疫次数少，时间短；在杂交瘤细胞筛选过程中，无需利用ELISA，而是利用玻板凝集实验，可方便、快捷筛选出能分泌针对大肠杆菌F18菌毛凝集性抗体的杂交瘤细胞或针对沙门氏菌Peg菌毛凝集性抗体的杂交瘤细胞。本发明涉及到的方法可简便、高效的制备针对特定抗原靶标的单克隆抗体及其应用。