一种从头合成黄烷酮的三功能酶及其合成方法和应用

    公开(公告)号:CN113528471A

    公开(公告)日:2021-10-22

    申请号:CN202110817915.1

    申请日:2021-07-20

    申请人: 扬州大学

    摘要: 本发明提出了一种从头合成黄烷酮的高活性三功能酶,将4‑香豆酰辅酶A连接酶基因和查尔酮异构酶基因、查尔酮合酶基因克隆至原核表达载体构建重组质粒,再转化大肠杆菌,以诱导表达重组酶,并利用纯化的重组酶建立无细胞合成体系,实现黄烷酮的体外酶促合成。本发明克服了黄烷酮的体外多酶合成体系中产量和底物转化率较低的问题,同时建立一种成分简单的体外酶促合成体系,不存在工程菌细胞内复杂的调控作用,反应过程易于精确控制、副产物少、产品分离相对简单、生产周期明显缩短、生产成本显著降低。

    用于鉴别不同血清型传染性支气管炎病毒活疫苗的半套式RT-PCR分型引物及试剂盒

    公开(公告)号:CN108866242A

    公开(公告)日:2018-11-23

    申请号:CN201810972679.9

    申请日:2018-08-24

    申请人: 扬州大学

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/6848 C12N15/11

    摘要: 本发明属于生物检测技术领域,具体涉及鸡传染性支气管炎病毒活疫苗的RT‑PCR分型检测引物及试剂盒。本发明所述的分型检测引物由序列如SEQ ID NO.1-2所示的通用引物和序列如SEQ ID NO.3-6所示的血清型特异性引物组成。本发明还公开了包含上述分型检测引物的试剂盒。利用本发明的引物和试剂盒,采用半套式RT‑PCR方法鉴别M型、4/91型、LDT3‑A型和QX型血清型传染性支气管炎病毒活疫苗,与常规PCR方法相比,具有更强的特异性和敏感性;还具有快速、高效、低成本的特点,可在5~6h内完成样品的检测,克服了传统血清中和试验的方法耗时较长的缺点,且该方法适合大批量样品的检测与分析。