公开(公告)号：CN105859883A

公开(公告)日：2016-08-17

申请号：CN201610237489.3

申请日：2016-04-15

申请人： 汕头大学

发明人： 胡忠 ,  伦镜盛 ,  刘丹 ,  张设熙 ,  董亚萍 ,  袁传飞

IPC分类号： C07K16/12 ,  G01N33/569 ,  G01N33/531 ,  C12Q1/68

CPC分类号： Y02A50/451 ,  Y02A50/52 ,  C07K16/1239 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/689 ,  G01N33/531 ,  G01N33/56911

摘要： 本发明涉及一种含OmpU抗体的免疫磁珠及其制备与捕获?多重PCR检测病原弧菌的方法，用弧菌的基因组作为模板PCR扩增OmpU基因，获得较纯的OmpU重组蛋白作为抗原制备抗体，经过偶联?洗涤的过程制备出含OmpU抗体的免疫磁珠；免疫磁珠能够捕获多种弧菌，然后用基于danJ基因设计的多重PCR特异性引物进行鉴定。最多同时检测副溶血弧菌、霍乱弧菌、溶藻弧菌、创伤弧菌和拟态弧菌，可广泛应用于环境及进出口食品检验中。本发明结合了免疫分离的特异性和PCR扩增的高效性，具有分离、浓缩、富集的能力，能够对样品中低浓度的病原菌进行高效的分离和富集，降低或消除了样品对PCR的抑制、影响，提高检测的极限，具有很好的应用前景。

公开(公告)号：CN104634979A

公开(公告)日：2015-05-20

申请号：CN201310574194.1

申请日：2013-11-15

申请人： 汕头大学

发明人： 胡忠 ,  袁传飞 ,  伦镜盛 ,  张设熙

IPC分类号： G01N33/68

CPC分类号： G01N33/6851 ,  G01N33/56911 ,  G01N33/56961

摘要： 微生物细胞表面蛋白抗原的筛选与鉴定方法，涉及一种简便、快捷筛选和鉴定微生物细胞表面蛋白抗原的方法。用微生物全细胞免疫沉淀分离出细胞表面蛋白的抗体，蛋白A/G琼脂糖捕捉抗原抗体复合物，洗脱得到抗原抗体复合物，再用SDS-PAGE分析免疫沉淀的蛋白。分析免疫原的丰度、抗体对抗原的亲和力、免疫原的定性、确定抗原的蛋白种类。建立基于免疫沉淀的蛋白质组学技术，用于高通量筛选具有免疫原性的蛋白质作为多价疫苗的候选靶位。根据免疫原的丰度和抗体对抗原的亲和力，能确定其作为疫苗蛋白的可能性。迅速确定某种微生物细胞表面具有免疫原性的蛋白，高效、快速、经济、实用。方法具有普遍性，不仅可以用于细菌，还可以用于真菌等微生物免疫原的鉴定。