嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA及其抗体和应用

    公开(公告)号:CN107164348A

    公开(公告)日:2017-09-15

    申请号:CN201710233498.X

    申请日:2017-04-11

    摘要: 本发明属于蛋白质分离纯化技术领域,具体涉及嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA及其抗体和应用。嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA,由基因片段在大肠杆菌细胞中表达,制备时,将所述的基因片段的编码区克隆进pET‑28a载体,转化大肠杆菌BL21感受态细菌;待细菌生长至对数生长期,以0.5mM IPTG诱导表达AhsA蛋白,25℃诱导24小时后离心收集菌体并纯化浓缩得到抗原蛋白,并基于此蛋白制备了多克隆抗体,经间接Elisa效价检测后抗体为阳性。本发明解决了嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA蛋白异源表达含量低,浓度差等问题,制备得到高纯度,高浓度嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA。制备的抗体可以特异性识别嗜水气单胞菌,从而为临床上该致病菌的诊断提供了新的技术手段。

    杂交瘤细胞株4A5及灿烂弧菌鞭毛蛋白FlgT单克隆抗体

    公开(公告)号:CN107723277A

    公开(公告)日:2018-02-23

    申请号:CN201710796788.5

    申请日:2017-09-06

    IPC分类号: C12N5/20 C07K16/12

    CPC分类号: C07K16/1239

    摘要: 本发明公开一种杂交瘤细胞株4A5及灿烂弧菌鞭毛蛋白FlgT单克隆抗体,杂交瘤细胞株4A5,已保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号:CGMCC No.14311。杂交瘤细胞株4A5是利用重组蛋白FlgT作为抗原免疫小鼠,取小鼠脾脏细胞与SP2/0细胞进行融合,有限稀释法获得单克隆,ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞而获得,杂交瘤细胞株4A5所分泌的抗灿烂弧菌鞭毛蛋白FlgT单抗更具有特异性,可应用于免疫检测领域。