公开(公告)号：CN115975901A

公开(公告)日：2023-04-18

申请号：CN202310084887.6

申请日：2023-02-08

Applicant: 江南大学

Inventor： 周景文 ,  陈坚 ,  刘世柯 ,  曾伟主

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/61 ,  C12N15/54 ,  C12N15/53 ,  C12P17/16 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及工程大肠杆菌合成牡荆素和荭草苷的应用，属于生物工程技术领域。本发明构建了一株能充足供应糖基供体UDPG的菌株，通过使用CRISPR‑Cas9系统敲除糖酵解途径关键基因pgi和zwf，以及敲除了UDPG合成路径的旁路基因ugd，gcd和otsA；使用pETDuet‑1质粒过量表达大肠杆菌内源的UDPG关键基因磷酸葡萄糖变位酶基因(pgm)和UTP‑葡萄糖‑1‑磷酸尿苷酸转移酶(galU)，并使用pACYCDuet质粒游离表达UDP尿苷激酶(ndk)，构建一株能充足供应UDPG菌株，并在此菌株的基础上表达金莲花来源的8位碳苷糖基转移酶TcCGT1，以黄酮或其他类黄酮为底物用于合成糖基产物，在本发明中以木犀草素、芹菜素为例进行糖基产物牡荆素和荭草苷的发酵生产，最终，在5L发酵罐中牡荆素和荭草苷的产量分别达到17.25g/L和36.52g/L。

公开(公告)号：CN113186214A

公开(公告)日：2021-07-30

申请号：CN202110373944.3

申请日：2021-04-07

Applicant: 江南大学

Inventor： 周景文 ,  刘世柯 ,  曾伟主 ,  陈坚 ,  余世琴

IPC: C12N15/56 ,  C12N9/10 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P17/06 ,  C12P17/16 ,  A61K31/352 ,  A61P7/02 ,  A61P9/10 ,  A61P29/00 ,  A61P39/00 ,  A61P39/06 ,  A23L33/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种合成牡荆素和荭草苷的方法，属于生物工程技术领域。本发明将来自金莲花的8位C糖基转移酶TcCGT1与来自大豆的蔗糖合成酶GMSUS进行偶联反应，开发出一种经济效益高的合成牡荆素和荭草苷的方法。在本发明的反应体系中偶联反应13h，荭草苷和牡荆素的浓度分别达到2324.4mg/L和5524.1mg/L，对应底物木犀草素和芹菜素的摩尔转化率分别为91.4％和89.3％，UDP的循环数分别为17.3和42.3次。该方法能有效降低反应成本，具有较高的经济价值。