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公开(公告)号：CN103215198B
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201310043508.5
申请日：2013-02-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 利用重组钝齿棒杆菌以葡萄糖为底物一步法合成γ-氨基丁酸的方法属于基因工程和酶工程领域。本发明应用基因工程方法，将钝齿棒杆菌SYPA5-5基因argB敲除，获得能够积累谷氨酸的安全菌株钝齿棒杆菌E01；从L.Plantarum GB01-21克隆谷氨酸脱羧酶基因于钝齿棒杆菌E01中表达，获得以葡萄糖为底物直接合成γ-氨基丁酸的重组钝齿棒杆菌C.crenatum E01/pGAD。重组菌发酵液γ-氨基丁酸积累量达13.98g/L。此发明成功整合谷氨酸和γ-氨基丁酸代谢途径，实现葡萄糖到γ-氨基丁酸一步法生产，简化制备途径，降低成本，提高安全性，为氨基酸的高效低成本制备提供崭新的思路。
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公开(公告)号：CN103173466A
公开(公告)日：2013-06-26
申请号：CN201210210421.8
申请日：2012-06-20
Applicant: 江南大学
Abstract: L-精氨酸是人体和动物体内的半必需碱性氨基酸，具有多种独特的生理和药理作用。本发明主要针对精氨酸合成的竞争旁路代谢关键酶基因进行敲除。以钝齿棒杆菌基因组为模板，分别以proB基因上下游引物进行PCR扩增，利用重叠PCR扩增获得缺失型基因proB’。连接重组质粒pK18mobsacB-proB’电击转化进入钝齿棒杆菌，筛选二次同源重组基因缺失型菌株。将上述重组菌钝齿棒杆菌ΔproB进行摇瓶发酵实验，钝齿棒杆菌中proB基因的功能缺失，使得脯氨酸合成的能力大大降低，同时提高了糖耗，发酵液中脯氨酸的积累量只有对照菌株的2.7％，从而使目标氨基酸L-精氨酸产量提高。
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公开(公告)号：CN103243128B
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201310196284.1
申请日：2013-05-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种利用天津短杆菌和植物乳杆菌混合发酵高产γ-氨基丁酸的方法，属于发酵工程和酶工程领域。本发明利用天津短杆菌SW07-1将葡萄糖转化为谷氨酸，再经植物乳杆菌GB01-21将上步发酵液的谷氨酸转化为γ-氨基丁酸。转化前，谷氨酸发酵液调到谷氨酸脱羧酶最适pH，建立转化体系，第二步发酵液经过滤或离心的方法得到植物乳杆菌GB01-21的菌体，将其添加到转化体系进行全细胞转化。发酵液原有谷氨酸转化完毕时转化液γ-氨基丁酸为59.2g/L，摩尔转化率为93.6％。继续添加外源谷氨酸转化完毕后GABA含量为96.5g/L，摩尔转化率为91.8％。
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公开(公告)号：CN103243128A
公开(公告)日：2013-08-14
申请号：CN201310196284.1
申请日：2013-05-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种利用天津短杆菌和植物乳杆菌混合发酵高产γ-氨基丁酸的方法，属于发酵工程和酶工程领域。本发明利用天津短杆菌SW07-1将葡萄糖转化为谷氨酸，再经植物乳杆菌GB01-21将上步发酵液的谷氨酸转化为γ-氨基丁酸。转化前，谷氨酸发酵液调到谷氨酸脱羧酶最适pH，建立转化体系，第二步发酵液经过滤或离心的方法得到植物乳杆菌GB01-21的菌体，将其添加到转化体系进行全细胞转化。发酵液原有谷氨酸转化完毕时转化液γ-氨基丁酸为59.2g/L，摩尔转化率为93.6％。继续添加外源谷氨酸转化完毕后GABA含量为96.5g/L，摩尔转化率为91.8％。
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公开(公告)号：CN103215198A
公开(公告)日：2013-07-24
申请号：CN201310043508.5
申请日：2013-02-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 利用重组钝齿棒杆菌以葡萄糖为底物一步法合成γ-氨基丁酸的方法属于基因工程和酶工程领域。本发明应用基因工程方法，将钝齿棒杆菌SYPA5-5基因argB敲除，获得能够积累谷氨酸的安全菌株钝齿棒杆菌E01；从L.Plantarum GB01-21克隆谷氨酸脱羧酶基因于钝齿棒杆菌E01中表达，获得以葡萄萄糖为底物直接合成γ-氨基丁酸的重组钝齿棒杆菌C.crenatum E01/pGAD。重组菌发酵液γ-氨基丁酸积累量达13.98g/L。此发明成功整合谷氨酸和γ-氨基丁酸代谢途径，实现葡萄糖到γ-氨基丁酸一步法生产，简化制备途径，降低成本，提高安全性，为氨基酸的高效低成本制备提供崭新的思路。
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