公开(公告)号：CN104830888A

公开(公告)日：2015-08-12

申请号：CN201510143997.0

申请日：2015-03-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  许正宏 ,  张乐乐 ,  张显 ,  徐美娟 ,  杨套伟

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/53 ,  C12N1/21 ,  C12P33/16 ,  C12P33/02 ,  C12R1/32

Abstract: 本发明公开了一种新金色分枝杆菌表达载体及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明的新金色分枝杆菌表达载体pMTac-2，可用于在新金色分枝杆菌高效表达蛋白，适用于分枝杆菌代谢产物的研究和生产。利用pMTac-2在新金色分枝杆菌中过量表达KSDD，使重组菌M.neoaurum JC-12/pMTac-2-ksdd胞内的KSDD活性比原始菌提高15.12倍。以30g/L植物甾醇为底物，5L发酵罐中重组菌M.neoaurum JC-12/pMTac-2-ksdd的ADD产量达到15g/L以上，为目前报道的发酵法利用新金色分枝杆菌降解植物甾醇合成ADD的最高水平。因此，该表达体系能够有效利用于新金色分枝杆菌的遗传改造。

公开(公告)号：CN104830888B

公开(公告)日：2018-05-01

申请号：CN201510143997.0

申请日：2015-03-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  许正宏 ,  张乐乐 ,  张显 ,  徐美娟 ,  杨套伟

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/53 ,  C12N1/21 ,  C12P33/16 ,  C12P33/02 ,  C12R1/32

Abstract: 本发明公开了一种新金色分枝杆菌表达载体及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明的新金色分枝杆菌表达载体pMTac‑2，可用于在新金色分枝杆菌高效表达蛋白，适用于分枝杆菌代谢产物的研究和生产。利用pMTac‑2在新金色分枝杆菌中过量表达KSDD，使重组菌M.neoaurum JC‑12/pMTac‑2‑ksdd胞内的KSDD活性比原始菌提高15.12倍。以30g/L植物甾醇为底物，5L发酵罐中重组菌M.neoaurum JC‑12/pMTac‑2‑ksdd的ADD产量达到15g/L以上，为目前报道的发酵法利用新金色分枝杆菌降解植物甾醇合成ADD的最高水平。因此，该表达体系能够有效利用于新金色分枝杆菌的遗传改造。