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公开(公告)号：CN104388372B
公开(公告)日：2017-07-21
申请号：CN201410734915.5
申请日：2014-12-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产软骨素的重组枯草芽孢杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明将UDP‑GlcNAc C4异构酶KfoA和软骨素合成酶KfoC编码基因整合于枯草芽孢杆菌基因组上完善了其代谢合成软骨素途径，同时，对枯草芽孢杆菌中UDP‑GlcA和UDP‑GlcNAc合成途径的基因，进行模块化组装表达分析，通过控制不同的UDP‑GlcA和UDP‑GlcNAc浓度，分析了枯草芽孢杆菌产软骨素合成途径上的关键基因及节点。本发明为食品级微生物高效生产制备软骨素奠定了一定的基础，适合于工业化生产应用。
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公开(公告)号：CN106497845A
公开(公告)日：2017-03-15
申请号：CN201611149169.9
申请日：2016-12-14
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12P19/26 , C12N9/0006 , C12N9/104 , C12N9/1241 , C12N9/90 , C12P19/04 , C12Y207/07009 , C12Y504/02002 , C12Y504/0201
Abstract: 本发明公开了一种高产软骨素的重组枯草芽孢杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明通过在产软骨素的枯草芽孢杆菌中进行合成途径优化，即共表达UDP-GlcUA途径和UDP-GlcNAc途径中的关键酶基因，提高了软骨素的产量。本发明提供的重组枯草芽孢杆菌可满足医疗卫生和食品安全的要求，无内毒素和病原感染的风险；并可以使软骨素的积累达到最高，为6.06g/L，分子量为78.64kD。本研究为高产软骨素提供了新策略，一方面可应用于其它糖胺聚糖，另一方面为工业化大规模生产软骨素奠定了基础。
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公开(公告)号：CN104789555A
公开(公告)日：2015-07-22
申请号：CN201510212921.9
申请日：2015-04-29
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种基于合成单链DNA文库进化基因表达调控元件的方法，属于基因工程技术领域。本发明基于PCR技术，先得到单链突变体，再以此为模板获得多样性丰富的双链突变体文库。突变文库重组表达载体后转化宿主进行高通量筛选进化突变株。本发明采用此技术，成功对启动子进行体外改造，获得了性质非常优异的突变株。本方法实现了基因的快速体外进化，操作简单，特别适合于对基因内部引入丰富的突变多样性，进行快速定向进化。
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公开(公告)号：CN104498420B
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201410738381.3
申请日：2014-12-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产肝素前体的重组枯草芽孢杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明将α‑糖基转移酶编码基因和β‑糖基转移酶编码基因整合于枯草芽孢杆菌基因组上表达，同时，对枯草芽孢杆菌中UDP‑GlcA和UDP‑GlcNAc合成途径的基因，进行模块化组装表达分析，通过控制不同的UDP‑GlcA和UDP‑GlcNAc浓度，实现枯草芽孢杆菌产不同分子量范围的肝素前体。本发明为食品级微生物高效生产制备肝素前体奠定了一定的基础，适合于工业化生产应用。
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公开(公告)号：CN106148265A
公开(公告)日：2016-11-23
申请号：CN201610561891.7
申请日：2016-07-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产硫酸软骨素裂解酶的重组枯草芽孢杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明将普通变形杆菌来源的硫酸软骨素裂解酶在枯草芽孢杆菌中进行异源表达，选取信号肽amyX，采用3种强组成型启动子和pP43NMK载体本身的强RBS，并加入组氨酸标签以利于后续纯化，实现了硫酸软骨素裂解酶在枯草芽孢杆菌中表达酶活的提高。本发明为食品级微生物高效生产制备硫酸软骨素裂解酶奠定了一定的基础，适合于工业化生产应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104388372A
公开(公告)日：2015-03-04
申请号：CN201410734915.5
申请日：2014-12-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产软骨素的重组枯草芽孢杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明将UDP-GlcNAc C4异构酶KfoA和软骨素合成酶KfoC编码基因整合于枯草芽孢杆菌基因组上完善了其代谢合成软骨素途径，同时，对枯草芽孢杆菌中UDP-GlcA和UDP-GlcNAc合成途径的基因，进行模块化组装表达分析，通过控制不同的UDP-GlcA和UDP-GlcNAc浓度，分析了枯草芽孢杆菌产软骨素合成途径上的关键基因及节点。本发明为食品级微生物高效生产制备软骨素奠定了一定的基础，适合于工业化生产应用。
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公开(公告)号：CN106244566B
公开(公告)日：2019-08-20
申请号：CN201610652888.6
申请日：2016-08-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种软骨素合酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明将大肠杆菌K4来源的软骨素合酶在枯草芽孢杆菌中进行保守区域中非保守氨基酸的组合突变，获得了软骨素产量提高、分子量减小的突变体。同时，通过3L发酵罐放大发酵，实现了枯草芽孢杆菌高产低分子量的软骨素，3L罐上产物产量为7.25g/L，产物平均分子量为41.62kDa。本发明为食品级微生物高效生产制备软骨素奠定了一定的基础，适合于工业化生产应用。
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公开(公告)号：CN106497845B
公开(公告)日：2019-08-06
申请号：CN201611149169.9
申请日：2016-12-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产软骨素的重组枯草芽孢杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明通过在产软骨素的枯草芽孢杆菌中进行合成途径优化，即共表达UDP‑GlcUA途径和UDP‑GlcNAc途径中的关键酶基因，提高了软骨素的产量。本发明提供的重组枯草芽孢杆菌可满足医疗卫生和食品安全的要求，无内毒素和病原感染的风险；并可以使软骨素的积累达到最高，为6.06g/L，分子量为78.64kD。本研究为高产软骨素提供了新策略，一方面可应用于其它糖胺聚糖，另一方面为工业化大规模生产软骨素奠定了基础。
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公开(公告)号：CN105838688B
公开(公告)日：2019-03-19
申请号：CN201610396747.2
申请日：2016-06-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种透明质酸合酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明将兽疫链球菌来源的透明质酸合酶在枯草芽孢杆菌中进行胞内结构域突变，获得产量和分子量均有正向效果的突变体。同时，对枯草芽孢杆菌中UDP‑GlcUA和UDP‑N‑GlcNAc合成途径的基因，进行模块化组装表达分析，通过调控不同的UDP‑GlcA和UDP‑GlcNAc浓度及比例，实现枯草芽孢杆菌高产大分子量范围的透明质酸。本发明为食品级微生物高效生产制备透明质酸奠定了一定的基础，适合于工业化生产应用。
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公开(公告)号：CN107227284A
公开(公告)日：2017-10-03
申请号：CN201710390552.1
申请日：2017-05-27
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/2474 , C12P19/26 , C12Y302/01035
Abstract: 本发明公开了一种发酵小分子透明质酸的重组兽疫链球菌，属于生物工程技术领域。本发明将水蛭来源的透明质酸酶在兽疫链球菌中进行异源表达，选取9种信号肽与透明质酸酶N端融合，并采用Pspac诱导型启动子和链球菌RBS，通过比较酶活，筛选合适的信号肽，实现了透明质酸酶在兽疫链球菌中的高效分泌表达，同时通过降解兽疫链球菌自身所产大分子透明质酸，获得了活性小分子透明质酸，并有一定的产量提升。本发明为微生物系统高效发酵制备小分子透明质酸奠定了基础，适合于工业化生产应用。
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