公开(公告)号：CN104672318A

公开(公告)日：2015-06-03

申请号：CN201410775687.6

申请日：2014-12-17

申请人： 江南大学

发明人： 陈伟 ,  李利云 ,  陆源 ,  彭荣刚 ,  李欣哲 ,  谭敬 ,  陈永康 ,  邬敏辰 ,  吴静

IPC分类号： C07K14/54 ,  C12N15/24 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/84

CPC分类号： C07K14/54 ,  C12N15/81

摘要： 本发明提供了一种人白细胞介素-29(hIL-29)第43位赖氨酸定点突变为亮氨酸的重组变异体(rhIL-29M)及其制备方法，属于生物技术领域。本发明具体方法为：1)设计合成IL-29变异体的特异性引物及突变引物；2)用特异性引物及突变引物对hIL-29编码基因第127、128位碱基进行定点突变；3)构建含hIL-29变异体编码基因的重组真核表达载体，转化毕赤酵母，获得重组酵母工程菌；4)用含1％(v/v)甲醇的培养液诱导培养酵母工程菌；5)用SP-Sepharose Fast Flow层析柱从培养液上清纯化hIL-29变异体。本发明构建的重组酵母工程菌可高密度发酵并表达肽链第43位赖氨酸突变为亮氨酸的rhIL-29变异体，适用于工业化制备rhIL-29变异体。