公开(公告)号：CN114752590B

公开(公告)日：2023-09-08

申请号：CN202210041651.X

申请日：2022-01-14

Applicant: 江南大学

Inventor： 关欣 ,  堵国成 ,  李妹 ,  陈坚 ,  周景文

IPC: C12N9/94 ,  C12N9/52 ,  C12N9/50 ,  C12N5/0775

Abstract: 本发明公开了一种高效且经济的猪肌肉干细胞的分离方法及其应用，属于生物技术领域。本发明通过组合不同消化肌肉组织的酶，确定不同组合酶释放单细胞的能力，选取最高效经济的酶组合消化方式(链霉蛋白酶与分散酶组合)，最后通过差速纯化方法得到了大量的肌肉干细胞。本发明进一步公开了如何高效消化猪肌肉组织的方法，可以在降低成本的同时或许最多的肌肉干细胞。应用本酶组合消化分离方法，可以稳定获得总单细胞数为4.6‑6×106个细胞/g，猪肌肉干细胞数为8‑15×105个细胞/g(以CD29，CD56双阳性比例)。分离得到的肌肉干细胞有较强的分化能力，为细胞培养肉种子细胞的研究与实际生产提供了高效经济的分离方法。

公开(公告)号：CN112501115B

公开(公告)日：2023-08-25

申请号：CN202011499864.4

申请日：2020-12-17

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈坚 ,  周景文 ,  李妹 ,  雷庆子 ,  关欣 ,  余世琴 ,  堵国成

IPC: C12N5/077

Abstract: 本发明公开了一种兔肌肉干细胞的提取分离及纯化方法，属于生物技术领域。本发明的分离纯化方法包括取得无菌的肌肉组织，高效率的消化肌肉组织以得到大量的肌肉单核细胞以及通过percoll梯度纯化获得高纯度的兔肌肉干细胞。应用本发明的纯化方法，可以稳定的获得纯度超过90％(以CD56染色为阳性计)的兔肌肉干细胞。应用本发明的方法，为兔的肌肉干细胞的培养提供了有效的分离提取方法。

公开(公告)号：CN112501115A

公开(公告)日：2021-03-16

申请号：CN202011499864.4

申请日：2020-12-17

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈坚 ,  周景文 ,  李妹 ,  雷庆子 ,  关欣 ,  余世琴 ,  堵国成

IPC: C12N5/0775 ,  A23J1/02

Abstract: 本发明公开了一种兔肌肉干细胞的提取分离及纯化方法，属于生物技术领域。本发明的分离纯化方法包括取得无菌的肌肉组织，高效率的消化肌肉组织以得到大量的肌肉单核细胞以及通过percoll梯度纯化获得高纯度的兔肌肉干细胞。应用本发明的纯化方法，可以稳定的获得纯度超过90％(以CD56染色为阳性计)的兔肌肉干细胞。应用本发明的方法，为兔的肌肉干细胞的培养提供了有效的分离提取方法。

公开(公告)号：CN114752590A

公开(公告)日：2022-07-15

申请号：CN202210041651.X

申请日：2022-01-14

Applicant: 江南大学

Inventor： 关欣 ,  堵国成 ,  李妹 ,  陈坚 ,  周景文

IPC: C12N9/94 ,  C12N9/52 ,  C12N9/50 ,  C12N5/0775

Abstract: 本发明公开了一种高效且经济的猪肌肉干细胞的分离方法及其应用，属于生物技术领域。本发明通过组合不同消化肌肉组织的酶，确定不同组合酶释放单细胞的能力，选取最高效经济的酶组合消化方式(链霉蛋白酶与分散酶组合)，最后通过差速纯化方法得到了大量的肌肉干细胞。本发明进一步公开了如何高效消化猪肌肉组织的方法，可以在降低成本的同时或许最多的肌肉干细胞。应用本酶组合消化分离方法，可以稳定获得总单细胞数为4.6‑6×106个细胞/g，猪肌肉干细胞数为8‑15×105个细胞/g(以CD29，CD56双阳性比例)。分离得到的肌肉干细胞有较强的分化能力，为细胞培养肉种子细胞的研究与实际生产提供了高效经济的分离方法。