公开(公告)号：CN118440833A

公开(公告)日：2024-08-06

申请号：CN202410588945.3

申请日：2024-05-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘延峰 ,  陈坚 ,  刘龙 ,  吕雪芹 ,  董晓敏 ,  林滢

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N15/67 ,  C12N15/62 ,  C12N15/31 ,  C07K14/77 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明涉及一种通过改造内质网提高卵清蛋白产量的酿酒酵母，属于基因工程技术领域。本发明在酿酒酵母CEN.PK2‑1C中异源表达卵清蛋白编码基因，并在卵清蛋白的N端上游插入INU1信号肽，以实现卵清蛋白的胞外分泌；之后使用荧光蛋白表征内质网中未折叠蛋白反应，在酿酒酵母中选用强度不同的启动子共表达分子伴侣Kar2和PDI，以促进内质网的折叠；敲除opi1基因，提高产物分泌量；过表达转录因子INO2和INO4，使内质网扩张，增加酿酒酵母的蛋白质合成能力并促进了卵清蛋白的合成。构建得到的酿酒酵母发酵生产72小时卵清蛋白的产量达到6.2mg/L。