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公开(公告)号：CN105063131B
公开(公告)日：2020-02-14
申请号：CN201510533363.6
申请日：2015-08-27
申请人： 江南大学
摘要： 一种利用发酵液分割法提高发酵罐使用效率的糖化酶发酵工艺，属于酶工程和发酵工程技术领域。本发明是在黑曲霉GB0506糖化酶发酵酶活线性增长末期，将发酵液分配到几个未使用的发酵罐中，加新鲜发酵培养基继续发酵，确定发酵液分割的最佳时机为发酵118‑120小时，最佳分割方式为1罐分割为3罐。与原有工艺相比，采用该法获得的发酵液最终发酵酶活没有明显变化，但平均每一发酵罐在罐发酵时间大幅下降，极大节约发酵过程电能消耗。本发明还提供一种针对将发酵液平均分配到3个发酵罐的发酵罐组合使用方法，在相应工艺条件下，单位发酵体积的发酵强度提高54%以上。利用发酵液分割法的糖化酶发酵新工艺为酶制剂生产企业在原有设备基础上大幅提高发酵罐使用效率。
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公开(公告)号：CN102199553B
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201110116783.6
申请日：2011-05-06
申请人： 江南大学
摘要： 一株耐酸酵母及其代谢工程构建产L-乳酸重组菌的方法，属于基因工程技术领域。本发明筛选分离得到一株能在pH2.5条件下生长且不利用乳酸的酵母，鉴定为木兰假丝酵母C4(CandidamagnoliaeC4)，在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCCNO：M2010362；将来源于米根霉As3.819的乳酸脱氢酶编码基因(ldhA)插入含有G418抗性基因的酵母穿梭载体，构建了重组质粒pYX212-kanMX-ldhA；电转化入木兰假丝酵母C4中，得到一株具有产L-乳酸能力的重组菌株木兰假丝酵母C42，其产乳酸量达到42g/L。本发明所构建的木兰假丝酵母C42具有耐乳酸的明显优势，在生产中可以大幅度降低中和剂CaCO3的用量，减少环境污染。
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公开(公告)号：CN101974543B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN201010256287.6
申请日：2010-08-18
申请人： 江南大学
摘要： 一种来源于芽孢杆菌的胞外普鲁兰酶编码基因及其应用，属于微生物、酶工程技术领域。本发明筛选到一株具有普鲁兰分解能力的芽孢杆菌Bacillus sp.042，利用反向PCR技术克隆了普鲁兰酶编码基因pulA042编码区完整序列，序列分析显示该基因编码区全长2571碱基，编码一856个氨基酸残基的多肽链，多肽链N端32个氨基酸残基组成一典型的信号肽，因此基因pulA042编码一种胞外普鲁兰酶。Bacillus sp.042普鲁兰酶基因pulA042的表达产物具有分解普鲁兰和红色普鲁兰的活性，能降解淀粉中α-1，6糖苷键，不降解α-1，4糖苷键，是一种I型普鲁兰酶。利用基因pulA042生产的重组酶在淀粉加工中用于分解淀粉或糊精分子中α-1，6糖苷键。
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公开(公告)号：CN102277308A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110215771.9
申请日：2011-07-29
申请人： 江南大学
CPC分类号： Y02P20/588
摘要： 本发明涉及一种用于麦芽糖生产的固定化催化剂及其制备方法，属于酶工程和农副产品深加工技术领域。本发明以红薯为原料，用反转录技术提取其β-淀粉酶基因，再与来源于酿酒酵母的α凝集素编码基因在读框内进行融合，融合基因转化酿酒酵母W303-1A，获得了β-淀粉酶在酵母表面锚定的酿酒酵母，进一步大规模培养此重组酵母细胞，收获细胞，用化学、物理方法稳定和交联此重组酵母，获得固定化β-淀粉酶，该酶活为50~250DPo/g。运用该固定化β-淀粉酶可从液化淀粉直接生产出55%~65%的高麦芽糖浆；此固定化β-淀粉酶反复使用10次，酶活丢失率小于20%。
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公开(公告)号：CN1831110A
公开(公告)日：2006-09-13
申请号：CN200610038937.3
申请日：2006-03-17
申请人： 江南大学
摘要： 一种高发酵速率的重组酒精酵母及其构建和所用的表达载体，属于微生物发酵工程领域。本发明提供了一种在酒精酵母中整合表达外源酸性蛋白酶基因的表达载体pYEI－222及其在酒精酵母中表达外源酸性蛋白酶基因的重组质粒pYEI－ap，提供了一种具有高酒精发酵速率的重组酒精酵母CCTCC M206009和重组酒精酵母CCTCC M206009的构建方法。本发明可用于对酒精酵母的遗传改良研究和用于酒精工业的技术进步。
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公开(公告)号：CN1702173A
公开(公告)日：2005-11-30
申请号：CN200510081647.2
申请日：2005-06-27
申请人： 江南大学
摘要： 一种编码高温酸性α－淀粉酶基因及其合成、克隆和表达，属于微生物基因工程领域。本发明提供了一种人工合成的高温酸性α－淀粉酶基因amyF及其人工合成方法，提供了amyF的核苷酸序列，提供了含有amyF的克隆载体pSK－amyF和芽孢杆菌分泌表达载体pBL－amyF，以及运用pBL－amyF进行重组芽孢杆菌的构建，重组酶的制备和酶学性质的进一步分析。本发明可用于在芽孢杆菌中高效表达和制备重组高温酸性α－淀粉酶，实现在高温酸性条件下快速水解淀粉。
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公开(公告)号：CN1699576A
公开(公告)日：2005-11-23
申请号：CN200510080820.7
申请日：2005-06-30
申请人： 江南大学
摘要： 一种内切β－1，3葡聚糖酶基因及其克隆方法，属于微生物基因工程领域。本发明提供了来源于粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)AS 3.1604的一种内切β－1，3葡聚糖酶基因glu，提供了基因glu的核苷酸序列和相应蛋白质的氨基酸序列，提供了含有基因glu的大肠杆菌表达载体pET28a－glu以及在大肠杆菌中的高效表达。本发明可用于内切β－1，3葡聚糖酶工业化生产的基因工程菌的构建，提高微生物发酵法生产内切β－1，3葡聚糖酶的水平和质量。
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公开(公告)号：CN102286389A
公开(公告)日：2011-12-21
申请号：CN201110215758.3
申请日：2011-07-29
申请人： 江南大学
摘要： 本发明涉及一种直接从淀粉酿制啤酒的方法及其专用啤酒酵母的构建。以10%~12%淀粉为主料，经淀粉糊化液化、脱色后添加0.03%~0.07%酒花，煮沸后添加0~2%大麦麦芽接入专用啤酒酵母，10~11℃、pH5.5~6.0，保温发酵1~2周后出酒。其所用的专用啤酒酵母是通过细胞表面工程方法将来源于米根霉的真菌α-淀粉酶基因与酿酒酵母α凝集素基因融合转化啤酒酵母所得的，其表达的淀粉酶基因不向培养介质分泌，而是与α凝集素形成异源融合蛋白附着在酵母细胞表面，运用此专用啤酒酵母减少了原料糖化环节，极大程度上改善了传统糖化过程不足、降低了啤酒生产的成本。
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公开(公告)号：CN101418276B
公开(公告)日：2010-12-22
申请号：CN200810235368.0
申请日：2008-12-08
申请人： 江南大学
摘要： 一种宿主细胞及其用于重组蛋白高效分泌表达的方法，属于微生物工程和发酵工程领域。本发明提供了一种地衣芽孢杆菌宿主细胞CBB3008，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO：M 208236。本发明将通过基因克隆技术获得的工业酶制剂的表达质粒转化入此宿主细胞中，在此宿主细胞中高效合成工业酶制剂，再通过此宿主细胞的蛋白分泌系统，将合成的酶蛋白高效分泌到培养基中，可以引导工业酶制剂的高效、分泌生产。由此有助于降低工业酶制剂的发酵制造成本、简化发酵制造工艺以及降低发酵工业环境压力。本发明的宿主细胞筛选与遗传改良方法，也可以用于其它类型的宿主细胞，特别是枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌等宿主细胞的选育。
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公开(公告)号：CN100422308C
公开(公告)日：2008-10-01
申请号：CN200610038937.3
申请日：2006-03-17
申请人： 江南大学
摘要： 一种高发酵速率的重组酒精酵母及其构建和所用的表达载体，属于微生物发酵工程领域。本发明提供了一种在酒精酵母中整合表达外源酸性蛋白酶基因的表达载体pYEI-222及其在酒精酵母中表达外源酸性蛋白酶基因的重组质粒pYEI-ap，提供了一种具有高酒精发酵速率的重组酒精酵母CCTCC M206009和重组酒精酵母CCTCC M206009的构建方法。本发明可用于对酒精酵母的遗传改良研究和用于酒精工业的技术进步。
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