公开(公告)号：CN104531747A

公开(公告)日：2015-04-22

申请号：CN201410748914.6

申请日：2014-12-09

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  秦敬儒 ,  徐美娟 ,  张显 ,  杨套伟

IPC: C12N15/77 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  C12P13/10 ,  C12R1/15

Abstract: 通过引入PHB代谢途径到Corynebacterium crenatum SYPA中，从而高产L-精氨酸，属于基因工程和生物工程领域。该发明酶切质粒pBHR68获得合成PHB的操纵子，与棒杆菌表达载体pDXW-10连接，并将其在C.crenatum SYPA中表达，为国内外首次通过引入PHB代谢途径在野生型钝齿棒杆菌中高产L-精氨酸。对构建的基因工程菌株进行酶活力测定及胞内辅酶水平研究证明C.crenatum SYPA/pDXW-10-phbCAB合成L-精氨酸的能力得到加强。最终在30℃，pH 7.0及600rpm条件下，C.crenatum SYPA/pDXW-10-phbCAB在5-L发酵罐发酵96h可产得43.21 g/L的L-精氨酸，为国内外首次通过引入PHB代谢途径到菌体内，调节胞内代谢网络，最终实现高产L-精氨酸的目的，为微生物工业化生产L-精氨酸提供了基础。

公开(公告)号：CN104531747B

公开(公告)日：2018-02-02

申请号：CN201410748914.6

申请日：2014-12-09

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  秦敬儒 ,  徐美娟 ,  张显 ,  杨套伟

IPC: C12N15/77 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  C12P13/10 ,  C12R1/15

Abstract: 通过引入PHB代谢途径到Corynebacterium crenatum SYPA中，从而高产L‑精氨酸，属于基因工程和生物工程领域。该发明酶切质粒pBHR68获得合成PHB的操纵子，与棒杆菌表达载体pDXW‑10连接，并将其在C.crenatum SYPA中表达，为国内外首次通过引入PHB代谢途径在野生型钝齿棒杆菌中高产L‑精氨酸。对构建的基因工程菌株进行酶活力测定及胞内辅酶水平研究证明C.crenatum SYPA/pDXW‑10‑phbCAB合成L‑精氨酸的能力得到加强。最终在30℃，pH 7.0及600rpm条件下，C.crenatum SYPA/pDXW‑10‑phbCAB在5‑L发酵罐发酵96h可产得43.21 g/L的L‑精氨酸，为国内外首次通过引入PHB代谢途径到菌体内，调节胞内代谢网络，最终实现高产L‑精氨酸的目的，为微生物工业化生产L‑精氨酸提供了基础。