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公开(公告)号：CN118497097A
公开(公告)日：2024-08-16
申请号：CN202410734633.9
申请日：2024-06-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR调控提高枯草芽孢杆菌重组蛋白表达水平的方法，属于基因工程领域。本发明通过在枯草芽孢杆菌中单独或叠加整合靶向抑制或激活细胞壁循环利用调控因子MurR、ABC转运蛋白LplC、I类热休克基因转录抑制因子HrcA、芽孢萌发调控因子YndF、甘氨酸脱羧酶亚基GcvPA、假定蛋白YozI、假定蛋白YoaQ、假定蛋白YbaC中一种或多种基因的sgRNA，实现了重组蛋白表达水平的显著提高。本发明构建的菌株WS9MLHS可使超高温淀粉酶、中温淀粉酶、几丁质酶和β‑半乳糖苷酶酶活提高9.3％～93.8％，为外源蛋白表达宿主提供了新基因表达调控策略。
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公开(公告)号：CN118726439A
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202410765928.2
申请日：2024-06-14
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/75 , C12N1/21 , C12N15/67 , C12N9/26 , C12N9/38 , C12N9/42 , C12N15/31 , C12N15/54 , C12N15/55 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种构建重组蛋白表达能力提升的枯草芽孢杆菌底盘菌株的方法，属于酶程和微生物改造技术领域。本发明通过调控基因rodZ、lytS、hrcA、ypmS、ftsZ中的一个或多个基因，使枯草芽孢杆菌在摇瓶发酵生产的中温淀粉酶AmyS、β‑半乳糖苷酶、超高温淀粉酶、几丁质酶的表达量提高4.32倍、2.05倍、1.54倍、1.12倍。结合共表达PonA和发酵优化，在3‑L生物反应器高密度发酵中将AmyS的酶活提高至102,893U·mL‑1，是目前AmyS表达的最高水平。
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公开(公告)号：CN118421672A
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202410699284.1
申请日：2024-05-31
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/75 , C12N15/65 , C12N15/67 , C12N1/21 , C12N15/10 , C12N9/38 , C12N9/28 , C40B50/06 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种基于全基因组CRISPRi筛选提高重组蛋白在枯草芽孢杆菌中表达水平的方法，属于基因工程技术领域。本发明在枯草芽孢杆菌中建立了CRISPRi基因抑制系统，并通过在dCas9表达菌株中引入重组蛋白表达质粒和通过设计靶向全基因组的sgRNA质粒文库，构建了可用于筛选重组蛋白表达水平的CRISPRi文库。本发明为枯草芽孢杆菌表达宿主生产重组蛋白的关键基因挖掘建立了具有可行性的筛选方法，该方法通用性强，适用于常用的枯草芽孢杆菌及各种来源的重组蛋白，应用前景广阔。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111264601A
公开(公告)日：2020-06-12
申请号：CN202010219511.8
申请日：2020-03-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种去鱼皮结构及其去鱼皮方法，该结构包括至少一工作台、至少一传送带装置、至少一扫描装置、至少一转动装置、至少一夹紧装置、至少一第一执行装置及至少一刀具装置。与现有技术相比，本发明结构自动化程度高，可替代人力工作，改善工人的操作环境，降低劳动强度，省时省力，提高去鱼皮效率。扫描装置的布置使得对鱼身的定位精准，保证夹紧装置对鱼身两侧的精确夹紧，便于后续去鱼皮操作，防止鱼身滑出传送带装置。转动装置的设置使得刀具装置能适应不同的鱼身外形弧度，轴承座的布置减小转动轴所受扭矩。
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公开(公告)号：CN118726439B
公开(公告)日：2025-04-15
申请号：CN202410765928.2
申请日：2024-06-14
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/75 , C12N1/21 , C12N15/67 , C12N9/26 , C12N9/38 , C12N9/42 , C12N15/31 , C12N15/54 , C12N15/55 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种构建重组蛋白表达能力提升的枯草芽孢杆菌底盘菌株的方法，属于酶程和微生物改造技术领域。本发明通过调控基因rodZ、lytS、hrcA、ypmS、ftsZ中的一个或多个基因，使枯草芽孢杆菌在摇瓶发酵生产的中温淀粉酶AmyS、β‑半乳糖苷酶、超高温淀粉酶、几丁质酶的表达量提高4.32倍、2.05倍、1.54倍、1.12倍。结合共表达PonA和发酵优化，在3‑L生物反应器高密度发酵中将AmyS的酶活提高至102,893U·mL‑1，是目前AmyS表达的最高水平。
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公开(公告)号：CN117821485A
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202311794936.1
申请日：2023-12-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种通过共表达增强因子提高α‑淀粉酶表达量的方法，属于酶工程和微生物改造技术领域。本发明将α淀粉酶基因与芽孢杆菌来源的增强因子共表达，可使摇瓶水平α淀粉酶的表达量提高1.58倍。本发明还通过优化共表达策略，通过整合枯草芽孢杆菌内源ponA和过表达ltaS使得α淀粉酶的表达量提高了2.09倍，最终α‑淀粉酶的酶活达到2901.6U/mL。本发明为提高外源蛋白在枯草芽孢杆菌表达水平提供了更多可选择位点，对提高外源外源蛋白表达量有重要的指导意义。
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公开(公告)号：CN116656588A
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202310581833.0
申请日：2023-05-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种共表达芽孢杆菌来源增强因子提高重组蛋白在枯草芽孢杆菌中表达量的方法，属于酶程技术领域。本发明将编码重组蛋白基因分别与芽孢杆菌来源的PonA、PonA截短体、OppA或SppA共表达，以提高重组蛋白的表达量。结果显示，本发明的方法可使超高温淀粉酶、中温淀粉酶或蔗糖异构酶在摇瓶水平的表达量提高至3.96倍、1.49倍和2.26倍。在3L生物反应器高密度发酵中可将超高温淀粉酶的表达量提高26％。本发明枯草芽孢杆菌作为外源蛋白表达宿主提供了新的可开发靶点，同时为增强因子的优化改造提供了技术支持。
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公开(公告)号：CN212065550U
公开(公告)日：2020-12-04
申请号：CN202020403406.5
申请日：2020-03-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本实用新型涉及一种去鱼皮结构，该结构包括至少一工作台、至少一传送带装置、至少一扫描装置、至少一转动装置、至少一夹紧装置、至少一第一执行装置及至少一刀具装置。与现有技术相比，本实用新型结构自动化程度高，可替代人力工作，改善工人的操作环境，降低劳动强度，省时省力，提高去鱼皮效率。扫描装置的布置使得对鱼身的定位精准，保证夹紧装置对鱼身两侧的精确夹紧，便于后续去鱼皮操作，防止鱼身滑出传送带装置。转动装置的设置使得刀具装置能适应不同的鱼身外形弧度，轴承座的布置减小转动轴所受扭矩。(ESM)同样的发明创造已同日申请发明专利
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