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公开(公告)号：CN111471662A
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN202010288719.5
申请日：2020-04-14
申请人： 江南大学
摘要： 本发明涉及SlEH1突变体及其在对映归一水解环氧化物中的应用，属于酶工程与生物催化领域。本发明通过番茄来源的环氧水解酶(SlEH1)的106和189位进行组合点突变，获得对映归一性提高的突变体。突变体SlEH1W106T/F189L归一性合成(R)-1,2-辛二醇的eep值提高至95.4％，相比于野生型酶提高了44.1％；并且SlEH1W106T/F189L可单次归一性合成400mmol/L(R)-1,2-辛二醇，最终得到(R)-1,2-辛二醇的eep>99.0％，总产率为82.6％，是目前报道的最佳催化剂。并且四种突变体对另外五种脂肪类环氧化物的归一性也有明显提高。
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公开(公告)号：CN109652354A
公开(公告)日：2019-04-19
申请号：CN201811619444.8
申请日：2018-12-28
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种重组大肠杆菌制备(R)-对氯环氧苯乙烷的方法，属于生物技术领域。本发明将番茄来源的环氧化物水解酶在大肠杆菌中表达，构建了基因工程菌E.coli/sleh1，并利用该菌株表达制备重组环氧化物水解酶；提供了一种利用在本发明中构建的重组菌株发酵所产酶进行生物催化的方法，催化150mM外消旋对氯环氧苯乙烷制备得到对映纯的(R)-对氯环氧苯乙烷(ee>98％)，并且，其最终产率达到47.5％，接近理论值50％。
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公开(公告)号：CN109609479B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN201811633720.6
申请日：2018-12-29
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种对映选择性提高的宇佐美曲霉环氧化物水解酶突变体，属于酶工程和生物催化技术领域。本发明基于理性设计对宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)环氧化物水解酶(AuEH2)进行分子改造，结合基因的定点饱和突变方法，获得多个对映选择性提高的环氧化物水解酶突变体。本发明获得的9个对映选择性提高的突变体催化外消旋对甲基苯基缩水甘油醚(rac‑pMPGE)的对映体比率(E值)相比野生型，从12.7分别提高至32.4、31.1、27.8、25.8、23.5、22.4、20.2、14.1、13.6。
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公开(公告)号：CN109486789B
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN201811653120.6
申请日：2018-12-29
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种立体选择性提高的菜豆环氧化物水解酶突变体，属于基因工程和蛋白质表达领域。本发明通过菜豆来源的环氧水解酶1(PvEH1)进行饱和突变，获得对映选择性与对映归一性(即立体选择性)提高的突变酶PvEH1 Z4X4‑59。PvEH1 Z4X4‑59对外消旋间氯环氧苯乙烷(rac‑mCSO)的最终eep，在25℃下从3.1％提高到92.3％，E值从2.6提高至26.5。
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公开(公告)号：CN108034646B
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN201810033879.8
申请日：2018-01-15
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种催化活性和对映归一性提高的PvEH3突变体，属于基因工程和蛋白质表达领域。本发明在具有一定对映归一性催化特性的环氧化物水解酶基础上，通过组合定点突变生物技术改造环氧化物水解酶分子结构，得到一株催化活性和对映归一性均提高的环氧化物水解酶突变体PvEH3G170E/F187L。突变体具有高对映归一择性、高催化活性的优点，有较大应用潜力，也为EH的研究奠定了理论基础。
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公开(公告)号：CN111471662B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202010288719.5
申请日：2020-04-14
申请人： 江南大学
摘要： 本发明涉及SlEH1突变体及其在对映归一水解环氧化物中的应用，属于酶工程与生物催化领域。本发明通过番茄来源的环氧水解酶(SlEH1)的106和189位进行组合点突变，获得对映归一性提高的突变体。突变体SlEH1W106T/F189L归一性合成(R)‑1,2‑辛二醇的eep值提高至95.4％，相比于野生型酶提高了44.1％；并且SlEH1W106T/F189L可单次归一性合成400mmol/L(R)‑1,2‑辛二醇，最终得到(R)‑1,2‑辛二醇的eep>99.0％，总产率为82.6％，是目前报道的最佳催化剂。并且四种突变体对另外五种脂肪类环氧化物的归一性也有明显提高。
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公开(公告)号：CN109355272B
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN201811621705.X
申请日：2018-12-28
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种催化效率提高的木聚糖酶突变体，属于基因工程和蛋白质表达技术领域。本发明通过定点突变和饱和突变生物技术改造木聚糖酶的分子结构，得到一株催化活性提高的木聚糖酶突变体AEx11AT98D/V124Q。突变酶的比活性及催化效率分别为AEx11A的3.04和2.74倍，而且该酶在耐高温和高热稳定性方面仍然和原酶类似。本发明解决了木聚糖酶催化活性低的限制性问题，有较大应用潜力，也为木聚糖酶的研究奠定了理论基础。
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公开(公告)号：CN109355271B
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN201811621721.9
申请日：2018-12-28
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种海洋红酵母来源的环氧化物水解酶及其应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种来源于海洋红酵母R.paludigenum的环氧化物水解酶基因(rpeh1)及对应的氨基酸序列；构建了含有该基因的重组质粒pET28a(+)‑rpeh1和基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET28a(+)‑rpeh1，并利用该菌株制备重组环氧化物水解酶；应用本发明构建的基因工程菌进行生物催化，制备得到对映纯的R型苯基乙二醇ee>73％。
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公开(公告)号：CN109355271A
公开(公告)日：2019-02-19
申请号：CN201811621721.9
申请日：2018-12-28
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种海洋红酵母来源的环氧化物水解酶及其应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种来源于海洋红酵母R.paludigenum的环氧化物水解酶基因(rpeh1)及对应的氨基酸序列；构建了含有该基因的重组质粒pET28a(+)-rpeh1和基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET28a(+)-rpeh1，并利用该菌株制备重组环氧化物水解酶；应用本发明构建的基因工程菌进行生物催化，制备得到对映纯的R型苯基乙二醇ee>73％。
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公开(公告)号：CN108034646A
公开(公告)日：2018-05-15
申请号：CN201810033879.8
申请日：2018-01-15
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种催化活性和对映归一性提高的PvEH3突变体，属于基因工程和蛋白质表达领域。本发明在具有一定对映归一性催化特性的环氧化物水解酶基础上，通过组合定点突变生物技术改造环氧化物水解酶分子结构，得到一株催化活性和对映归一性均提高的环氧化物水解酶突变体PvEH3G170E/F187L。突变体具有高对映归一择性、高催化活性的优点，有较大应用潜力，也为EH的研究奠定了理论基础。
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