公开(公告)号：CN109370993B

公开(公告)日：2020-09-04

申请号：CN201811430826.6

申请日：2018-11-28

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  谭春林 ,  张显 ,  杨套伟 ,  徐美娟

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P17/02

Abstract: 本发明公开了一种酶活提高的苯乙烯单加氧酶突变体及其应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。此突变体是通过将出发氨基酸序列为SEQ ID NO.1的苯乙烯单加氧酶的第305位氨基酸由天冬氨酸突变为甘氨酸得到的；此突变体的酶活可达99.12±1.5U/mL、Kcat/Km可达268.2±19.5mM‑1·min‑1，分别较野生型提高了1.7倍、3.4倍；此突变体的温度稳定性以及pH稳定性较野生型有了明显的提高，将此突变体在60℃下保持24h依旧可残留59％的酶活，在pH5.0的状态下保持12h依然可残留71％的酶活。

公开(公告)号：CN109370993A

公开(公告)日：2019-02-22

申请号：CN201811430826.6

申请日：2018-11-28

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  谭春林 ,  张显 ,  杨套伟 ,  徐美娟

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P17/02

Abstract: 本发明公开了一种酶活提高的苯乙烯单加氧酶突变体及其应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。此突变体是通过将出发氨基酸序列为SEQ ID NO.1的苯乙烯单加氧酶的第305位氨基酸由天冬氨酸突变为甘氨酸得到的；此突变体的酶活可达99.12±1.5U/mL、Kcat/Km可达268.2±19.5mM-1·min-1，分别较野生型提高了1.7倍、3.4倍；此突变体的温度稳定性以及pH稳定性较野生型有了明显的提高，将此突变体在60℃下保持24h依旧可残留59％的酶活，在pH5.0的状态下保持12h依然可残留71％的酶活。