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公开(公告)号：CN117965514B
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202410147861.6
申请日：2024-02-01
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种芳香族氨基酸解氨酶突变体及其制备反式肉桂酸和对香豆酸的方法，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明以来源于Zea mays的苯丙氨酸解氨酶(ZmPAL2)为出发序列，对第258位、第459位、第484位中至少一个的氨基酸进行取代，所获得的突变体与野生型相比，催化L‑苯丙氨酸的酶活力和转化率显著提升；对第135位以及与以第135位突变为基础组合第258位、第459位、第484位中的至少一个氨基酸突变，所获得的突变体与野生型相比，催化L‑酪氨酸的酶活力和转化率显著提升。以上获得的催化L‑苯丙氨酸和L‑酪氨酸的高活力突变体可应用于反式肉桂酸和对香豆酸的高效生产。
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公开(公告)号：CN115041108B
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202210736527.5
申请日：2022-06-27
申请人： 江南大学
摘要： 本发明涉及聚电解质层层组装多酶及其制备方法。本发明采用一种有效、可重复性高的层层组装固定多酶的方式，将碳酸钙作为模板，合理构造了分别带有聚阴离子和聚阳离子的微球，其利用酶分子表面所带电荷与微球表面电荷之间的静电相互作用进行层层固定。本发明的组装方式操作方便，步骤简洁，减少了酶的损失，使用聚阳离子微球载酶量高达87.70％，聚阴离子载酶量高达71.10％，以初始酶为参考，选择构建的体系相对酶活高达85％。
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公开(公告)号：CN116590250A
公开(公告)日：2023-08-15
申请号：CN202310703925.1
申请日：2023-06-14
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种全细胞催化合成3‑羟基根皮素的方法，属于生物技术领域。本发明提供了铜绿假单胞菌来源的4‑羟基苯乙酸3‑单加氧酶在催化根皮素的3’位羟化生产3‑羟基根皮素中的新用途。并通过对4‑羟基苯乙酸3‑单加氧酶的改造、全细胞催化筛选，获得了对根皮素的转化率提高的突变体。本发明将表达4‑羟基苯乙酸3‑单加氧酶的基因工程菌作为全细胞催化剂，可将4g/L的根皮素转化为1.58g/L的3‑羟基根皮素。
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公开(公告)号：CN115992161A
公开(公告)日：2023-04-21
申请号：CN202211080124.6
申请日：2022-09-05
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种产琥珀酸放线杆菌CRISPRi系统构建方法，属于生物技术领域。本发明提供的CRISPRi系统以表达载体pLGZ92M为骨架载体，其主要作用元件包括cpf1表达元件和crRNA表达元件，其中pckA启动子启动表达dcpf1蛋白，frd启动子启动表达crRNA，由终止子rrnB t1终止子终止。本发明提供的CRISPRi系统只需更换针对靶基因的crRNA即可实现对靶基因产生抑制作用。本发明的方法针对产琥珀酸放线杆菌实现基因抑制，操作过程简单，转化效率高。
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公开(公告)号：CN115041108A
公开(公告)日：2022-09-13
申请号：CN202210736527.5
申请日：2022-06-27
申请人： 江南大学
摘要： 本发明涉及聚电解质层层组装多酶及其制备方法。本发明采用一种有效、可重复性高的层层组装固定多酶的方式，将碳酸钙作为模板，合理构造了分别带有聚阴离子和聚阳离子的微球，其利用酶分子表面所带电荷与微球表面电荷之间的静电相互作用进行层层固定。本发明的组装方式操作方便，步骤简洁，减少了酶的损失，使用聚阳离子微球载酶量高达87.70％，聚阴离子载酶量高达71.10％，以初始酶为参考，选择构建的体系相对酶活高达85％。
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公开(公告)号：CN111088241B
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202010106516.X
申请日：2020-02-21
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了基因工程改造的人溶菌酶，属于生物工程技术领域。本发明公开了一种利用基因工程改造人源溶菌酶活性中心而得到的人源溶菌酶突变体m4HLM，通过改变活性中心的氨基酸残基从而将比酶活提高了60％。本发明还公开了一种含突变人源溶菌酶基因的重组质粒，以及经过该重组质粒转化毕赤酵母后获得的高效表达人源溶菌酶突变体的重组毕赤酵母基因工程菌。本发明获得的人源溶菌酶突变体具有比酶活高，制备简单的特点，具有潜在的临床应用价值，在饲料、食品工业上也具有广泛的用途。
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公开(公告)号：CN111172058A
公开(公告)日：2020-05-19
申请号：CN201911314974.6
申请日：2019-12-19
申请人： 江南大学 , 无锡施瑞水产科技有限公司
摘要： 本发明公开了一株解淀粉芽孢杆菌及其应用，属于生物技术领域。本发明提供了一株降解含氮化合物能力强的解淀粉芽孢杆菌B4；经解淀粉芽孢杆菌B4处理20h，氨氮去除测试培养基(NM)中氨氮的降解率就高达92.32％；经解淀粉芽孢杆菌B4处理20h，反硝化培养基(DM)中亚硝酸盐氮的降解率就高达100％。本发明通过将解淀粉芽孢杆菌B4进行高密度发酵，制备得到了主要成分为富含芽孢的解淀粉芽孢杆菌B4的水体净化剂；此水体净化剂净化水体的能力强、可适应不同氨氮浓度的水体环境且可提高水生动物养殖的成活率；经此水体净化剂处理24h，初始氨氮浓度分别为1、10、20mg/L的水体中的氨氮就几乎被完全去除。
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公开(公告)号：CN108795889A
公开(公告)日：2018-11-13
申请号：CN201810663221.5
申请日：2018-06-25
申请人： 江南大学
CPC分类号： C12N9/0083 , C12N15/70
摘要： 本发明公开了一种反式茴香脑加氧酶的突变体和突变株，所述反式茴香脑加氧酶的突变体与野生型反式茴香脑加氧酶氨基酸序列相比，其185位氨基酸Glu变为Asp，所述反式茴香脑加氧酶的突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO 1所示。合成对茴香醛、藜芦醛、洋茉莉醛、香兰素的转化速率分别为原始菌株的1.91、2.08、1.33、1.92倍，5F4在生物法合成芳香醛香料中，展现了良好的应用潜力，同时5F4的催化时pH的适应性更广泛，更适合用工业生产应用，能够降低成本，提高生产效率。
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公开(公告)号：CN108753742A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810662130.X
申请日：2018-06-25
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种反式茴香脑加氧酶突变体及其突变株，其中，所述反式茴香脑加氧酶突变体与野生型反式茴香脑加氧酶氨基酸序列相比，319位氨基酸脯氨酸变为丝氨酸，所述反式茴香脑加氧酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO 1所示。本发明通过易错PCR的方式，随机突变了反式茴香脑加氧酶，并导入到E.Coli BL21(DE3)中，经过筛选后获得突变重组菌4C7，其合成对茴香醛、藜芦醛的转化速率分别为原始野生型菌株的2.05、2.38倍，更适合用工业生产应用，能够降低成本，显著提高生产效率。
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公开(公告)号：CN102634474B
公开(公告)日：2013-04-17
申请号：CN201210094742.6
申请日：2012-03-31
申请人： 江南大学
摘要： 一株嗜乙酰乙酸棒杆菌及其产丁二酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明公开了一株嗜乙酰乙酸棒杆菌（Corynebacteriumacetoacidophilum）YF/Δldh，以及用其生产丁二酸的方法。该菌株为通过基因敲除技术构建的乳酸脱氢酶基因（ldh）缺失菌，已于2012年2月29日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号CCTCCNO：M2012041。该菌株具有产酸高，对钠离子耐受性和食品安全性好的特点，在葡萄糖为底物，碳酸氢钠为二氧化碳供体的缺氧环境中培养48小时，可积累丁二酸95g/L以上，培养94小时可积累丁二酸136g/L。
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