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公开(公告)号：CN112522210B
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202011516349.2
申请日：2020-12-21
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569
摘要： 本发明公开了一种分泌抗小反刍兽疫病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗与应用，所述的杂交瘤细胞株为4B2，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2020266。本发明所提供的单克隆抗体可用于检测PPRV，特异性强，不与羊疱疹病毒1型、山羊副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒1型、牛病毒性腹泻病毒2型等常见羊病毒发生反应。且本发明的提出为建立一种快速、简易、准确的检测方法，以及在免疫机制研究、免疫功能研究、检测方法建立等方面提供技术手段，对PPRV的防控及实验室研究都具有重要意义。
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公开(公告)号：CN111041000B
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN201911407906.4
申请日：2019-12-31
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535 , C12R1/91
摘要： 本发明提供一株分泌抗裂谷热病毒NSs蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，属于生物技术领域。分泌抗裂谷热病毒NSs蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株2D6D10，其保藏编号为CCTCC NO：C2019269。本发明还提供所述杂交瘤细胞株分泌的抗裂谷热病毒NSs蛋白单克隆抗体及其在制备裂谷热病毒NSs蛋白抗体检测试剂盒方面的应用。本发明杂交瘤细胞2D6D10能够产生针对RVFV非结构蛋白NSs蛋白的单克隆抗体，该单克隆抗体具有阻断作用，因此本发明的阻断ELISA试剂盒可用于病毒感染与灭活疫苗或缺失疫苗免疫抗体的鉴别诊断。
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公开(公告)号：CN108913665A
公开(公告)日：2018-11-30
申请号：CN201810831978.0
申请日：2018-07-26
申请人： 江苏省农业科学院
摘要： 本发明涉及一种分泌抗CpHV-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，属于免疫技术领域。本发明从建立的分泌抗CpHV-1单克隆抗体的杂交瘤细胞库中筛选出一株杂交瘤细胞4A4株。用其制备的小鼠腹水单克隆抗体对CpHV-1的中和效价达28。本发明的杂交瘤细胞4A4株分泌的单克隆抗体可用于CpHV-1发病羊的临床治疗，疗效显著，安全无不良副反应。本发明的杂交瘤细胞4A4株制备的单克隆抗体治疗剂，保存两年后中和效价不降低，稳定性好。此外，利用本发明的杂交瘤细胞4A4株分泌的单克隆抗体作为检测抗体建立的间接免疫荧光（IFA）检测方法，具有较好的灵敏性和特异性，可以用于CpHV-1感染的鉴别诊断。
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公开(公告)号：CN105838678A
公开(公告)日：2016-08-10
申请号：CN201610222623.2
申请日：2016-04-11
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , C12R1/91
摘要： 本发明属于分子生物学领域，涉及一种分泌CPIV3抗体的杂交瘤细胞株及ELISA试剂盒。本发明使用的山羊副流感病毒3型CPIV3 免疫原是从临床分离的CPIV3 JS2013毒株，从建立的分泌 CPIV3 单克隆抗体的杂交瘤细胞库中筛选出一株杂交瘤细胞 2E6。本发明的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体具有阻断作用，应用于CPIV3 阻断ELISA试剂盒。本发明的CPIV3 阻断ELISA试剂盒可特异性检测CPIV3 感染或者免疫山羊后产生的抗体。收集212份山羊临床血清样品，分别用上述建立的阻断ELISA方法和中和实验检测血清中CPIV3抗体。阻断ELISA结果与中和实验相比，符合率为98.8%。
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公开(公告)号：CN105154588A
公开(公告)日：2015-12-16
申请号：CN201510569941.1
申请日：2015-09-09
申请人： 江苏省农业科学院
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q2600/16
摘要： 本发明涉及一种用于检测山羊副流感病毒3型和小反刍兽疫病毒的引物对，属于生物技术领域。本发明提供了检测病毒的专用引物，包括引物对A和引物对B，引物对A包括引物1和引物2，引物对B包括引物3和引物4；引物1、引物2引物3和引物4的核苷酸序列分别为序列表中的序列1、序列2、序列3和序列4。本发明所提供的CPIV3和PPRV双重RT-PCR检测专用引物敏感性高，最低可检测到RNA含量约为1×10-3ng/μL，其灵敏度远高于1ng/μL的灵敏度。发明的双重RT-PCR检测方法特异性好、操作简便、迅速，并且对检测材料质量要求低，便于临床上的应用。
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公开(公告)号：CN102154513B
公开(公告)日：2013-01-30
申请号：CN201110063355.1
申请日：2011-03-16
申请人： 江苏省农业科学院
摘要： 本发明涉及一种检测猪Hokovirus的PCR检测方法，属于生物技术领域。具体采用25μl的PCR反应体系，在0.2mlPCR反应管内分别加入缓冲液，上、下游引物，DNA聚合酶以及提取的DNA模板，用灭菌超纯水加至总体积，将试剂混合均匀后，至于PCR扩增仪中，进行变性、退火、延伸，共循环35次；PCR反应结束后，取10μl产物在琼脂糖凝胶上，使用TAE缓冲液进行电泳，在紫外投射仪下观察PCR产物，并与标准分子量相对照，阳性样品可出现540bp片段。本发明所提供的检测方法敏感性高、特异性好、操作简便、迅速，并且对检测材料质量要求低，便于临床上的应用。
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公开(公告)号：CN102174662A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201110063365.5
申请日：2011-03-16
申请人： 江苏省农业科学院
摘要： 本发明涉及一种检测猪博卡病毒的PCR检测方法，属于生物技术领域。具体采用25μl的PCR反应体系，在0.2mlPCR反应管内分别加入缓冲液，上、下游引物，DNA聚合酶以及提取的DNA模板，用灭菌超纯水加至总体积，将试剂混合均匀后，至于PCR扩增仪中，进行变性、退火、延伸，共循环35次；PCR反应结束后，取10μl产物在琼脂糖凝胶上，使用TAE缓冲液进行电泳，在紫外投射仪下观察PCR产物，并与标准分子量相对照，阳性样品可出现约为270bp的片段。本发明所提供的检测方法敏感性高、特异性好、操作简便、迅速，并且对检测材料质量要求低，便于临床上的应用。
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公开(公告)号：CN102154513A
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN201110063355.1
申请日：2011-03-16
申请人： 江苏省农业科学院
摘要： 本发明涉及一种检测猪Hokovirus的PCR检测方法，属于生物技术领域。具体采用25μl的PCR反应体系，在0.2mlPCR反应管内分别加入缓冲液，上、下游引物，DNA聚合酶以及提取的DNA模板，用灭菌超纯水加至总体积，将试剂混合均匀后，至于PCR扩增仪中，进行变性、退火、延伸，共循环35次；PCR反应结束后，取10μl产物在琼脂糖凝胶上，使用TAE缓冲液进行电泳，在紫外投射仪下观察PCR产物，并与标准分子量相对照，阳性样品可出现540bp片段。本发明所提供的检测方法敏感性高、特异性好、操作简便、迅速，并且对检测材料质量要求低，便于临床上的应用。
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公开(公告)号：CN102140545A
公开(公告)日：2011-08-03
申请号：CN201110063287.9
申请日：2011-03-16
申请人： 江苏省农业科学院
摘要： 本发明涉及一种用于检测猪博卡病毒核苷酸片段的引物和探针序列，属于动物病原微生物检测技术领域。引物对包括：由序列为TCGAGCTATACAACCGAAGAAGAGA的上游引物pNPF和序列为TGTTTCGGAGATGTCCTTGCT的下游引物pNPR组成的引物对。探针pNPP序列为CAGCTCTTCGAATCGCCGCTCTCC。该套引物和探针序列根据GenBank上猪博卡病毒全基因组序列（HQ223038）设计，具有较高的灵敏度和特异性。
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公开(公告)号：CN109321532B
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN201811167484.3
申请日：2018-10-08
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/535 , G01N33/569
摘要： 本发明公开了一种用于检测山羊副流感病毒3型（CPIV3）的双抗体夹心ELISA检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有由保藏编号为CCTCC NO.C201627和CCTCC NO.C2018151的杂交瘤细胞株分泌产生的抗CPIV3单克隆抗体2E6和1F8。本发明以纯化的1F8单抗为捕获抗体，以辣根过氧化物酶标记的2E6单抗为检测抗体，建立了检测CPIV3的双抗体夹心ELISA方法。本发明构建的试剂盒检测CPIV3病原快速、稳定、特异性好、灵敏度高，可快速检测样品中是否含有CPIV3病毒粒子；本发明适用于养殖场感染CPIV3的高通量检测。
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