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公开(公告)号：CN116004549A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202211630235.X
申请日：2022-12-19
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/58 , A61K39/42 , A61P31/14 , C12R1/91
摘要： 本发明提供分泌抗牛病毒性腹泻病毒E2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，属于生物技术领域。杂交瘤细胞株1E2B3，保藏编号为CCTCC NO：C2022348。本发明还提供该杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体及其在制备检测牛病毒性腹泻病毒E2蛋白抗体的试剂盒、制备BVDV‑1特异性治疗剂和抗原检测试剂等方面的应用。本发明杂交瘤细胞株能够产生针对BVDV‑1 E2蛋白的单克隆抗体。该单克隆抗体的阻断ELISA方法可用于病毒感染与灭活疫苗免疫抗体的检测；该单克隆抗体具有中和病毒的活性，可用于BVDV相关疾病治疗制剂的研发；该单克隆抗体具有良好的反应性可用于Western blot检测和免疫荧光检测。
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公开(公告)号：CN114540523A
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202210315056.0
申请日：2022-03-29
摘要： 本发明提供检测O8、O9、O89血清型大肠杆菌的引物组合物及试剂盒，属于生物技术和分子生物学领域。该检测O8、O9、O89血清型大肠杆菌的引物组合物，包括引物对A、引物对B和引物对C，所述引物对A包括引物1和引物2，所述引物对B包括引物3和引物4，所述引物对C包括引物5和引物6，所述引物1‑6的核苷酸序列依次如SEQ ID NO:1‑6所示。本发明试剂盒操作简单、特异性强、敏感性高、能同时检测O8、O9及O89血清型大肠杆菌的引物组合物及试剂盒。
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公开(公告)号：CN113736799A
公开(公告)日：2021-12-03
申请号：CN202111092942.3
申请日：2021-09-17
摘要： 本发明提供山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆构建方法及其应用，属于生物技术领域。该构建方法包括：以山羊副流感病毒3型的总RNA反转录产物为模板，扩增A、B、C和D片段；将片段A和B、片段C和D分别插入pCI‑neo‑1载体中，得到重组载体pCI‑A‑B、pCI‑C‑D；以pCI‑A‑B为模板，扩增片段A‑B；以pCI‑C‑D为模板，扩增C‑D片段；将线性化pYES1L载体、A‑B和C‑D片段混和，导入酵母内进行同源重组，得到山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆质粒。本发明构建方法效率高，得到的感染性cDNA克隆拯救的病毒感染细胞后能够快速产生细胞病变，病毒滴度高，且保持稳定。
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公开(公告)号：CN108949700A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201810926226.2
申请日：2018-08-15
申请人： 江苏省农业科学院
CPC分类号： C12N7/00 , C12N2760/18621 , C12N2760/18651 , C12Q1/686 , C12Q1/701 , C12Q2521/107
摘要： 本发明属于兽用生物制品领域，公开了一种山羊副流感病毒3型JS14‑2株及其在制备灭活疫苗中的应用。分离纯化获得山羊副流感病毒3型JS14‑2病毒株后，将病毒液经离心、甲醛灭活，加入佐剂乳化制备获得灭活疫苗。本发明提供了一种可用于制备山羊副流感病毒3型灭活疫苗的病毒株，该毒株属于国内流行毒株，毒力强，抗原性好；该毒株在MDBK细胞上具有较好的生长特性，可以获得稳定的高滴度（大于等于107 TCID50/mL，血凝价大于等于28）；疫苗制备方法完善，免疫原性与免疫保护效果良好；使用免疫剂量低，安全性高，免疫持续期长，大大节约生产及使用成本，有利于在临床实际中有效的防控该病。
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公开(公告)号：CN105441593A
公开(公告)日：2016-03-30
申请号：CN201610003794.6
申请日：2016-01-04
申请人： 江苏省农业科学院
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2561/113 , C12Q2563/107
摘要： 本发明涉及一种检测山羊副流感病毒3型核苷酸片段的引物和探针序列，属于动物病原微生物检测技术领域。引物对包括：由序列为GCTTGGCTTCTTTGAAATGG的上游引物CPIVTF和序列为GCCTGCAGAAGTTCCTTGTC的下游引物CPIVTR组成的引物对；探针CPIVTM序列为CAATCGGACTAGCCAAGTATGGTGGGA。该套引物和探针序列根据GenBank上山羊副流感病毒3型全基因组序列KT215610设计，具有较高的灵敏度和特异性。
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公开(公告)号：CN103951734A
公开(公告)日：2014-07-30
申请号：CN201410161997.9
申请日：2014-04-21
申请人： 江苏省农业科学院
CPC分类号： C07K14/005 , C12N15/70 , C12N2770/24022 , G01N33/56983 , G01N33/6803
摘要： 本发明属于分子生物学领域，涉及一种边界病病毒（BDV）重组E2蛋白及其IgG抗体检测试剂盒。系将BDVE2蛋白主要抗原区域克隆入原核表达载体得到重组表达载体，将该重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3)，经重组大肠杆菌表达纯化后获得重组BDVE2蛋白，Westernblot试验证明该蛋白具有良好的抗原性。将该蛋白包被酶标板，通过抗原包被浓度、血清稀释度和作用时间、二抗浓度和作用时间以及显色时间的优化建立ELISA方法，检测山羊BDV阴性血清确定临界值和判定标准。本发明构建的重组菌株对外源蛋白表达稳定，抗原性好；在此基础上首次用于建立边界病病毒IgG抗体ELISA检测方法。
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公开(公告)号：CN118852369A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202410885092.X
申请日：2024-07-03
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C07K14/30 , C12N15/31 , G01N33/569 , G01N33/543 , A61K39/02 , A61P31/04
摘要： 本发明涉及绵羊肺炎支原体检测领域，具体涉及绵羊肺炎支原体免疫相关蛋白、表达载体、重组菌株、试剂盒、检测绵羊肺炎支原体ELISA抗体的方法及其用途。本发明公开了一种绵羊肺炎支原体免疫相关蛋白，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，或如SEQ ID NO:2所示。本发明通过对UlaD、T4SS基因进行PCR扩增、克隆、构建表达载体，然后通过原核表达系统获得了两种具有良好的免疫反应性的重组蛋白，并基于这两种蛋白通过优化间接ELISA检测方法中的条件和参数，分别建立了敏感性高、特异性强、重复性好、符合率好的绵羊肺炎支原体抗体的间接ELISA检测方法，为绵羊肺炎支原体抗体检测试剂盒的开发奠定了坚实基础，同时可作为亚单位疫苗的候选蛋白和药物，制备成抗绵羊肺炎支原体感染制剂。
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公开(公告)号：CN109321532B
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN201811167484.3
申请日：2018-10-08
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/535 , G01N33/569
摘要： 本发明公开了一种用于检测山羊副流感病毒3型（CPIV3）的双抗体夹心ELISA检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有由保藏编号为CCTCC NO.C201627和CCTCC NO.C2018151的杂交瘤细胞株分泌产生的抗CPIV3单克隆抗体2E6和1F8。本发明以纯化的1F8单抗为捕获抗体，以辣根过氧化物酶标记的2E6单抗为检测抗体，建立了检测CPIV3的双抗体夹心ELISA方法。本发明构建的试剂盒检测CPIV3病原快速、稳定、特异性好、灵敏度高，可快速检测样品中是否含有CPIV3病毒粒子；本发明适用于养殖场感染CPIV3的高通量检测。
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公开(公告)号：CN109022437B
公开(公告)日：2021-09-14
申请号：CN201810862854.9
申请日：2018-08-01
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12N15/113 , A61K48/00 , A61K31/7105 , A61P31/14
摘要： 本发明涉及一种抑制山羊副流感病毒3型（CPIV3）复制的靶标位点序列及其在制备抗山羊副流感病毒3型药物中的应用。所述抑制山羊副流感病毒3型复制的靶标位点序列位于干扰素调节基因2（IRF2）的3’UTR中，其核苷酸序列如SEQ ID NO:19所示，受bta‑miR‑222序列直接靶定，从而降解IRF2的mRNA，降低IRF2蛋白的表达量，提高Ⅰ型干扰素表达水平，抑制CPIV3增殖。该靶标位点序列为研发新的治疗因CPIV3引发的疾病的抗病毒药物提供了一个新的药物靶点。此外还可应用于评价bta‑miR‑222调节IRF2转录水平，以及培育抗山羊副流感病毒3型转基因羊方面。
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公开(公告)号：CN112920976A
公开(公告)日：2021-06-08
申请号：CN202110341911.0
申请日：2021-03-30
申请人： 江苏省农业科学院
摘要： 本发明公开了一株绵羊肺炎支原体强毒株及其应用，所述绵羊肺炎支原体的分类命名为绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)NJ01株，已保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 2020907，保藏日期为2020年12月14日。所述的应用为上述绵羊肺炎支原体在感染发病和制备治疗羊支原体肺炎药物中的应用。本发明的绵羊肺炎支原体强毒株培育采用的支原体培养基，其制备简便、成本低、培养支原体变色快且滴度高。
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