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公开(公告)号：CN103446182B
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201310338679.0
申请日：2013-08-06
申请人： 河北农业大学
IPC分类号： C07K1/34
摘要： 本发明公开了一种高致病性猪繁殖与呼吸综合症特异性转移因子的制备方法，属于兽药技术领域。其包括下述步骤：（1）无菌采用经过高致病性猪繁殖与呼吸综合症病毒抗原免疫的猪的脾脏，去除被膜和结缔组织，冲洗，剪碎；（2）加入无菌生理盐水，用高速组织捣碎机绞碎，制成匀浆；（3）匀浆反复冻融8次后，于4℃下4000r/min离心15min，收取上清液；（4）将上清液置于透析袋内进行透析，收集透析外液，过滤除菌，加入冷冻保护剂，混合后分装，-20℃保存。本发明能够特异性提高猪繁殖与呼吸综合征疫苗的免疫效果，改善或增强猪的免疫功能和抗感染能力，具有预防和治疗猪繁殖与呼吸综合症，降低发病率和死亡率的作用。
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公开(公告)号：CN118345195A
公开(公告)日：2024-07-16
申请号：CN202410511237.X
申请日：2024-04-26
申请人： 河北农业大学
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明属于病原或病原微生物检测技术领域，具体涉及一种用于ASFV基因检测的双重RAA引物、探针及其应用。基于本发明提供的双重RAA引物、探针对ASFV基因B646L和MGF505‑2R进行检测，不需要进行热循环，检测快速且方便，适合现场快速诊断非洲猪瘟，并能鉴别ASFV强毒株和MGF505‑2R基因缺失弱毒株感染；检测特异性好，灵敏度高，准确性好，且检测成本低。
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公开(公告)号：CN117230256A
公开(公告)日：2023-12-15
申请号：CN202311408435.5
申请日：2023-10-27
申请人： 河北农业大学
摘要： 本发明提供了一种引物探针组/检测试剂/三重荧光PCR方法在ASF毒株检测和/或鉴别中的应用，属于生物检测技术领域。本发明建立了一种可同时检测p72、CD2v、MGF505‑2R基因的三重TaqMan荧光定量PCR方法，所建立的标准曲线有良好的线性关系，p72、CD2v、MGF505‑2R的检测限分别为2.9copies/μL、3.47copies/μL以及3.77copies/μL，与多种猪病病毒不存在交叉反应，特异性良好，组内组间重复性试验结果显示稳定性也很好。因此，本发明建立的快速、敏感的诊断方法，可在诊断中有效的区分ASFV野毒株与基因缺失毒株，为ASFV诊断和防控提供技术支持。
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公开(公告)号：CN107011417A
公开(公告)日：2017-08-04
申请号：CN201710234819.8
申请日：2017-04-12
申请人： 河北农业大学
IPC分类号： C07K14/165 , C12N15/50 , G01N33/569
摘要： 本发明提供了一种重组蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了一种如SEQ ID No.2所示的基因。本发明还提供了一种如上所述的蛋白在检测猪流行性腹泻病毒抗体中的应用，主要是作为包被抗原使用。本发明还提供了一种检测猪流行性腹泻病毒抗体的试剂盒，包括：如上所述的重组蛋白、包被液、洗涤液、封闭液、稀释液、辣根过氧化物酶标记的羊抗猪IgG和底物显色液。本发明以SEQ ID No.1所示的重组蛋白作为包被抗原，采用间接ELISA检测猪流行性腹泻病毒抗体，具有较好的特异性、敏感性及重复性，结果直观准确。
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公开(公告)号：CN118652324A
公开(公告)日：2024-09-17
申请号：CN202410526723.9
申请日：2024-04-29
申请人： 河北农业大学
IPC分类号： C07K16/08 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/58
摘要： 本发明属于病原或病原微生物检测技术领域，具体涉及一种特异性结合ASFV的CD2v蛋白的单克隆抗体及其在ASF诊断和鉴别ASFV强毒株与CD2v基因缺失弱毒株中的应用。该单克隆抗体序列如SEQ ID NO：1所示，其对猪流行性腹泻病毒(PEDV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)等阳性样品进行测试，结果显示，除了与ASFV的CD2v蛋白检测结果为阳性外，其他病毒样品检测结果均为阴性，无交叉反应，特异性好。
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公开(公告)号：CN116769019B
公开(公告)日：2023-12-15
申请号：CN202310221282.7
申请日：2023-03-09
申请人： 河北农业大学
IPC分类号： C07K16/08 , C07K14/01 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
摘要： 本发明属于微生物检测技术领域，具体涉及一种ASFVp30蛋白单克隆抗体及其应用。该ASFVp30蛋白单克隆抗体其能够识别p30蛋白抗原表位的115aa‑134aa。基于该ASFVp30蛋白单克隆抗体建立的阻断ELISA方法对非洲猪瘟病毒抗体进行检测时，与CSFV、PRRSV及PRV等抗体均无交叉反应；最低能检出1∶512倍稀释的阳性血清特异性抗体；批内和批间重复性试验的平均变异系数分别为4.116％和5.187％；与商品试剂盒的阳性符合率92.31％，阴性符合率92.38％，总符合率为92.36％。
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公开(公告)号：CN110894216B
公开(公告)日：2022-03-08
申请号：CN201911149815.5
申请日：2019-11-21
申请人： 河北农业大学
IPC分类号： C07K14/165 , C07K16/10 , C07K19/00 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577
摘要： 本发明涉及细胞工程及免疫学技术领域，具体公开一种猪流行性腹泻病毒抗原表位肽、单克隆抗体及应用。所述抗原包含SEQ ID No.1所示的表位多肽，采用杂交瘤细胞技术制备与该抗原对应的单克隆抗体。本发明提供的单克隆抗体能够与PEDV重组S蛋白和PEDV特异性结合，该单克隆抗体可以有效鉴别PEDV变异毒株与经典毒株。
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公开(公告)号：CN110894216A
公开(公告)日：2020-03-20
申请号：CN201911149815.5
申请日：2019-11-21
申请人： 河北农业大学
IPC分类号： C07K14/165 , C07K16/10 , C07K19/00 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577
摘要： 本发明涉及细胞工程及免疫学技术领域，具体公开一种猪流行性腹泻病毒抗原表位肽、单克隆抗体及应用。所述抗原包含SEQ ID No.1所示的表位多肽，采用杂交瘤细胞技术制备与该抗原对应的单克隆抗体。本发明提供的单克隆抗体能够与PEDV重组S蛋白和PEDV特异性结合，该单克隆抗体可以有效鉴别PEDV变异毒株与经典毒株。
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公开(公告)号：CN117417458A
公开(公告)日：2024-01-19
申请号：CN202311319993.4
申请日：2023-10-12
申请人： 河北农业大学
IPC分类号： C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K39/215 , A61P1/12 , A61P31/14 , B82Y5/00 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒纳米颗粒疫苗及其制备方法与应用，属于兽用疫苗技术领域。该猪流行性腹泻病毒纳米颗粒疫苗中含有S1‑FTN融合蛋白，S1‑FTN融合蛋白包括猪流行性腹泻病毒的S1蛋白、linker、FTN蛋白；S1‑FTN融合蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的S1‑FTN纳米颗粒免疫小鼠的特异性IgG2a/IgG1比值低于S1蛋白免疫的小鼠(P＜0.05)，与S1蛋白比较，S1‑FTN纳米颗粒更倾向刺激Th2型免疫反应。本发明为猪流行性腹泻病毒纳米颗粒疫苗的制备奠定了基础。
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公开(公告)号：CN107011417B
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201710234819.8
申请日：2017-04-12
申请人： 河北农业大学
IPC分类号： C07K14/165 , C12N15/50 , G01N33/569
摘要： 本发明提供了一种重组蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了一种如SEQ ID No.2所示的基因。本发明还提供了一种如上所述的蛋白在检测猪流行性腹泻病毒抗体中的应用，主要是作为包被抗原使用。本发明还提供了一种检测猪流行性腹泻病毒抗体的试剂盒，包括：如上所述的重组蛋白、包被液、洗涤液、封闭液、稀释液、辣根过氧化物酶标记的羊抗猪IgG和底物显色液。本发明以SEQ ID No.1所示的重组蛋白作为包被抗原，采用间接ELISA检测猪流行性腹泻病毒抗体，具有较好的特异性、敏感性及重复性，结果直观准确。
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