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公开(公告)号：CN113748776B
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202110935171.3
申请日：2021-08-16
摘要： 本发明涉及一种快速抑制梨种子NAC转录因子表达的方法，包括以下步骤：（1）选种：选取饱满、无病虫害的梨种子；（2）把种子与直径2 cm以下的碎玻璃渣混合放入封口容器中，50r/min轻微震荡30 min；（3）种子在波长为254nm紫外光下照射3 h；（4）种子处理：将种子放入容器中，加入适量清水，并使种子在水中处于持续翻滚状态，水温4℃处理1 d，水温10℃处理1 d，之后保持水温15℃，共5‑15 d；使种子处于持续翻滚状态的方法采用流水冲浸法和浸泡通气法任一种；本方法能够快速抑制梨种子NAC转录因子表达解决了现有的打破梨种子休眠耗时较长的问题，促进播种后实生苗的根系发育，提高幼苗质量。
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公开(公告)号：CN113748776A
公开(公告)日：2021-12-07
申请号：CN202110935171.3
申请日：2021-08-16
摘要： 本发明涉及一种快速抑制梨种子NAC转录因子表达的方法，包括以下步骤：（1）选种：选取饱满、无病虫害的梨种子；（2）把种子与直径2 cm以下的碎玻璃渣混合放入封口容器中，50r/min轻微震荡30 min；（3）种子在波长为254nm紫外光下照射3 h；（4）种子处理：将种子放入容器中，加入适量清水，并使种子在水中处于持续翻滚状态，水温4℃处理1 d，水温10℃处理1 d，之后保持水温15℃，共5‑15 d；使种子处于持续翻滚状态的方法采用流水冲浸法和浸泡通气法任一种；本方法能够快速抑制梨种子NAC转录因子表达解决了现有的打破梨种子休眠耗时较长的问题，促进播种后实生苗的根系发育，提高幼苗质量。
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公开(公告)号：CN114107526B
公开(公告)日：2024-04-16
申请号：CN202111440174.6
申请日：2021-11-30
申请人： 河南农业大学
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/113 , C12N15/11 , C12R1/01
摘要： 本发明属于病原微生物的快速检测领域，特别是指一种检测西瓜嗜酸菌（Acidovorax citrulli）的RPA引物对和crRNA及其试剂盒和使用方法。所述RPA引物对序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示，crRNA靶标序列如SEQ ID No.3所示。本发明将采用Crispr/LbCas12a核酸检测平台，针对西瓜嗜酸菌（Acidovorax citrulli）的基因组设计特异性检测位点，并结合荧光可视化技术，开发出适合检测此类病原菌的简易性诊断方法。同时结合RPA等温扩增技术，进一步提高灵敏度。
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公开(公告)号：CN114395022B
公开(公告)日：2023-06-13
申请号：CN202210105876.7
申请日：2022-01-27
申请人： 河南农业大学
IPC分类号： C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/84 , A01H5/08 , A01H6/74
摘要： 本发明公开了一种苹果锌指蛋白转录因子MdZF‑HD11及在调控果实成熟软化中的应用，分析了该基因在不同处理苹果果实采后贮藏过程中的表达模式，利用瞬时过表达和VIGS技术验证MdZF‑HD11基因在苹果果实后熟软化中的作用，发现过表达MdZF‑HD11基因的苹果果实与对照果实相比，乙烯释放显著升高，硬度显著降低，果实颜色明显变黄；而沉默MdZF‑HD11基因的苹果果实乙烯释放显著降低，果实颜色偏青。说明该基因可以调控苹果果实后熟软化，对培育耐贮运的苹果新品种具有积极的指导作用。
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公开(公告)号：CN115960866A
公开(公告)日：2023-04-14
申请号：CN202310014122.5
申请日：2023-01-05
申请人： 河南农业大学
IPC分类号： C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/70 , C12Q1/6895 , C12Q1/6816 , C12R1/19
摘要： 本发明属于基因编辑领域，涉及Cas12a蛋白，特别是指一种Mb2Cas12a‑RRVRR突变体蛋白及其制备方法和应用。本研究首次对16种Cas12a蛋白进行了评价，特别是它们在较低温度下的切割活性进行了评估。发现来自Moraxella bovoculi 57922菌株的Mb2Cas12a蛋白活性比其他蛋白更强。此外，本申请在Mb2Cas12a蛋白中引入了5个突变，从而创制Mb2Cas12a‑RRVRR变体蛋白，它具有更广泛的PAMs范围和更强的活性。综上所述，基于CRISPR/Mb2Cas12a‑RRVRR变体的新型检测工具增强了CRISPR技术的诊断能力，有潜力取代现有的Cas12a蛋白。
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公开(公告)号：CN114457097A
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202111617913.4
申请日：2021-12-27
申请人： 河南农业大学
摘要： 本发明公开了一种苹果β‑半乳糖苷酶基因Mdβ‑gal18及在调控果实成熟软化中的应用，分析了该基因在不同处理苹果果实采后贮藏过程中的表达模式，利用瞬时过表达和VIGS技术验证Mdβ‑gal18基因在苹果果实后熟软化中的作用，发现过表达Mdβ‑gal18基因的苹果果实与对照果实相比，乙烯释放显著升高，硬度显著降低，果实颜色明显变黄；而沉默Mdβ‑gal18基因的苹果果实乙烯释放显著降低，果实颜色偏青。说明该基因可以调控苹果果实后熟软化，对培育耐贮运的苹果新品种具有积极的指导作用。
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公开(公告)号：CN114395022A
公开(公告)日：2022-04-26
申请号：CN202210105876.7
申请日：2022-01-27
申请人： 河南农业大学
IPC分类号： C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/84 , A01H5/08 , A01H6/74
摘要： 本发明公开了一种苹果锌指蛋白转录因子MdZF‑HD11及在调控果实成熟软化中的应用，分析了该基因在不同处理苹果果实采后贮藏过程中的表达模式，利用瞬时过表达和VIGS技术验证MdZF‑HD11基因在苹果果实后熟软化中的作用，发现过表达MdZF‑HD11基因的苹果果实与对照果实相比，乙烯释放显著升高，硬度显著降低，果实颜色明显变黄；而沉默MdZF‑HD11基因的苹果果实乙烯释放显著降低，果实颜色偏青。说明该基因可以调控苹果果实后熟软化，对培育耐贮运的苹果新品种具有积极的指导作用。
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公开(公告)号：CN114214348A
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202111354374.X
申请日：2021-11-16
申请人： 河南农业大学
IPC分类号： C12N15/70 , C12N15/55 , C12N15/10 , C12N9/22 , C12Q1/6816
摘要： 本发明属于蛋白功能领域，涉及CRISPR‑Cas系统，特别是指一种用于核酸检测的LbCas12a‑5M突变体蛋白及其制备方法和应用。研究构建了LbCas12a的D156R/G532R/K538V/Y542R/K595R变体，评估蛋白的乱切活性在核酸检测中PAM序列的偏好性以及检测效率方面是否优于野生型蛋白。同时，结合荧光可视化方法，开发出一套可以识别非常规PAM序列的核酸检测系统，进一步优化并扩大了Crispr/LbCas12a核酸诊断系统的应用。
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公开(公告)号：CN114107526A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202111440174.6
申请日：2021-11-30
申请人： 河南农业大学
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/113 , C12N15/11 , C12R1/01
摘要： 本发明属于病原微生物的快速检测领域，特别是指一种检测西瓜嗜酸菌（Acidovorax citrulli）的RPA引物对和crRNA及其试剂盒和使用方法。所述RPA引物对序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示，crRNA靶标序列如SEQ ID No.3所示。本发明将采用Crispr/LbCas12a核酸检测平台，针对西瓜嗜酸菌（Acidovorax citrulli）的基因组设计特异性检测位点，并结合荧光可视化技术，开发出适合检测此类病原菌的简易性诊断方法。同时结合RPA等温扩增技术，进一步提高灵敏度。
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