一种鸡传染性喉气管炎双价核酸疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN101972482A

    公开(公告)日:2011-02-16

    申请号:CN201010228651.8

    申请日:2010-07-16

    IPC分类号: A61K48/00 C12N15/79 A61P31/14

    摘要: 本发明公开了一种鸡传染性喉气管炎双价核酸疫苗,在真核表达载体pIRES的2个多克隆位点中分别插入了ILTV HN1株gB和ChIL-18完整基因,所述双价核酸疫苗共表达鸡传染性喉气管炎病毒gB基因和鸡IL-18基因。本发明采用的真核双表达载体pIRES在启动子下游的MCS A和MCS B的多克隆酶切位点分别插入鸡传染性喉气管炎病毒HN1株gB基因片段和鸡白介素-18基因片段,获得真核双表达质粒pIRES-gB/IL18。避免两种质粒共同免疫时可能存在的细胞摄取不成比例问题,提高局部抗原提成效率,增强局部免疫应答强度,缩短免疫应答潜伏期,为ILTV新型疫苗的研究奠定了基础。

    一种猪圆环病毒Ⅱ型核酸疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN102274523A

    公开(公告)日:2011-12-14

    申请号:CN201110221729.8

    申请日:2011-08-04

    IPC分类号: A61K48/00 A61K39/12 A61P31/20

    摘要: 本发明的技术方案是:一种猪圆环病毒II型核酸疫苗,在真核表达载体pIRES的2个多克隆位点中分别插入了猪圆环病毒II型LY株ORF2和猪IL-18基因,所述核酸疫苗共表达猪圆环病毒II型LY株Cap和猪IL-18蛋白。本发明经PCR、双酶切及测序鉴定,证明成功构建了共表达质粒pIRES-ORF2/PIL18。将构建成功的重组质粒pIRES-ORF2/PIL18用脂质体法转染猪肾PK-15细胞,以RT-PCR和间接免疫荧光检测目的蛋白的表达情况。经RT-PCR检测到两种目的基因的转录;间接免疫荧光试验检测到ORF2蛋白在细胞浆和细胞核中观察到了特异性的亮绿色荧光,证明蛋白得到表达。

    重组猪伪狂犬病毒毒株及其制备方法

    公开(公告)号:CN103952379A

    公开(公告)日:2014-07-30

    申请号:CN201410104923.1

    申请日:2014-03-20

    IPC分类号: C12N7/01 C12N15/63 C12R1/93

    摘要: 本发明公开了一种重组猪伪狂犬病毒毒株,重组猪伪狂犬病毒(Herpesviridae)毒株,CCTCCNO:V201345。本发明是在伪狂犬病毒载体的基础上加入了绿色荧光蛋白标签,构建了表达绿色荧光蛋白gG缺失的通用转移载体PG,含有伪狂犬病病毒自身晚期基因gG启动子、CMV启动子、SV40Poly(A)且上下游侧翼分别为0.8kb和l.7kb,完全可以满足同源重组的需要。EGFP不仅可以作为基因表达的指示剂,而且在其上所带有的多克隆位点内插入了猪IL-18基因,实现了将不同表达框通过一个共同的载体相连而构建,是作为两个表达框单独表达的,其外源基因的表达量与两个表达框连接的方向关系密切。