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公开(公告)号:CN102274523A
公开(公告)日:2011-12-14
申请号:CN201110221729.8
申请日:2011-08-04
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明的技术方案是:一种猪圆环病毒II型核酸疫苗,在真核表达载体pIRES的2个多克隆位点中分别插入了猪圆环病毒II型LY株ORF2和猪IL-18基因,所述核酸疫苗共表达猪圆环病毒II型LY株Cap和猪IL-18蛋白。本发明经PCR、双酶切及测序鉴定,证明成功构建了共表达质粒pIRES-ORF2/PIL18。将构建成功的重组质粒pIRES-ORF2/PIL18用脂质体法转染猪肾PK-15细胞,以RT-PCR和间接免疫荧光检测目的蛋白的表达情况。经RT-PCR检测到两种目的基因的转录;间接免疫荧光试验检测到ORF2蛋白在细胞浆和细胞核中观察到了特异性的亮绿色荧光,证明蛋白得到表达。