公开(公告)号：CN102274523A

公开(公告)日：2011-12-14

申请号：CN201110221729.8

申请日：2011-08-04

申请人： 河南农业大学

发明人： 陈红英 ,  崔保安 ,  李新生 ,  魏战勇 ,  刘金朋 ,  王淑娟 ,  朱前磊 ,  王亚丹 ,  王子馨 ,  李坤

IPC分类号： A61K48/00 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20

摘要： 本发明的技术方案是：一种猪圆环病毒II型核酸疫苗，在真核表达载体pIRES的2个多克隆位点中分别插入了猪圆环病毒II型LY株ORF2和猪IL-18基因，所述核酸疫苗共表达猪圆环病毒II型LY株Cap和猪IL-18蛋白。本发明经PCR、双酶切及测序鉴定，证明成功构建了共表达质粒pIRES-ORF2/PIL18。将构建成功的重组质粒pIRES-ORF2/PIL18用脂质体法转染猪肾PK-15细胞，以RT-PCR和间接免疫荧光检测目的蛋白的表达情况。经RT-PCR检测到两种目的基因的转录；间接免疫荧光试验检测到ORF2蛋白在细胞浆和细胞核中观察到了特异性的亮绿色荧光，证明蛋白得到表达。

公开(公告)号：CN101972482A

公开(公告)日：2011-02-16

申请号：CN201010228651.8

申请日：2010-07-16

申请人： 河南农业大学

发明人： 陈红英 ,  崔保安 ,  魏战勇 ,  邵攀峰 ,  刘金朋 ,  王淑娟 ,  朱前磊 ,  王子馨 ,  钞安军

IPC分类号： A61K48/00 ,  C12N15/79 ,  A61P31/14

摘要： 本发明公开了一种鸡传染性喉气管炎双价核酸疫苗，在真核表达载体pIRES的2个多克隆位点中分别插入了ILTV HN1株gB和ChIL-18完整基因，所述双价核酸疫苗共表达鸡传染性喉气管炎病毒gB基因和鸡IL-18基因。本发明采用的真核双表达载体pIRES在启动子下游的MCS A和MCS B的多克隆酶切位点分别插入鸡传染性喉气管炎病毒HN1株gB基因片段和鸡白介素-18基因片段，获得真核双表达质粒pIRES-gB/IL18。避免两种质粒共同免疫时可能存在的细胞摄取不成比例问题，提高局部抗原提成效率，增强局部免疫应答强度，缩短免疫应答潜伏期，为ILTV新型疫苗的研究奠定了基础。