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公开(公告)号：CN113637675B
公开(公告)日：2023-10-17
申请号：CN202111075911.7
申请日：2021-09-14
申请人： 河南普诺易生物制品研究院有限公司 , 新乡医学院
IPC分类号： C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , C07K14/765
摘要： 本发明属于人血清白蛋白的生产领域，具体涉及一种人血清白蛋白的生产方法、核苷酸序列、表达载体及表达系统。该核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的核苷酸序列，根据CHO细胞密码子偏爱性，对人血清白蛋白基因进行密码子优化，能够提高目的基因的基础表达量。另外，本发明进一步采用无血清中低温培养，添加小分子添加物在CHO细胞系高效表达人血清白蛋白。
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公开(公告)号：CN110894487B
公开(公告)日：2022-07-19
申请号：CN201911338744.3
申请日：2019-12-23
申请人： 新乡医学院 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司
IPC分类号： C12N5/071
摘要： 本发明涉及一种无血清无蛋白CHO细胞培养基及其制备方法、应用，属于CHO细胞培养技术领域。本发明的CHO细胞培养基包含氨基酸、维生素、微量元素、无机盐、脂类、碳水化合物和添加剂，所述脂类包括：亚麻酸0.02‑0.15mg/L、孕酮0.02‑0.15mg/L、亚油酸0.04‑0.24mg/L、胆固醇1‑7.5mg/L和花生四烯酸0.001‑0.008mg/L。培养基中营养成分均衡，尤其是脂类、碳水化合物和添加剂物质充分，在该培养基中CHO细胞生长倍数可高达20.88。在利用CHO细胞表达目的蛋白时，使用前述培养基不仅CHO细胞的生长倍数高，并且CHO细胞中目的蛋白的含量仍然能够达到较高的水平。
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公开(公告)号：CN113637675A
公开(公告)日：2021-11-12
申请号：CN202111075911.7
申请日：2021-09-14
申请人： 河南普诺易生物制品研究院有限公司 , 新乡医学院
IPC分类号： C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , C07K14/765
摘要： 本发明属于人血清白蛋白的生产领域，具体涉及一种人血清白蛋白的生产方法、核苷酸序列、表达载体及表达系统。该核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的核苷酸序列，根据CHO细胞密码子偏爱性，对人血清白蛋白基因进行密码子优化，能够提高目的基因的基础表达量。另外，本发明进一步采用无血清中低温培养，添加小分子添加物在CHO细胞系高效表达人血清白蛋白。
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公开(公告)号：CN110894487A
公开(公告)日：2020-03-20
申请号：CN201911338744.3
申请日：2019-12-23
申请人： 新乡医学院 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司
IPC分类号： C12N5/071
摘要： 本发明涉及一种无血清无蛋白CHO细胞培养基及其制备方法、应用，属于CHO细胞培养技术领域。本发明的CHO细胞培养基包含氨基酸、维生素、微量元素、无机盐、脂类、碳水化合物和添加剂，所述脂类包括：亚麻酸0.02-0.15mg/L、孕酮0.02-0.15mg/L、亚油酸0.04-0.24mg/L、胆固醇1-7.5mg/L和花生四烯酸0.001-0.008mg/L。培养基中营养成分均衡，尤其是脂类、碳水化合物和添加剂物质充分，在该培养基中CHO细胞生长倍数可高达20.88。在利用CHO细胞表达目的蛋白时，使用前述培养基不仅CHO细胞的生长倍数高，并且CHO细胞中目的蛋白的含量仍然能够达到较高的水平。
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公开(公告)号：CN113621577B
公开(公告)日：2023-03-10
申请号：CN202110893768.6
申请日：2021-08-05
申请人： 河南普诺易生物制品研究院有限公司 , 新乡医学院
摘要： 本发明属于基因重组疫苗技术领域，具体涉及人源化HEK293细胞系表达重组蛋白用培养基添加剂、重组乙肝疫苗、表达方法。本发明提供人源化HEK293细胞系表达重组蛋白用培养基添加剂，在转染重组表达载体的HEK293细胞悬浮无血清培养过程中添加丁酸钠和氢化肉桂酸，并优选丁酸钠添加量为1.0~3.0 mol/L，氢化肉桂酸的添加量为0.2~1.0 mol/L，协同增效，提高重组蛋白表达量。试验表明，利用本发明提供的培养基添加剂，低温条件下培养，提高乙肝表面抗原（HBsAg）目的基因在HEK293细胞的表达水平。
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公开(公告)号：CN113621577A
公开(公告)日：2021-11-09
申请号：CN202110893768.6
申请日：2021-08-05
申请人： 河南普诺易生物制品研究院有限公司 , 新乡医学院
摘要： 本发明属于基因重组疫苗技术领域，具体涉及人源化HEK293细胞系表达重组蛋白用培养基添加剂、重组乙肝疫苗、表达方法。本发明提供人源化HEK293细胞系表达重组蛋白用培养基添加剂，在转染重组表达载体的HEK293细胞悬浮无血清培养过程中添加丁酸钠和氢化肉桂酸，并优选丁酸钠添加量为1.0~3.0 mol/L，氢化肉桂酸的添加量为0.2~1.0 mol/L，协同增效，提高重组蛋白表达量。试验表明，利用本发明提供的培养基添加剂，低温条件下培养，提高乙肝表面抗原（HBsAg）目的基因在HEK293细胞的表达水平。
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公开(公告)号：CN116004645A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202310056456.9
申请日：2023-01-13
申请人： 新乡医学院
IPC分类号： C12N15/14 , C12N15/866 , C12N5/10 , C12N15/62
摘要： 本发明涉及一种利用昆虫细胞生产人血清白蛋白的方法、核苷酸序列及表达载体，属于生物技术领人血清白蛋白的生产领域。本发明人血清白蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明根据昆虫细胞密码子偏好性，对人血清白蛋白基因进行密码子优化，搭配核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的信号肽序列，能够实现人血清白蛋白在Sf9细胞中的表达。本发明进一步公开利用昆虫细胞生产人血清白蛋白的方法，在生产过程中添加小分子添加物，可有效的提高人血清白蛋白在Sf9细胞中的表达量。
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公开(公告)号：CN114480496B
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202210168172.4
申请日：2022-02-23
申请人： 新乡医学院
IPC分类号： C12N15/85 , C12N15/53 , C12N15/66 , C12Q1/6897
摘要： 本发明属于报告基因载体领域，具体涉及一种昆虫细胞用双荧光素酶报告基因载体、构建方法、重组载体及应用。该昆虫细胞用双荧光素酶报告基因载体是对psiCHECK‑2载体改造得到；所述改造包括使用OpIE2启动子替换原有SV40启动子，以及在HSV‑TK promoter和Synthetic poly(A)之间插入合成的DNA片段；所述psiCHECK‑2载体的hRluc基因下游供插入感兴趣的昆虫靶基因；所述合成的DNA片段的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明提供的昆虫细胞用双荧光素酶报告基因载体，成为昆虫细胞中强有力的基因转录和mRNA加工的研究工具，适用于昆虫基因功能研究。
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公开(公告)号：CN114480496A
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202210168172.4
申请日：2022-02-23
申请人： 新乡医学院
IPC分类号： C12N15/85 , C12N15/53 , C12N15/66 , C12Q1/6897
摘要： 本发明属于报告基因载体领域，具体涉及一种昆虫细胞用双荧光素酶报告基因载体、构建方法、重组载体及应用。该昆虫细胞用双荧光素酶报告基因载体是对psiCHECK‑2载体改造得到；所述改造包括使用OpIE2启动子替换原有SV40启动子，以及在HSV‑TK promoter和Synthetic poly(A)之间插入合成的DNA片段；所述psiCHECK‑2载体的hRluc基因下游供插入感兴趣的昆虫靶基因；所述合成的DNA片段的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明提供的昆虫细胞用双荧光素酶报告基因载体，确保在昆虫细胞中强有力的基因转录和mRNA加工，适用于昆虫基因功能研究。
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