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公开(公告)号：CN114561413B
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202210301557.3
申请日：2022-03-24
申请人： 新乡医学院
摘要： 本发明涉及一种瞬时转染试剂及其应用，属于细胞生物学和生物技术领域。本发明的瞬时转染试剂，包括聚乙烯亚胺盐酸盐溶液、氯化钠溶液和氯化镁溶液；聚乙烯亚胺盐酸盐溶液的浓度为0.8～1.2mg/mL，pH为6.9～7.1，聚乙烯亚胺盐酸盐为PEI MAX 40K；氯化钠溶液的浓度为4.8～5.3mol/L；氯化镁溶液的浓度为0.8～1.2mol/L。本发明的瞬时转染试剂用于细胞转染时，具有较高的转染效率。由于聚乙烯亚胺盐酸盐的浓度较低，本发明的瞬时转染试剂具有较低的毒性。本发明的瞬时转染试剂是一种价廉、毒性小、转染效率高的瞬时转染试剂，可用于重组蛋白生产和基因治疗等方面。
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公开(公告)号：CN112575031B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN201910935156.1
申请日：2019-09-29
申请人： 新乡医学院
摘要： 本发明涉及一种遍在染色质开放表达元件、重组表达载体、表达系统及其制备方法、应用，属于生物技术领域。本发明中的遍在染色质开放表达元件(UCOE序列)是在分析人UCOE序列(GenBank accession no.D28877.1)的基础上，删除了HNRPA2B1启动子序列，形成672bp序列，并发现672bp序列存在隐蔽拼接位点，将455、493隐蔽拼接位点进行突变设计合成了一种新型的UCOE元件。与天然UCOE序列相比，本发明的UCOE序列在提高哺乳动物细胞转基因表达水平上效果更为显著。
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公开(公告)号：CN110894487A
公开(公告)日：2020-03-20
申请号：CN201911338744.3
申请日：2019-12-23
申请人： 新乡医学院 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司
IPC分类号： C12N5/071
摘要： 本发明涉及一种无血清无蛋白CHO细胞培养基及其制备方法、应用，属于CHO细胞培养技术领域。本发明的CHO细胞培养基包含氨基酸、维生素、微量元素、无机盐、脂类、碳水化合物和添加剂，所述脂类包括：亚麻酸0.02-0.15mg/L、孕酮0.02-0.15mg/L、亚油酸0.04-0.24mg/L、胆固醇1-7.5mg/L和花生四烯酸0.001-0.008mg/L。培养基中营养成分均衡，尤其是脂类、碳水化合物和添加剂物质充分，在该培养基中CHO细胞生长倍数可高达20.88。在利用CHO细胞表达目的蛋白时，使用前述培养基不仅CHO细胞的生长倍数高，并且CHO细胞中目的蛋白的含量仍然能够达到较高的水平。
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公开(公告)号：CN114561430B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202210305844.1
申请日：2022-03-25
申请人： 新乡医学院
摘要： 本发明属于重组蛋白表达技术领域，具体涉及人源化细胞瞬时表达载体、表达系统及其应用。本发明构建的表达载体，引入TRE/TAP组成的反式激活蛋白元件，并且TAP作为独立表达框，相比未引入该元件的表达载体，能够成倍提高目的蛋白瞬时表达量；更进一步的，本发明将TRE/TAP组成的反式激活蛋白元件与核基质结合区元件MAR和IRES复配使用，相互之间协同增效，进一步提高目的蛋白的瞬时表达量。由此，本发明提供的表达载体和表达系统能够应用于制备蛋白类药物。
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公开(公告)号：CN117586351A
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202311625165.3
申请日：2023-11-30
申请人： 新乡医学院 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司 , 新乡学院
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及稳定子、融合蛋白、表达载体、表达系统、及其应用。本发明提供的稳定子，具有特定的氨基酸序列结构，通过融合在目的蛋白C末端的方式与目的蛋白融合表达，一方面能够实现目的蛋白稳定表达水平，另一方面能够提高目的蛋白稳定性，使得目的蛋白能够抵抗蛋白酶水解。
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公开(公告)号：CN116855500A
公开(公告)日：2023-10-10
申请号：CN202311020861.1
申请日：2023-08-15
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85 , C07K14/765 , C07K14/435 , C12N5/10
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及翻译增强元件在促进重组蛋白表达方面的应用、表达盒、载体、表达系统、试剂盒。本发明通过对人基因组翻译调控元件5'‑UTR插入序列进行构效关系分析，筛选设计出如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列作为翻译调控元件，紧邻连接在目的蛋白编码基因上游，构建重组蛋白表达载体，转染至哺乳动物细胞，进行重组蛋白表达，提高重组表达量，尤其是瞬时表达量。本发明通过试验验证，相比缺少翻译调控元件的表达系统，插入本发明提供的调控元件的表达系统，目的蛋白的瞬时表达量提高约1.5~2.0倍。
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公开(公告)号：CN111304144B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN201911207739.9
申请日：2019-11-30
申请人： 河南普诺易生物制品研究院有限公司 , 新乡医学院
摘要： 本发明涉及生物制药技术领域，具体涉及一种昆虫细胞培养基及其制备方法。该培养基有效成分包括氨基酸、维生素、无机盐、碳源、脂类物质和功能添加剂；其中功能添加剂包括腐胺、抗坏血酸磷酸酯镁、乙醇胺、次黄嘌呤、酵母提取物、棉籽水解物、丙酸钠、泊洛沙姆188、柠檬酸铁、柠檬酸钠、丙酮酸钠。本发明公开的培养基无血清、无蛋白，能避免添加血清带来的潜在风险及利于下游重组蛋白的纯化；同时培养基不含动物源添加物，适合生物药物的生产；本发明公开的培养基活细胞密度与细胞存活率高，蛋白表达量高，适合重组蛋白和疫苗的生产。
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公开(公告)号：CN118165913A
公开(公告)日：2024-06-11
申请号：CN202410295484.0
申请日：2024-03-15
申请人： 新乡医学院
摘要： 本发明涉及重组蛋白表达及细胞培养技术领域，具体涉及一种CHO细胞无血清培养基添加剂、CHO细胞无血清细胞培养基、应用。本发明在CHO细胞无血清培养基中添加3‑羟基邻氨基苯甲酸（3‑HAA），在一定程度上降低活细胞密度，但增加细胞特异性生产力，显著提高目的蛋白（例如单克隆抗体）在CHO细胞中的表达水平。从而降低生产重组蛋白等生物制品（例如单克隆抗体）生产工艺对培养基的快速消耗和生物反应器规模的需求，提高生产效率，最终降低重功能组蛋白等生物制品（例如单克隆抗体）的生产成本。
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公开(公告)号：CN114807145B
公开(公告)日：2024-02-20
申请号：CN202210619725.3
申请日：2022-06-02
申请人： 新乡医学院 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/12 , C12N15/53 , C12N15/13
摘要： 本发明提供了一种提高非帽子依赖翻译效率的前导序列及其应用，属于基因工程技术领域。所述前导序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的前导序列能有效提高瞬时哺乳细胞表达系统中非帽子依赖内部核糖体进入位点(internalribozymeentrysite，IRES)元件介导的目的基因的表达量。
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公开(公告)号：CN114807145A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210619725.3
申请日：2022-06-02
申请人： 新乡医学院 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/12 , C12N15/53 , C12N15/13
摘要： 本发明提供了一种提高非帽子依赖翻译效率的前导序列及其应用，属于基因工程技术领域。所述前导序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的前导序列能有效提高瞬时哺乳细胞表达系统中非帽子依赖内部核糖体进入位点(internalribozymeentrysite，IRES)元件介导的目的基因的表达量。
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