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公开(公告)号：CN110627869B
公开(公告)日：2022-04-22
申请号：CN201910949075.7
申请日：2019-10-08
申请人： 河南省农业科学院 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： C07K7/06 , G01N33/569
摘要： 本发明涉及与禽法氏囊病毒VP2蛋白特异性结合的多肽序列及其应用，属于分子生物学领域。本发明借助于计算机辅助设计，在禽法氏囊病毒VP2蛋白晶体结构的基础上，通过分子对接虚拟筛选技术，搜寻虚拟多肽数据库中与靶标蛋白结合模式与亲和力最佳的多肽配体，其多肽序列为SERWDN，即IBDVL9‑15。本发明利用表达纯化的IBDV VP2蛋白分别进行ELISA和局域表面等离子体共振试验，结果表明，IBDVL9‑15多肽能够与IBDV VP2蛋白有良好的结合能力，借助本发明设计而成的多肽，可用于对IBDV VP2抗原进行快速检测和分离纯化。
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公开(公告)号：CN111606978B
公开(公告)日：2023-03-17
申请号：CN202010515345.6
申请日：2020-06-09
申请人： 河南省农业科学院 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： C07K14/015 , C07K1/36 , C07K1/30 , C07K1/22 , C07K1/16 , C07K1/14 , C12P21/02 , A61K39/23 , A61P31/20 , C12R1/19
摘要： 本发明提供一种去除大肠杆菌表达重组猪细小病毒VP2蛋白中内毒素的方法，包括猪细小病毒重组VP2蛋白抗原溶液制备、氢氧化铝悬液制备、氢氧化铝吸附和层析法分离步骤。通过氢氧化铝吸附和复合模式层析介质分离两步，可以有效去除大肠杆菌表达系统中重组蛋白的内毒素，操作简单实用，符合规模化生产需求。采用本发明方法处理后的生物制品的VP2蛋白内毒素含量小于200EU/mL，且对VP2蛋白抗原活性无明显影响，安全性好，处理后的蛋白可在制备疫苗、药物类等生物制品中应用，解决了PPV疫苗生产中的核心技术问题。
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公开(公告)号：CN110627869A
公开(公告)日：2019-12-31
申请号：CN201910949075.7
申请日：2019-10-08
申请人： 河南省农业科学院 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： C07K7/06 , G01N33/569
摘要： 本发明涉及与禽法氏囊病毒VP2蛋白特异性结合的多肽序列及其应用，属于分子生物学领域。本发明借助于计算机辅助设计，在禽法氏囊病毒VP2蛋白晶体结构的基础上，通过分子对接虚拟筛选技术，搜寻虚拟多肽数据库中与靶标蛋白结合模式与亲和力最佳的多肽配体，其多肽序列为SERWDN，即IBDVL9-15。本发明利用表达纯化的IBDV VP2蛋白分别进行ELISA和局域表面等离子体共振试验，结果表明，IBDVL9-15多肽能够与IBDV VP2蛋白有良好的结合能力，借助本发明设计而成的多肽，可用于对IBDV VP2抗原进行快速检测和分离纯化。
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公开(公告)号：CN111606978A
公开(公告)日：2020-09-01
申请号：CN202010515345.6
申请日：2020-06-09
申请人： 河南省农业科学院 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： C07K14/015 , C07K1/36 , C07K1/30 , C07K1/22 , C07K1/16 , C07K1/14 , C12P21/02 , A61K39/23 , A61P31/20 , C12R1/19
摘要： 本发明提供一种去除大肠杆菌表达重组猪细小病毒VP2蛋白中内毒素的方法，包括猪细小病毒重组VP2蛋白抗原溶液制备、氢氧化铝悬液制备、氢氧化铝吸附和层析法分离步骤。通过氢氧化铝吸附和复合模式层析介质分离两步，可以有效去除大肠杆菌表达系统中重组蛋白的内毒素，操作简单实用，符合规模化生产需求。采用本发明方法处理后的生物制品的VP2蛋白内毒素含量小于200EU/mL，且对VP2蛋白抗原活性无明显影响，安全性好，处理后的蛋白可在制备疫苗、药物类等生物制品中应用，解决了PPV疫苗生产中的核心技术问题。
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公开(公告)号：CN109161575A
公开(公告)日：2019-01-08
申请号：CN201811083057.7
申请日：2018-09-17
申请人： 河南省农业科学院 , 河南中泽生物工程有限公司
摘要： 本发明公开了一种禽法氏囊病毒VP2蛋白的高表达发酵工艺，旨在解决工程菌禽法氏囊病毒VP2蛋白表达量低的技术问题。该发酵工艺包括以下步骤：（1）菌种活化；（2）种子培养；（3）补料分批发酵：I.细胞快速繁殖阶段：制备基础培养基置于发酵罐中，将二级种子液按4～6%的接种量接入发酵罐中发酵，待溶氧量急剧上升开始补料；II.蛋白表达阶段：加入终浓度为0.5mmol/L诱导剂；加入补料培养基之二，继续发酵至结束即成。本发明的工艺方法蛋白表达量高，能够缩短生产周期、减少设备投资，降低生产成本，提高生产效率，能够极大地提高产品在商场上的竞争力，为IBDV基因工程亚单位疫苗的研制和生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN108823218A
公开(公告)日：2018-11-16
申请号：CN201810797851.1
申请日：2018-07-19
申请人： 河南省农业科学院 , 河南中泽生物工程有限公司
摘要： 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因、其表达产物、其亚单位疫苗及应用。本发明提供了一种鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的核酸序列、克隆该核酸序列的引物、含该核酸序列的表达载体、由表达载体转化而得的工程菌、由核酸序列编码、表达载体表达或所工程菌分离的鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白，及鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白自组装而成的鸡传染性法氏囊病毒病毒样颗粒。还提供了由鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白制得的亚单位疫苗，由鸡传染性法氏囊病毒病毒样颗粒制得的亚单位疫苗。将亚单位疫苗在预防鸡传染性法氏囊病病毒引起的鸡相关疾病中应用。本发明生产成本低、操作简单、生物安全性好，疫苗可有效预防鸡传染性法氏囊病毒对鸡群的感染。
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公开(公告)号：CN112940085B
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202110162921.8
申请日：2021-02-05
申请人： 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
摘要： 本发明公开了一种BTV1保护性表位多肽、其特异性识别单克隆抗体、抗体分泌细胞及其应用，旨在解决BTV血清型的检测诊断及BTV预防和治疗试剂或药物不完善、不全面的技术问题。本发明鉴定得到一种全新的BTV1 VP2蛋白的线性B细胞表位：296‑KEPAD‑300，并诱导制得能特异性识别该表位的单克隆抗体。该线性B细胞表位丰富了BTV1 VP2蛋白的免疫学功能，为后续研究VP2蛋白的结构特性以及抗原特性提供参考，可应用于抗病毒药物、防疫疫苗等的研发。
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公开(公告)号：CN115466799A
公开(公告)日：2022-12-13
申请号：CN202110653924.1
申请日：2021-06-11
申请人： 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明涉及检测新型冠状病毒的引物探针组合物、试剂盒及方法。本发明基于双重检测靶标，在同一检测体系中分别针对新型冠状病毒S基因和N基因为设计了检测引物探针组合物，并提供了包含该引物探针组合物的新型冠状病毒检测试剂盒及非疾病诊断目的的检测方法，具有敏度性高、重复性好、特异性强、检测速度快、结果客观、高通量等优点。本发明提供的试剂盒和非疾病诊断目的的检测方法不仅能够实现定性检测，还能够对待检样本的核酸浓度作出客观的、定量的检测，对检测样品的病毒含量进行准确判定，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN112940085A
公开(公告)日：2021-06-11
申请号：CN202110162921.8
申请日：2021-02-05
申请人： 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
摘要： 本发明公开了一种BTV1保护性表位多肽、其特异性识别单克隆抗体、抗体分泌细胞及其应用，旨在解决BTV血清型的检测诊断及BTV预防和治疗试剂或药物不完善、不全面的技术问题。本发明鉴定得到一种全新的BTV1 VP2蛋白的线性B细胞表位：296‑KEPAD‑300，并诱导制得能特异性识别该表位的单克隆抗体。该线性B细胞表位丰富了BTV1 VP2蛋白的免疫学功能，为后续研究VP2蛋白的结构特性以及抗原特性提供参考，可应用于抗病毒药物、防疫疫苗等的研发。
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公开(公告)号：CN116041433A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202310078820.1
申请日：2023-01-13
申请人： 河南省农业科学院
IPC分类号： C07K7/06 , A61K38/08 , A61P31/14 , G01N33/569
摘要： 本发明一条靶向猪病毒性腹泻病毒S1蛋白的多肽，借助于机器学习模型，针对PEDV S蛋白晶体结构的S1‑CTD区域解析，通过多肽虚拟筛选技术，筛选到与靶标蛋白具备潜，其多肽序列为FWKHRI（111740）。人工固相合成111740序列，并利用人工表达的PEDV S1蛋白，借助ELISA实验对多肽进行筛选；借助表面等离子共振实验（SPR）鉴定多肽与靶蛋白的亲和力常数；通过CCK‑8试剂盒检验多肽111740对细胞毒性；借助荧光定量PCR和间接免疫荧光实验试验其抑制病毒感染的活性，结果表明111740序列可显著抑制PEDV的感染。
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