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公开(公告)号：CN110408633B
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN201910618587.5
申请日：2019-07-10
申请人： 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
摘要： 本申请属于动物疫苗制备技术领域，具体涉及一种利用基因工程技术制备BTV1（蓝舌病1型病毒）VP2蛋白的制备方法专利申请事宜。蓝舌病1型病毒VP2蛋白基因编码序列VP2U由2886bp碱基组成，具体碱基序列如SEQ ID NO.1所示。具体原核表达制备BTV1 VP2蛋白时，包括：PCR扩增，酶切、与质粒pET28连接构建重组质粒pET28‑VP2U，转化，诱导表达等步骤。本申请通过对相关编码基因的优化，进一步借助于原核表达系统的技术优势，为发酵制备BTV1 VP2蛋白奠定了一定技术基础。初步实验结果表明，发酵液上清中的目的蛋白表达量可达到58.4μg/ml，可为工业化生产奠定良好技术基础。
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公开(公告)号：CN107840884B
公开(公告)日：2020-12-08
申请号：CN201711131496.6
申请日：2017-11-15
申请人： 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
摘要： 本发明公开了一种抗禽类传染性支气管炎病毒的纳米抗体，制备时首先将IBV病毒在鸡胚上传代培养，将含有病毒的鸡胚尿囊液收集并进行纯化；从未经免疫的健康骆驼的外周血淋巴细胞中提取其RNA，特异性扩增骆驼重链抗体可变区基因，将酶切后基因与噬菌粒载体pCANTAB5E连接后电转化至大肠杆菌TG1，获得VHH抗体基因库；分析其库容量及多样性后，筛选出能够与IBV特异性结合的纳米抗体VHH‑A2片段；构建pet28a‑A2表达载体，对其进行原核表达、纯化与鉴定，即得到所需要的纳米抗体。本发明制备的纳米抗体作为一种新型的基因工程抗体，由于其独特的结构特征，抗原识别能力强，可用于快速、准确的检测禽类（如鸡）传染性支气管炎，且制备周期短，方法简单。
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公开(公告)号：CN108845149A
公开(公告)日：2018-11-20
申请号：CN201810732140.6
申请日：2018-07-05
申请人： 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/531
摘要： 本发明公开了一种同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒的胶体金双联试纸条及其制备方法。该试纸条包括支撑板，硝酸纤维素膜，样品垫，金标抗体垫，吸水纸，检测线T2，检测线T1和质控线，金标抗体垫标记抗PRRSV及CSFV的IgG混合物，检测线T1包被抗PRRSV N蛋白单克隆抗体，检测线T2包被抗CSFV E2蛋白单克隆抗体，质控线包被羊抗鼠IgG。提供了同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒的胶体金双联试纸条的制备方法。本发明的同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒的胶体金双联试纸条快速、简便、特异性好，为猪繁殖与呼吸综合征及猪瘟的联合免疫监测和流行病学研究提供技术支撑，对猪病的防控有着重要的意义。
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公开(公告)号：CN109187968B
公开(公告)日：2022-01-28
申请号：CN201811091645.5
申请日：2018-09-19
申请人： 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/531
摘要： 本发明公开了一种猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的二联金标检测试纸及其制备方法，包括支撑板、样品垫、金标垫、NC膜和吸水垫，NC膜上含有猪瘟病毒检测线T1“│”，猪伪狂犬病毒检测线T2“│”和质控线C“│”印迹。检测时，在检测膜显现三条红色条带“│││”为猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒共感染，出现检测线T1和质控线C两条红色条带“││”为只有猪瘟病毒感染；出现检测线T2和质控线C两条红色条带“││”为只有猪伪狂犬病毒感染；只显现一条红色条带“│”为阴性，两种病毒都未感染。本检测试纸特异性强，敏感性高，反应谱广，可检测现有多数流行毒株，且操作简便、快速，可广泛用于猪瘟病毒感染与猪伪狂犬病毒感染检测，易于在生产实践中推广应用。
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公开(公告)号：CN110408633A
公开(公告)日：2019-11-05
申请号：CN201910618587.5
申请日：2019-07-10
申请人： 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
摘要： 本申请属于动物疫苗制备技术领域，具体涉及一种利用基因工程技术制备BTV1（蓝舌病1型病毒）VP2蛋白的制备方法专利申请事宜。蓝舌病1型病毒VP2蛋白基因编码序列VP2U由2886bp碱基组成，具体碱基序列如SEQ ID NO.1所示。具体原核表达制备BTV1 VP2蛋白时，包括：PCR扩增，酶切、与质粒pET28连接构建重组质粒pET28-VP2U，转化，诱导表达等步骤。本申请通过对相关编码基因的优化，进一步借助于原核表达系统的技术优势，为发酵制备BTV1 VP2蛋白奠定了一定技术基础。初步实验结果表明，发酵液上清中的目的蛋白表达量可达到58.4μg/ml，可为工业化生产奠定良好技术基础。
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公开(公告)号：CN112940085A
公开(公告)日：2021-06-11
申请号：CN202110162921.8
申请日：2021-02-05
申请人： 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
摘要： 本发明公开了一种BTV1保护性表位多肽、其特异性识别单克隆抗体、抗体分泌细胞及其应用，旨在解决BTV血清型的检测诊断及BTV预防和治疗试剂或药物不完善、不全面的技术问题。本发明鉴定得到一种全新的BTV1 VP2蛋白的线性B细胞表位：296‑KEPAD‑300，并诱导制得能特异性识别该表位的单克隆抗体。该线性B细胞表位丰富了BTV1 VP2蛋白的免疫学功能，为后续研究VP2蛋白的结构特性以及抗原特性提供参考，可应用于抗病毒药物、防疫疫苗等的研发。
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公开(公告)号：CN112724203A
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN202011607069.2
申请日：2020-12-30
申请人： 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： C07K14/01 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569
摘要： 本发明涉及一种非洲猪瘟病毒p54蛋白抗原表位肽及其应用。本发明筛选出了新的非洲猪瘟病毒p54蛋白抗原表位，完成了对p54蛋白N端B细胞表位的鉴定，完善了p54蛋白的抗原表位图谱。本发明筛选出的抗原表位(2DSEFFQPV9)为首次发现，在非洲猪瘟各毒株之间高度保守，对ASFV的血清学检测具有重要意义。该抗原表位肽及由其衍生的具有同等功能的抗原表位肽能够用于制备非洲猪瘟病毒p54蛋白的特异性抗体、制备检测或鉴定ASFVp54蛋白的试剂，并为研发预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染疫苗奠定了基础。
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公开(公告)号：CN109187968A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201811091645.5
申请日：2018-09-19
申请人： 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/531
摘要： 本发明公开了一种猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的二联金标检测试纸及其制备方法，包括支撑板、样品垫、金标垫、NC膜和吸水垫，NC膜上含有猪瘟病毒检测线T1“│”，猪伪狂犬病毒检测线T2“│”和质控线C“│”印迹。检测时，在检测膜显现三条红色条带“│││”为猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒共感染，出现检测线T1和质控线C两条红色条带“││”为只有猪瘟病毒感染；出现检测线T2和质控线C两条红色条带“││”为只有猪伪狂犬病毒感染；只显现一条红色条带“│”为阴性，两种病毒都未感染。本检测试纸特异性强，敏感性高，反应谱广，可检测现有多数流行毒株，且操作简便、快速，可广泛用于猪瘟病毒感染与猪伪狂犬病毒感染检测，易于在生产实践中推广应用。
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公开(公告)号：CN112940085B
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202110162921.8
申请日：2021-02-05
申请人： 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
摘要： 本发明公开了一种BTV1保护性表位多肽、其特异性识别单克隆抗体、抗体分泌细胞及其应用，旨在解决BTV血清型的检测诊断及BTV预防和治疗试剂或药物不完善、不全面的技术问题。本发明鉴定得到一种全新的BTV1 VP2蛋白的线性B细胞表位：296‑KEPAD‑300，并诱导制得能特异性识别该表位的单克隆抗体。该线性B细胞表位丰富了BTV1 VP2蛋白的免疫学功能，为后续研究VP2蛋白的结构特性以及抗原特性提供参考，可应用于抗病毒药物、防疫疫苗等的研发。
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公开(公告)号：CN116082466A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202111307917.2
申请日：2021-11-05
申请人： 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： C07K14/01 , C12N15/34 , C07K16/08 , C12N15/13 , G01N33/569
摘要： 本发明涉及非洲猪瘟病毒CD2V表位肽及其应用、抗非洲猪瘟病毒CD2V单克隆抗体。本发明以重组ASFV CD2V为免疫原进行动物免疫，制备得到5株抗ASFV单克隆抗体，采用肽扫描法即重叠多肽法，将ASFV CD2V蛋白的胞外区重叠截短成18段短肽，分别与5株抗ASFV单克隆抗体反应，鉴定出5条表位肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1‑5所示。本发明的表位肽能够用作免疫原刺激动物产生抗ASFV血清或抗ASFV单克隆抗体；能够用于制备ASFV疫苗；能够用于制备非洲猪瘟病毒免疫检测试剂或试剂盒，为ASFV疫苗设计、抗体研发以及抗体检测试剂盒的研发提供新的抗原靶点。
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