公开(公告)号：CN116836259A

公开(公告)日：2023-10-03

申请号：CN202310670274.0

申请日：2023-06-07

申请人： 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

发明人： 李青梅 ,  郭军庆 ,  张改平 ,  乔松林 ,  杨继飞 ,  赵东 ,  王丽 ,  柴书军 ,  邢广旭

IPC分类号： C07K14/705 ,  A61K47/42

摘要： 本发明涉及一种牛IgG Fc受体boFcγRII的线性配体结合表位，该表位序列为FYQDRKSKIF，位于boFcγRII第2胞外结构域EC2的C‑C’环122‑131位。将boFcγRII多肽偶联于载体蛋白，Dot‑blot筛选与牛IgG1特异结合的受体多肽，通过合成N端和C端系列截短多肽，获得特异结合牛IgG1的线性配体结合表位多肽；氨基酸突变分析表明，boFcγRII线性配体结合表位的Phe122、Tyr123、Arg126、Lys127、Ser128、Lys129和Phe131为结合牛IgG1的关键氨基酸残基。阻断ELISA和玫瑰花环抑制试验结果显示，boFcγRII线性配体结合表位多肽可有效抑制牛IgG1与boFcγRII重组蛋白及其细胞表面表达boFcγRII的结合，为IgG Fc受体靶标药物的开发提供新思路。

公开(公告)号：CN116769014A

公开(公告)日：2023-09-19

申请号：CN202310670270.2

申请日：2023-06-07

申请人： 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

发明人： 李青梅 ,  郭军庆 ,  张改平 ,  乔松林 ,  杨继飞 ,  赵东 ,  王丽 ,  柴书军 ,  邢广旭

IPC分类号： C07K14/705 ,  A61K47/42

摘要： 本发明涉及一种牛IgG Fc受体boFcγRI的线性配体结合表位，该表位序列为TNLSHNGI，位于boFcγRI第2胞外结构域EC2的E‑F环142‑149位。本发明将多肽偶联于载体蛋白，Dot‑blot筛选与牛IgG1特异结合的受体多肽，通过合成N端和C端系列截短多肽，获得特异结合牛IgG1的线性配体结合表位多肽。氨基酸突变分析表明，boFcγRI线性配体结合表位的Thr142、Asn143、Leu144、Gly148和Ile149为结合牛IgG1的关键氨基酸残基；阻断ELISA和玫瑰花环抑制试验结果显示，boFcγRI线性配体结合表位可有效抑制牛IgG1与boFcγRI重组蛋白及其细胞表面表达boFcγRI的结合，为IgG Fc受体靶标药物开发提供新思路。

公开(公告)号：CN114703177B

公开(公告)日：2023-08-11

申请号：CN202210350761.4

申请日：2022-04-02

申请人： 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

发明人： 郭振华 ,  宋佳 ,  孙亚宁 ,  王建昌 ,  金前跃 ,  李青梅 ,  杨继飞

IPC分类号： C12N15/11 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  G01N33/543 ,  G01N33/558

摘要： 本发明涉及一种RPA等温扩增和免疫层析技术相结合的伪狂犬病毒检测组合物、方法及试剂盒，属于疾病检测领域。本发明针对PRV的gE基因，通过筛选获得一组具有很高RPA扩增效率的引物探针，进一步结合免疫层析技术建立了胶体金试纸条RPA检测方法，实现了PRV感染的临床快速检测。同时样品通过高温处理即可实现核酸模板的制备，极大降低整个检测成本，缩短检测时间。该方法具有良好的特异性，灵敏度可达21个拷贝/反应或者6×100TCID50/反应；临床样品检测显示，本发明和国标GB/T35911‑2018推荐的PRV检测方法结果完全一致，具有较好的实际应用价值。

公开(公告)号：CN116769015A

公开(公告)日：2023-09-19

申请号：CN202310670273.6

申请日：2023-06-07

申请人： 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

发明人： 李青梅 ,  郭军庆 ,  张改平 ,  乔松林 ,  杨继飞 ,  赵东 ,  王丽 ,  柴书军 ,  邢广旭

IPC分类号： C07K14/705 ,  A61K47/42

摘要： 本发明涉及一种牛IgG Fc受体boFcγRIII的线性配体结合表位，该表位序列为AQRVVN，位于boFcγRIII第2胞外结构域EC2的A‑B环98‑103位。本发明在boFcγRIII的EC2结构域设计合成boFcγRIII多肽，将多肽偶联于载体蛋白，通过合成N端和C端系列截短多肽，获得特异结合牛IgG1的线性配体结合表位多肽；阻断ELISA和玫瑰花环抑制试验结果显示，boFcγRIII线性配体结合表位多肽可有效抑制牛IgG1与boFcγRIII重组蛋白及其细胞表面表达boFcγRIII的结合，该多肽为IgG Fc受体靶标药物开发提供新思路。

公开(公告)号：CN113527446A

公开(公告)日：2021-10-22

申请号：CN202110795473.5

申请日：2021-07-14

申请人： 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

发明人： 魏蔷 ,  张改平 ,  王爱萍 ,  王攀 ,  丁培阳 ,  刘运超 ,  冯华 ,  尚延丽 ,  李青梅

IPC分类号： C07K14/165 ,  C07K16/10 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14

摘要： 本发明涉及一种MERS‑CoV S‑RBD线性B细胞表位及其特异性识别单克隆抗体和应用。利用HEK 293F细胞表达系统表达MERS‑CoV S1重组蛋白，经纯化获得高纯度、具有生物学活性和免疫原性的目的蛋白。随后免疫小鼠获得单克隆抗体；利用ELISA鉴定其中一株单克隆抗体6E8可特异性识别RBD‑rFc蛋白；利用真核细胞HEK‑293T重组表达MERS‑CoVS‑RBD重组蛋白不同片段，通过Dot‑blot鉴定获得的6E8单克隆抗体特异性识别MERS‑CoV S‑RBD N端区域；利用ELISA进一步鉴定N端区域合成多肽，鉴定6E8单克隆抗体特异性识别序列为FTCSQIS的线性B细胞表位。

公开(公告)号：CN114703177A

公开(公告)日：2022-07-05

申请号：CN202210350761.4

申请日：2022-04-02

申请人： 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

发明人： 郭振华 ,  宋佳 ,  孙亚宁 ,  王建昌 ,  金前跃 ,  李青梅 ,  杨继飞

IPC分类号： C12N15/11 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  G01N33/543 ,  G01N33/558

摘要： 本发明涉及一种RPA等温扩增和免疫层析技术相结合的伪狂犬病毒检测组合物、方法及试剂盒，属于疾病检测领域。本发明针对PRV的gE基因，通过筛选获得一组具有很高RPA扩增效率的引物探针，进一步结合免疫层析技术建立了胶体金试纸条RPA检测方法，实现了PRV感染的临床快速检测。同时样品通过高温处理即可实现核酸模板的制备，极大降低整个检测成本，缩短检测时间。该方法具有良好的特异性，灵敏度可达21个拷贝/反应或者6×100TCID50/反应；临床样品检测显示，本发明和国标GB/T35911‑2018推荐的PRV检测方法结果完全一致，具有较好的实际应用价值。