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公开(公告)号：CN103757068A
公开(公告)日：2014-04-30
申请号：CN201410012864.5
申请日：2014-01-10
申请人： 浙江台州清泉医药化工有限公司 , 杭州师范大学 , 江苏清泉化学有限公司
摘要： 本发明提供一种苯甲酸衍生物的制备方法，包括在包含腈水解酶的酶催化剂作用下，含水反应混合物中的苯甲腈衍生物水解生成所述苯甲酸衍生物。优选所述苯甲腈衍生物选自对氨甲基苯甲腈和对氯甲基苯甲腈。优选本发明所述腈水解酶为GenBank中编号为ABD98457.1的氨基酸序列。本发明可以高效地生产对氨甲基苯甲酸和对氯甲基苯甲酸，而且反应条件温和，对环境友好，操作简便。本发明提供的生物催化生产苯甲酸衍生物的方法具有很好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN105154424B
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201510626188.5
申请日：2015-09-28
申请人： 杭州华东医药集团新药研究院有限公司 , 杭州师范大学
摘要： 本发明公开了一种固定化环脂肽脱酰酶的制备方法。环脂肽脱酰酶溶液不经纯化，直接与多孔亲水性酶载体混合，并加入一种或多种有机溶液和无机盐，得到固定化环脂肽脱酰酶；同时公开了这一方法可用于工业化生产米卡芬净母核和阿尼芬净母核。本发明公开的制备方法工艺简单，不仅节省了酶纯化设备，而且固定化过程中酶活回收率明显提高，固定化酶可多次重复使用。酶法转化米卡芬净和阿尼芬净中间体，相比发酵转化法反应底物浓度高，产物杂质少，转化效率高。
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公开(公告)号：CN103122355B
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201210535657.9
申请日：2012-12-12
申请人： 杭州师范大学
摘要： 本发明公开了一种重组耐热醛酮还原酶基因、基因编码酶、重组载体、工程菌及基因编码酶在制备光学手性醇中的应用，所述重组耐热醛酮还原酶基因具有与SEQ ID No.1所示核苷酸序列90%以上同源性；本发明所涉及的重组耐热醛酮还原酶具有高活性、热稳定性好，60℃处理 15小时后仍较为稳定，残余相对酶活高达99%；本发明的重组耐热醛酮还原酶高效高选择性地制备手性醇类化合物；由于本发明的重组耐热醛酮还原酶具有较高的热稳定性，可以回收利用，并且反应体系中只需要额外添加少量的辅酶，极大地降低了生产的成本，且反应条件温和，对环境友好，操作简便，在合成药物手性中间体方面具有很好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN106834262B
公开(公告)日：2019-08-16
申请号：CN201710092983.X
申请日：2017-02-21
申请人： 杭州师范大学
摘要： 本发明公开了一种亚油酸异构酶突变体及其应用，所述突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的亚油酸异构酶第62位蛋氨酸突变为丙氨酸或甘氨酸，和/或第295位丝氨酸突变为丙氨酸、亮氨酸或缬氨酸得到。本发明亚油酸异构酶突变体与野生型酶相比，催化亚油酸获得反‑10,顺‑12共轭亚油酸的酶活力得到了大大的提高，特别是双突变时，如M62A/S295L，M62A/S295A，M62A/S295V，M62G/S295L，M62G/S295A，M62G/S295V，能够提高10倍左右，具备良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN103898072B
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201410067936.6
申请日：2014-02-26
申请人： 杭州师范大学
摘要： 本发明公开了一种酮还原酶突变体及其应用，所述突变体酮还原酶是将SEQ ID NO：7所示氨基酸序列的第21位的色氨酸残基突变为谷氨酰胺或丝氨酸，同时将第86位的色氨酸残基突变成谷氨酸、组氨酸、异亮氨酸、天冬酰胺或缬氨酸；本发明突变体酮还原酶改变了野生型酮还原酶对酮酯类化合物（如：2-氧代-4-苯基丁酸乙酯或2,4-二氧代-4-苯基丁酸乙酯）催化的立体倾向性，生成的主要产物（如：2-羟基-4-苯基丁酸乙酯或2-羟基-4-氧代-4-苯基丁酸乙酯）由（S-）构象变成了（R-）构象，并且对映体过量值（ee值）由76.7%（S-）转变为99.4%（R-）。
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公开(公告)号：CN103614347A
公开(公告)日：2014-03-05
申请号：CN201310454764.3
申请日：2013-09-27
申请人： 杭州师范大学
CPC分类号： C12N9/0006 , C12P7/62 , C12Y101/01184
摘要： 本发明提供了一种嗜热酮还原酶突变体、编码基因、重组载体及其应用。所述突变体由SEQ ID No.1所示氨基酸序列经点突变得到，所述点突变为：第21位突变为亮氨酸，和/或第118位突变为组氨酸或谷氨酸。本发明的有益效果主要体现在：本发明提供了一种嗜热酮还原酶突变体，突变特定位置的氨基酸生成的突变体同野生型酶相比，在热稳定性和催化活性相当的前提下，提高了反应产物的旋光选择性。
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公开(公告)号：CN103146669A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201310074573.4
申请日：2013-03-08
申请人： 浙江普洛得邦制药有限公司 , 杭州师范大学
摘要： 本发明公开了一种自诱导培养基及其应用。所述自诱导培养基的配方为：阿拉伯糖2～10g/L，葡萄糖0.5～2.5g/L，甘油5～25g/L，蛋白胨8～12g/L，磷酸盐6.5～7.4g/L，硫酸盐1.1～1.3g/L，NH4Cl2.6～2.7g/L，痕量元素溶液适量。所述应用为该自诱导培养基在生产青霉素酰胺酶中的应用。与现有技术相比，本发明的自诱导培养基利用阿拉伯糖作为底物诱导目的蛋白表达，可调控性强，蛋白表达量高；在一个具体实施方式中，青霉素酰胺酶酶活达6U/mL，远远高于使用乳糖诱导的蛋白表达量，对开发生产青霉素酰胺酶的新工艺具有重要的指导意义。
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公开(公告)号：CN102952814A
公开(公告)日：2013-03-06
申请号：CN201210455305.2
申请日：2012-11-13
申请人： 杭州师范大学
摘要： 本发明公开了一种重组耐热短链脱氢酶基因、编码酶、载体、工程菌及应用，所述重组耐热短链脱氢酶基因具有与SEQ ID No.1所示核苷酸序列90%以上同源性；本发明所涉及的重组耐热短链脱氢酶具有高活性、热稳定性好，能高效高选择性地制备手性醇类化合物，可以在葡萄糖脱氢酶GDH或甲酸脱氢酶条件下构建辅酶NADPH或NADH循环再生系统，能大大降低反应过程中辅酶的消耗；本发明方法极大地降低了生产的成本，且反应条件温和，对环境友好，操作简便，在合成药物手性中间体方面具有很好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN106834262A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201710092983.X
申请日：2017-02-21
申请人： 杭州师范大学
CPC分类号： C12N9/90 , C12P7/6427 , C12Y502/01005
摘要： 本发明公开了一种亚油酸异构酶突变体及其应用，所述突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的亚油酸异构酶第62位蛋氨酸突变为丙氨酸或甘氨酸，和/或第295位丝氨酸突变为丙氨酸、亮氨酸或缬氨酸得到。本发明亚油酸异构酶突变体与野生型酶相比，催化亚油酸获得反‑10,顺‑12共轭亚油酸的酶活力得到了大大的提高，特别是双突变时，如M62A/S295L，M62A/S295A，M62A/S295V，M62G/S295L，M62G/S295A，M62G/S295V，能够提高10倍左右，具备良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN103757068B
公开(公告)日：2016-06-29
申请号：CN201410012864.5
申请日：2014-01-10
申请人： 江苏清泉化学股份有限公司 , 杭州师范大学
摘要： 本发明提供一种苯甲酸衍生物的制备方法，包括在包含腈水解酶的酶催化剂作用下，含水反应混合物中的苯甲腈衍生物水解生成所述苯甲酸衍生物。优选所述苯甲腈衍生物选自对氨甲基苯甲腈和对氯甲基苯甲腈。优选本发明所述腈水解酶为GenBank中编号为ABD98457.1的氨基酸序列。本发明可以高效地生产对氨甲基苯甲酸和对氯甲基苯甲酸，而且反应条件温和，对环境友好，操作简便。本发明提供的生物催化生产苯甲酸衍生物的方法具有很好的工业应用前景。
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