一种假单胞菌菌株及其应用

    公开(公告)号:CN101928683B

    公开(公告)日:2012-05-02

    申请号:CN201010003726.2

    申请日:2010-01-01

    Abstract: 本发明提供了一种假单胞菌菌株②-29,其分类命名为假单胞菌(Pseudomonassp.),其保藏编号为CGMCC NO.3331,它的保藏时间为2009年10月9日,保减单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),地址为北京市朝阳区大屯路,中国科学院微生物研究所。本发明还提供了假单胞菌菌株②-29在防治番茄青枯病的应用。本发明针对目前番茄青枯病缺少有效的化学药剂,加之青枯菌对化学农药易产生抗药性的问题,通过对番茄青枯病拮抗菌分离筛选及其防效试验,分离筛选出对番茄青枯病有拮抗作用的菌株,在此基础上可以进行进一步的田间试验,借以开发出一种成熟的微生物有机肥,对减少大量化肥、农药的使用,减轻农业面源污染具有重要的作用。

    一种假单胞菌菌株及其应用

    公开(公告)号:CN101928683A

    公开(公告)日:2010-12-29

    申请号:CN201010003726.2

    申请日:2010-01-01

    Abstract: 本发明提供了一种假单胞菌菌株②-29,其分类命名为假单胞菌(Pseudomonassp.),其保藏编号为CGMCC NO.3331,它的保藏时间为2009年10月9日,保减单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),地址为北京市朝阳区大屯路,中国科学院微生物研究所。本发明还提供了假单胞菌菌株②-29在防治番茄青枯病的应用。本发明针对目前番茄青枯病缺少有效的化学药剂,加之青枯菌对化学农药易产生抗药性的问题,通过对番茄青枯病拮抗菌分离筛选及其防效试验,分离筛选出对番茄青枯病有拮抗作用的菌株,在此基础上可以进行进一步的田间试验,借以开发出一种成熟的微生物有机肥,对减少大量化肥、农药的使用,减轻农业面源污染具有重要的作用。

    用内源安全标记表达胃毒杀虫蛋白的转基因生防工程真菌及其构建方法

    公开(公告)号:CN105754882A

    公开(公告)日:2016-07-13

    申请号:CN201610010548.3

    申请日:2016-01-08

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了用内源安全标记表达胃毒杀虫蛋白的转基因生防工程真菌及其构建方法。本发明是将杀虫蛋白Vip3Aa1的编码基因置于内源强启动子之下,构建带有该杀虫蛋白基因的表达载体。利用球孢白僵菌内源ura3营养缺陷型作为安全标记,将其携带上述表达载体的感受态芽生孢子转入球孢白僵菌野生菌株中,获得高表达杀虫蛋白Vip3Aa1的重组工程菌株。本发明公布的无外源抗性标记表达胃毒杀虫蛋白Vip3Aa1的转基因生防工程真菌为BbHUV5,具有球孢白僵菌天生缺乏的胃毒杀虫活性,整体杀虫效果大幅提高,而且不携带任何外源除草剂抗性基因标记的环境风险隐患。本发明采用的工程菌株构建思路及其工程菌株为开发增效且环境相容度高的转基因真菌杀虫剂开辟了新的技术途径。

    一种能使CTAB法提取到真菌高质量基因组DNA的方法

    公开(公告)号:CN105255860A

    公开(公告)日:2016-01-20

    申请号:CN201510815533.X

    申请日:2015-11-23

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 童森淼 冯明光

    Abstract: 一种能使CTAB法提取到真菌高质量基因组DNA的方法,属于分子生物技术领域。CTAB法提取DNA的接种选用含菌种的细沙直接接种、和/或用孢子悬液接种后再添加细沙培养、和/或培养的菌丝在提取DNA磨样时添加细沙磨样,至菌丝最终呈现丝滑状超细粉末)时止。上述一种能使CTAB法提取到真菌高质量基因组DNA的方法,可以显著提高提取的DNA的含量,并且对DNA的品质及得率都有显著提高;且该方法操作方便、实验稳定性强、可重复性高、准确快捷,在满足DNA提取质量的同时,又可在磨样环节大大节省劳动强度,即使大量提取DNA样品时一样有较高的磨样速度,极大的缩短了磨样时间与人磨样的疲劳度及提取失败的概率。

    一种真菌Cu/Zn-SOD的免分子伴侣的原核表达方法

    公开(公告)号:CN101603048B

    公开(公告)日:2013-08-07

    申请号:CN200910100616.5

    申请日:2009-07-13

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 谢雪钦 冯明光

    Abstract: 本发明提供了一种真菌Cu/Zn-SOD的免分子伴侣的原核表达方法,它包括以下步骤:BbSod1基因的克隆;酿酒酵母Lys7基因的克隆;原核表达载体pET-BbSod1、pET-BbSod1-Lys7及pET-BbSod1-Mut的构建;重组质粒的扩增及蛋白表达及蛋白纯化。本发明巧妙地利用基因融合及定点突变技术,实现了BbSod1在技术体系成熟的原核表达体系中的高效表达。尤其所表达的BbSod1定点突变体BbSod1-Mut,工程菌株粗提物的SOD酶活相当于带分子伴侣的融合酶BbSod1-Lys7的2.8倍和无分子伴侣BbSod1的21.2倍;纯化BbSod1-Mut的SOD酶活相当于BbSod1-Lys7S的5.3倍。本发明有效克服了真核生物Cu/Zn-SOD对专一性分子伴侣CCS的普遍依赖性,为解决工业上从动植物中提取SOD的原料限制问题提供了基于原核工程菌株的新技术,具有重要的工业应用前景。

    金龟子绿僵菌杀螨制剂
    7.
    发明授权

    公开(公告)号:CN101338279B

    公开(公告)日:2011-03-16

    申请号:CN200810061575.9

    申请日:2008-05-07

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 施卫兵 冯明光

    Abstract: 本发明公开了一种能有效控制植食性害螨、减少化学农药使用、提高农产品安全性的高效丝孢类真菌杀螨制剂。本发明的金龟子绿僵菌ZJUIM24-562菌株(Metarhizium anisopliae)和球孢白僵菌ZJUIM17-340菌株(Beauveria bassiana)于2008.2.25保藏,保藏编号分别为CGMCC No.2375和CGMCC No.2374。所述的制剂由丝孢类真菌分生孢子、矿物油、乳化剂、紫外保护剂和稳定剂成分组成。室内外试验结果表明,本发明的丝孢类真菌杀螨制剂对各类植食性害螨均具有十分理想的杀灭活性和田间防治效果。因此,本发明将填补国内真菌杀螨剂研究知识和技术上的空白。

    一种制备降低食物过敏原反应的融合蛋白的方法

    公开(公告)号:CN101899460A

    公开(公告)日:2010-12-01

    申请号:CN201010113940.3

    申请日:2010-02-24

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明提供了一种制备降低食物过敏原反应的融合蛋白的方法,它包括以下步骤:硫氧还蛋白体系中硫氧还蛋白基因Trx和硫氧还蛋白还原酶基因TrxR的获得,设计融和肽序列,利用融合肽序列将基因Trx和TrxR融合,然后获得含有融合基因的重组菌株,最后进行异源表达纯化。本发明将在工业中具有广泛应用意义的AnTrx体系的两个蛋白的基因克隆,并将二者的基因进行融合改良,通过和食品中蛋白的孵育以还原食品蛋白中的二硫键,从而降低其过敏原反应。同时,通过基因融合的改良使得An-TrxR和An-Trx在作为一种食品添加剂时,在食品工业应用上得到简便。

    具高肠毒杀虫活性的转基因生防真菌及其构建法和用途

    公开(公告)号:CN102154127A

    公开(公告)日:2011-08-17

    申请号:CN201110005779.2

    申请日:2011-01-12

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种具高肠毒杀虫活性的转基因生防真菌,菌株BbHV8的保藏名称为:球孢白僵菌Beauveriabassiana;保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心;保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所;保藏日期:2010年12月8日,保藏编号:CGMCCNo.4438。本发明还同时公开了上述具高肠毒杀虫活性的转基因生防真菌的构建方法。本发明也同时公开了上述具高肠毒杀虫活性的转基因生防真菌的用途:用于肠毒杀虫。

    一种高纯度孢子粉生产工艺及所用的立式多层产孢箱

    公开(公告)号:CN100384979C

    公开(公告)日:2008-04-30

    申请号:CN200510050499.8

    申请日:2005-06-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种立式多层产孢箱,包括透明的箱体(1),箱体(1)设有可开启的箱门(7);在箱体(1)的内腔设有至少二个物料盘(4),箱体(1)上还分别设有贯通箱体(1)的至少一个进湿孔(2)和至少一个散湿孔(5)。本发明还公开了使用上述立式多层产孢箱的一种高纯度孢子粉生产工艺,包括液相发酵、制作发酵基质、制作接种物料、二阶段式发酵产孢、风干处理步骤。本发明的立式多层产孢箱,结构简单;本发明的高纯度孢子粉生产工艺,工艺流程简单、能杜绝杂菌污染、不污染环境、能高效益生产高纯度的孢子粉。

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