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公开(公告)号：CN114934065A
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN202210235112.X
申请日：2022-03-10
申请人： 浙江理工大学绍兴生物医药研究院有限公司 , 浙江理工大学
IPC分类号： C12N15/85 , C12N15/66 , C12N15/64 , C12N15/62 , C12N7/01 , A61K35/761 , A61K39/395 , A61P35/00 , C12R1/93
摘要： 本发明公开的是携带免疫检查点分子TIM‑3抗体基因的溶瘤腺病毒构建方法和应用，先制备携带α‑TIM‑3基因的pCA13‑α‑TIM‑3质粒；将pCA13‑α‑TIM‑3质粒用BglⅡ酶切得到表达框，表达框与pGD55质粒连接得到pGD55‑α‑TIM‑3质粒；将pGD55‑α‑TIM‑3质粒转化到含有缺失E3区的腺病毒骨架质粒Adeasy‑1大肠杆菌BJ5183中重组，转入感受态细胞，产生GP73启动子代替内源E1A启动子，调控E1A表达及缺失E1B 55kDa和E3区、携带α‑TIM‑3基因的重组腺病毒基因组载体pAd‑GD55‑α‑TIM‑3；pAd‑GD55‑α‑TIM‑3转染到293A细胞中，待细胞出现病变后得到溶瘤腺病毒，构建的溶瘤腺病毒能够选择性的杀死肿瘤细胞而基本不影响正常细胞，并且在体内能有效抑制肝癌移植瘤的生长，为治疗癌症提供了一个免疫检查点抗体‑溶瘤病毒药物的基础。
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公开(公告)号：CN115287299B
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202111634323.2
申请日：2021-12-29
申请人： 浙江理工大学 , 浙江理工大学绍兴生物医药研究院有限公司
IPC分类号： C12N15/85 , C12N15/66 , C12N15/24 , C12N15/19 , C12N15/62 , C12N7/01 , A61K35/768 , A61K38/20 , A61K38/19 , A61P35/00 , C12R1/93
摘要： 本发明公开的是本发明提供了一种重组溶瘤痘苗病毒的构建方法及其应用，首先在分子水平以pCB质粒为载体，通过酶切连接的方法将IL‑7基因、CCL19基因和IL‑7‑F2A‑CCL19基因连接到载体质粒上，然后将重组质粒与野生痘苗病毒在293A细胞内同源重组转染得到表达IL‑7和CCL19的重组溶瘤痘苗病毒药物，在细胞水平上增强了痘苗病毒对肿瘤细胞的杀伤作用，IL‑7和CCL19的表达一定程度上引起了细胞水平一些炎症因子的表达升高，在细胞水平显示出对抗肿瘤免疫的诱导作用。
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公开(公告)号：CN115287299A
公开(公告)日：2022-11-04
申请号：CN202111634323.2
申请日：2021-12-29
申请人： 浙江理工大学 , 浙江理工大学绍兴生物医药研究院有限公司
IPC分类号： C12N15/85 , C12N15/66 , C12N15/24 , C12N15/19 , C12N15/62 , C12N7/01 , A61K35/768 , A61K38/20 , A61K38/19 , A61P35/00 , C12R1/93
摘要： 本发明公开的是本发明提供了一种重组溶瘤痘苗病毒的构建方法及其应用，首先在分子水平以pCB质粒为载体，通过酶切连接的方法将IL‑7基因、CCL19基因和IL‑7‑F2A‑CCL19基因连接到载体质粒上，然后将重组质粒与野生痘苗病毒在293A细胞内同源重组转染得到表达IL‑7和CCL19的重组溶瘤痘苗病毒药物，在细胞水平上增强了痘苗病毒对肿瘤细胞的杀伤作用，IL‑7和CCL19的表达一定程度上引起了细胞水平一些炎症因子的表达升高，在细胞水平显示出对抗肿瘤免疫的诱导作用。
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公开(公告)号：CN114410626A
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202111508792.X
申请日：2021-12-10
申请人： 浙江理工大学绍兴生物医药研究院有限公司 , 浙江理工大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/66
摘要： 本发明公开的是一种新型的消化道肿瘤特异性LGR5核心启动子及其筛选构建方法，启动子为p312/‑1786、p312/‑1188、p312/‑888、p312/‑688、p312/‑388、p312/‑188中任一种，用PCR方法，以DNA基因组为模板，使用LGR5启动子特异性引物，得到PCR产物为LGR5启动子全长序列p312/‑1786，用Nhe I和Hind III双酶切，并且与pGL3‑Basic质粒连接，得到pGL3‑p312/‑1786质粒；以pGL3‑p312/‑1786为模板，用携带Nhe I和Hind III酶切位点的不同的引物，经PCR获得含有不同LGR5启动子片段长度的质粒，并与pGL3‑Basic质粒连接，分别得到对应的质粒，具有高效的消化道肿瘤特异性，易于掌握、提高了腺病毒载体的靶向性和安全性。
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公开(公告)号：CN116115734A
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202211544412.2
申请日：2022-12-04
申请人： 浙江理工大学 , 浙江理工大学绍兴生物医药研究院有限公司
IPC分类号： A61K38/17 , A61K48/00 , A61K31/704 , A61K35/768 , A61P35/00
摘要： 本发明属于癌症治疗技术领域，具体涉及GSDME基因的编码蛋白在制备治疗结肠癌药物中的应用。本发明要解决的技术问题是为结肠癌的治疗提供一种新选择。本发明的技术方案是GSDME基因的编码蛋白在制备治疗结肠癌药物中的应用。本发明还提供了一种治疗结肠癌的药物，其主要活性成分为GSDME基因的编码蛋白。本发明利用溶瘤痘苗病毒介导GSDME基因在结肠癌细胞中特异性表达，从而发挥溶瘤效应和肿瘤细胞焦亡，增强抗肿瘤免疫，为靶向抗结肠癌治疗提供新型治疗策略。
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公开(公告)号：CN115651932A
公开(公告)日：2023-01-31
申请号：CN202111508787.9
申请日：2021-12-10
申请人： 浙江理工大学 , 浙江理工大学绍兴生物医药研究院有限公司
摘要： 本发明公开的是一种靶向消化道肿瘤双靶向溶瘤腺病毒的构建方法及其应用，先得到LGR5核心启动子，双酶切后替换掉pXC2上E1A的野生型启动子，得到pXC2‑LGR5；再双酶切得到LGR5‑E1A片断后与pSD55相连，得到pSD55‑LGR5；需携带基因时，先获取目的基因，连接到pCA13载体上得到pCA13‑gene，酶切得到基因表达框，连接到pSD55‑LGR5载体上，得到pSD55‑LGR5‑gene质粒；再线性化转化到含有全序列腺病毒骨架DNA的质粒Adeasy‑1大肠杆菌BJ5183中重组，产生携带目的基因的腺病毒骨架DNA质粒载体；酶切线性化后，转染到细胞中进行病毒包装，待细胞出现病变后，得到目的溶瘤腺病毒LGR5‑D55‑gene，涉及载体在消化道肿瘤药物中的应用，能够提高消化道肿瘤基因治疗的靶向性，更安全，能有效地抑制肿瘤生长，为治疗癌症提供了新方向。
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