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公开(公告)号：CN106399303A
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201610845794.0
申请日：2016-09-23
申请人： 浙江省检验检疫科学技术研究院 , 浙江工商大学
CPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12Q2563/107
摘要： 本发明涉及猪粪便污染物检测领域，尤其涉及一种基于宿主-肠道微生物互作基因的猪粪便污染特异性分子标记1-38及其检测方法。本发明采用竞争性杂交基因片段富集方法（GFE）富集猪特异性宏基因组，构建宏基因文库，对文库进行序列菌群及功能分类，从而靶向筛选了宿主猪）-肠道微生物互作靶点有关特异性基因，并针对猪特异性互作基因设计分子标记，建立了灵敏度高、特异性强并能高效指示粪便污染源的监测方法。
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公开(公告)号：CN106381295B
公开(公告)日：2019-08-27
申请号：CN201610847949.4
申请日：2016-09-23
申请人： 浙江省检验检疫科学技术研究院 , 浙江工商大学
摘要： 本发明涉及猪粪便污染物检测领域，尤其涉及一种基于宿主‑肠道微生物互作基因的猪粪便污染特异性分子标记3‑53及其检测方法。本发明采用竞争性杂交基因片段富集方法（GFE）富集猪特异性宏基因组，构建宏基因文库，对文库进行序列菌群及功能分类，从而靶向筛选了宿主（猪）‑肠道微生物互作靶点有关特异性基因，并针对猪特异性互作基因设计分子标记，建立了灵敏度高、特异性强并能高效指示粪便污染源的监测方法。
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公开(公告)号：CN106399303B
公开(公告)日：2019-02-05
申请号：CN201610845794.0
申请日：2016-09-23
申请人： 浙江省检验检疫科学技术研究院 , 浙江工商大学
摘要： 本发明涉及猪粪便污染物检测领域，尤其涉及一种基于宿主‑肠道微生物互作基因的猪粪便污染特异性分子标记1‑38及其检测方法。本发明采用竞争性杂交基因片段富集方法（GFE）富集猪特异性宏基因组，构建宏基因文库，对文库进行序列菌群及功能分类，从而靶向筛选了宿主（猪）‑肠道微生物互作靶点有关特异性基因，并针对猪特异性互作基因设计分子标记，建立了灵敏度高、特异性强并能高效指示粪便污染源的监测方法。
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公开(公告)号：CN106381295A
公开(公告)日：2017-02-08
申请号：CN201610847949.4
申请日：2016-09-23
申请人： 浙江省检验检疫科学技术研究院 , 浙江工商大学
摘要： 本发明涉及猪粪便污染物检测领域，尤其涉及一种基于宿主-肠道微生物互作基因的猪粪便污染特异性分子标记3-53及其检测方法。本发明采用竞争性杂交基因片段富集方法（GFE）富集猪特异性宏基因组，构建宏基因文库，对文库进行序列菌群及功能分类，从而靶向筛选了宿主猪）-肠道微生物互作靶点有关特异性基因，并针对猪特异性互作基因设计分子标记，建立了灵敏度高、特异性强并能高效指示粪便污染源的监测方法。
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公开(公告)号：CN116790813A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310715432.X
申请日：2023-06-16
申请人： 中国计量大学 , 浙江省检验检疫科学技术研究院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/6804 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了检测三种猪病毒性腹泻病原的引物组，试剂盒及方法，建立了基于侧流层析试纸条的多重环介导等温扩增技术，能够同时检测PEDV、PoRV和PBoV。通过针对高度保守的PEDV gp6基因、PoRVvp6基因和PBoV vp1基因设计特异性LAMP引物，并分别在三对环引物的5’端标记不同的荧光基团以区分扩增子，最后结合侧流层析试纸条技术，达到多重检测的目的。通过与PCR检测结果进行比较，说明三重LAMP‑LFD检测体系可以满足临床样本检测的需求，检测结果可靠有效。
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公开(公告)号：CN112266969A
公开(公告)日：2021-01-26
申请号：CN202011237896.7
申请日：2020-11-09
申请人： 浙江省检验检疫科学技术研究院 , 江苏奇天基因生物科技有限公司
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/10 , C12N15/11 , C12R1/22
摘要： 本申请属于分子生物学技术领域，具体涉及一种肺炎克雷伯菌基因高度保守序列及其检测引物探针和试剂盒。一种检测肺炎克雷伯菌（Enterobacter sakazakii）用的靶点基因，该靶点基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本申请基于肺炎克雷伯菌基因高度保守序列设计的引物探针适用于RAA荧光法检测，并且能够准确地检测出肺炎克雷伯菌，特异性达100%。本申请还提供了一种基于RAA荧光法检测肺炎克雷伯菌的试剂盒，所述试剂盒能够方便准确地鉴定肺炎克雷伯菌的存在，20min内即可完成，在30~42℃下进行等温扩增即可完成检测。
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公开(公告)号：CN105950785B
公开(公告)日：2020-01-14
申请号：CN201610344410.7
申请日：2016-05-20
申请人： 浙江省检验检疫科学技术研究院
摘要： 本发明涉及生物病毒检测领域，尤其涉及一种针对禽流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管炎病毒的三重荧光RT‑PCR检测试剂盒及引物、探针。本发明涉及禽流感病毒、鸡新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒特异性引物和探针。基于具有高度特异性的禽流感病毒M基因序列、新城疫病毒基因M基因、传染性支气管炎病毒M基因分别设计各自的引物和探针，并在3个探针上标记了不同的荧光信号，在优化了PCR反应体系的条件下，实现三重荧光定量PCR同步检测禽流感病毒、鸡新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒。可提高早期检出率，有效防止疾病的传播，减少经济损失。
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公开(公告)号：CN106367424B
公开(公告)日：2019-07-26
申请号：CN201610846128.9
申请日：2016-09-23
申请人： 浙江省检验检疫科学技术研究院
摘要： 本发明涉及猪粪便污染物检测领域，尤其涉及一种指示猪粪便污染的猪‑肠道微生物特异性互作基因3‑53及其应用。一种指示猪粪便污染的猪‑肠道微生物特异性互作基因3‑53，该基因的序列如SEQ ID NO：2所示。本发明采用竞争性杂交基因片段富集方法（GFE）富集猪特异性宏基因组，构建宏基因文库，对文库进行序列菌群及功能分类，从而靶向筛选了宿主（猪）‑肠道微生物互作靶点有关特异性基因，并针对猪特异性互作基因设计分子标记，建立了灵敏度高、特异性强并能高效指示粪便污染源的监测方法。
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公开(公告)号：CN102586465A
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN201210078871.6
申请日：2012-03-23
申请人： 浙江省检验检疫科学技术研究院
CPC分类号： Y02A50/451
摘要： 本发明涉及应用PNA-FISH法鉴定弧菌属的方法，尤其涉及用于鉴定重要致病性弧菌（Vibrio）的方法和PNA探针。肽核酸原位荧光杂交技术检测弧菌用PNA探针，PNA探针的序列为TACCCCCCTCTACAG。本发明的PNA具有与DNA和RNA特异性结合的高稳定性、杂交快速性、及其良好的细胞穿透性，使本发明的检测方法具有快速，准确、灵敏的特性。同时结合原位荧光杂交技术使检测具有分子生物学和形态学的双重保证，更加提高了鉴定的准确率。
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公开(公告)号：CN102358908A
公开(公告)日：2012-02-22
申请号：CN201110333423.1
申请日：2011-10-28
申请人： 浙江省检验检疫科学技术研究院
摘要： 本发明涉及用于鉴定单核细胞增多性李斯特菌（Listeriamonocytogenes）的PNA探针的设计，及应用PNA-FISH法鉴定单核细胞增多性李斯特菌的方法。 单核细胞增多性李斯特菌的肽核酸原位荧光鉴定用PNA探针，其特征在于：该PNA探针的DNA序列如SEQ ID NO：1所示。本发明并将探针N端标记荧光素，与荧光原位杂交技术结合用于检测。同时建立了固相荧光原位杂交检测方法，并优化了杂交条件。PNA-FISH法具有快速特点，一般整个鉴定过程耗时不超过4个小时；PNA-FISH法的结果判断基于荧光检测和形态检测两部分，较PCR法等假阳性低，且PNA-FISH法可省去繁琐DNA提取的步骤。
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