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公开(公告)号:CN112266969A
公开(公告)日:2021-01-26
申请号:CN202011237896.7
申请日:2020-11-09
申请人: 浙江省检验检疫科学技术研究院 , 江苏奇天基因生物科技有限公司
IPC分类号: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/10 , C12N15/11 , C12R1/22
摘要: 本申请属于分子生物学技术领域,具体涉及一种肺炎克雷伯菌基因高度保守序列及其检测引物探针和试剂盒。一种检测肺炎克雷伯菌(Enterobacter sakazakii)用的靶点基因,该靶点基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本申请基于肺炎克雷伯菌基因高度保守序列设计的引物探针适用于RAA荧光法检测,并且能够准确地检测出肺炎克雷伯菌,特异性达100%。本申请还提供了一种基于RAA荧光法检测肺炎克雷伯菌的试剂盒,所述试剂盒能够方便准确地鉴定肺炎克雷伯菌的存在,20min内即可完成,在30~42℃下进行等温扩增即可完成检测。
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公开(公告)号:CN106480197A
公开(公告)日:2017-03-08
申请号:CN201610931277.5
申请日:2016-10-31
申请人: 浙江省检验检疫科学技术研究院
CPC分类号: C12Q1/6841 , C12Q1/689 , C12Q2525/107 , C12Q2563/107
摘要: 本 发 明 涉 及 金 黄 色 葡 萄 球 菌Staphylococcus aureus)的鉴定方法,尤其涉及应用PNA-FISH法鉴定金黄色葡萄球菌的方法及试剂盒和PNA探针。一种金黄色葡萄球菌的肽核酸原位荧光杂交鉴定PNA探针,该PNA探针的核苷酸序列如下:GGATCCGCGCTGCAT T-FAM。本发明PNA探针与荧光原位杂交技术结合用于检测。同时建立了固相荧光原位杂交检测方法,并优化了杂交条件。PNA-FISH法具有快速特点,一般整个鉴定过程耗时不超过4个小时;PNA-FISH法的结果判断基于荧光检测和形态检测两部分,较PCR法等假阳性低,且PNA-FISH法可省去繁琐DNA提取的步骤。
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公开(公告)号:CN104342493A
公开(公告)日:2015-02-11
申请号:CN201410537112.0
申请日:2014-10-13
申请人: 浙江省检验检疫科学技术研究院
CPC分类号: C12Q1/6841 , C12Q2525/107 , C12Q2525/301 , C12Q2563/107 , C12Q2565/1015
摘要: 本发明涉及生物检测领域,尤其涉及一种鉴定单核细胞增多性李斯特菌(Listeriamonocytogenes)的方法。单核细胞增多性李斯特菌的肽核酸分子信标标记和荧光扫描检测方法,该方法包括以下步骤:1)PNA分子信标的设计;2)液相PNA分子信标的原位杂交;3)荧光扫描;4)荧光扫描结果的判断。本发明PNA具有良好的细胞穿透性,与DNA和RNA特异性结合的高稳定性,使本发明的检测方法具有准确、灵敏的特点。同时将PNA探针结合分子信标标记和荧光扫描技术,在大幅降低假阳性、克服假阴性的情况下大幅提高检测效率,最后用显微镜对阳性样品进行确证,使检测具有分子生物学和形态学的双重保证,更加提高了鉴定的准确率。
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公开(公告)号:CN102586466B
公开(公告)日:2014-02-26
申请号:CN201210079061.2
申请日:2012-03-23
申请人: 浙江省检验检疫科学技术研究院
CPC分类号: Y02A50/451
摘要: 本发明涉及PNA-FISH法鉴定沙门氏菌属的方法,尤其涉及用于鉴定主要食源致病性沙门氏菌(Salmonella)的方法和PNA探针。肽核酸原位荧光杂交技术检测沙门氏菌用PNA探针Sal-invA-1,所述的PNA探针的序列为TCTGGATGGTATGCC。本发明的PNA具有与DNA和RNA特异性结合的高稳定性、杂交快速性、及其良好的细胞穿透性,使本发明的检测方法具有快速,准确、灵敏的特性。同时结合原位荧光杂交技术使检测具有分子生物学和形态学的双重保证,更加提高了鉴定的准确率。
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公开(公告)号:CN116563846A
公开(公告)日:2023-08-08
申请号:CN202310454437.1
申请日:2023-04-25
申请人: 浙江省检验检疫科学技术研究院 , 小孚科技(杭州)有限公司
IPC分类号: G06V20/69 , G06V10/56 , G06V10/44 , G06V10/778 , G06V10/74
摘要: 本发明涉及农产品真菌毒素检测技术领域,尤其涉及一种基于图像轮廓时序化智能处理的产毒真菌精准识别方法和程序产品。该方法包括如下步骤:1)显微照片预处理;2)提取真菌颜色特征并将显微照片转化为灰度图;3)提取真菌边缘线;4)将真菌照片边缘线转化成时序数据;5)对真菌照片边缘线时序数据进行shapelet集中学习,获取Shapelet边缘线特征集合;6)对待识别的真菌显微照片样本,通过边缘线提取、时序化,计算出与步骤5)中Shapelet边缘线特征集合的相似性矩阵;7)根据上述相似性矩阵,结合真菌特征知识库的二次校对,得到真菌显微照片的智能识别与分类。具有达到快速、精准、高效的目标。
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公开(公告)号:CN113791145A
公开(公告)日:2021-12-14
申请号:CN202110989011.7
申请日:2021-08-26
申请人: 浙江省检验检疫科学技术研究院
摘要: 本发明属于分析化学技术领域,尤其涉及一种克伦特罗的高效检测方法。基于超高效合相色谱技术的克伦特罗对映体拆分和测定方法,克伦特罗对映体为(+)‑克伦特罗对映体和(‑)‑克伦特罗对映体,该方法的分析条件如下:采用Acquity Trefoil AMY1手性色谱柱,CO2‑0.5%(v/v)醋酸铵甲醇溶液为流动相,梯度洗脱,流速为2.0 mL/min,检测波长241 nm,进样体积10µL,柱温40℃,系统背压为13.8MPa。该方法具有分析速度快、分离效果好、有机溶剂消耗少等特点,可为进一步研究克伦特罗的药理和开发副作用更小的新药有重要的意义。
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公开(公告)号:CN105349540A
公开(公告)日:2016-02-24
申请号:CN201510882721.4
申请日:2015-12-03
申请人: 浙江省检验检疫科学技术研究院
摘要: 本发明涉及一种用于检测鱼类小清蛋白的荧光定量PCR方法及引物对,属于食品安全检测技术领域,所述PCR方法包括以下步骤:一、设计特异性扩增引物对;二、提取样品DNA;三、通过扩增曲线和溶解曲线判断样品是否含有小清蛋白基因;本发明还涉及一种引物对,该引物对具体为:鱼类小清蛋白引物的碱基序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。与现有技术相比,本发明利用生物信息学和比较基因组学,筛选到鱼小清蛋白的共有基因序列,并以此序列设计特异性扩增引物对,本发明的引物对待测样本进行荧光定量PCR检测,可快速、灵敏、特异地检测食品中不同鱼种及制品中的过敏原成份—小清蛋白。
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公开(公告)号:CN105039602A
公开(公告)日:2015-11-11
申请号:CN201510535298.0
申请日:2015-08-27
申请人: 浙江省检验检疫科学技术研究院
CPC分类号: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12Q2527/107 , C12Q2563/107
摘要: 本发明公开了一种一步法高分辨率溶解曲线分型鉴定戊型肝炎病毒的方法。快速准确的基因分型有助于HEV感染毒株的分子流行特征调查和污染源溯源,从而对污染源进行跟踪与监控。本发明采用的步骤如下:1)设计一对外侧引物和一对内侧引物,外侧引物Tm的值低于内侧引物的Tm值;所述的两对引物在套式PCR反应中对样本中的不同基因型HEV毒株均能扩增;同时,不同种基因型的扩增产物之间存在一个或多个固定的碱基突变位点,以获得不同的高分辨率溶解曲线峰型,满足HRM对于HEV基因型的鉴定分析;2)HRM一步法分型鉴定。本发明大大提高了监测效率,降低了使用成本。
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公开(公告)号:CN102586466A
公开(公告)日:2012-07-18
申请号:CN201210079061.2
申请日:2012-03-23
申请人: 浙江省检验检疫科学技术研究院
CPC分类号: Y02A50/451
摘要: 本发明涉及PNA-FISH法鉴定沙门氏菌属的方法,尤其涉及用于鉴定主要食源致病性沙门氏菌(Salmonella)的方法和PNA探针。肽核酸原位荧光杂交技术检测沙门氏菌用PNA探针Sal-invA-1,所述的PNA探针的序列为TCTGGATGGTATGCC。本发明的PNA具有与DNA和RNA特异性结合的高稳定性、杂交快速性、及其良好的细胞穿透性,使本发明的检测方法具有快速,准确、灵敏的特性。同时结合原位荧光杂交技术使检测具有分子生物学和形态学的双重保证,更加提高了鉴定的准确率。
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公开(公告)号:CN109762914B
公开(公告)日:2022-03-22
申请号:CN201910078263.7
申请日:2019-01-28
申请人: 浙江省检验检疫科学技术研究院 , 西北农林科技大学
摘要: 本发明涉及的是食品安全检测技术领域,尤其涉及沙门氏菌食源性致病菌的HRM血清分型方法、靶点基因、特异性扩增引物和试剂盒。沙门氏菌食源性致病菌的HRM血清分型方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:步骤一,根据沙门氏菌的ykgD基因序列,ykgD基因序列如SEQ 1所示,在其突变区的两端设计特异性扩增引物对;步骤二,提取样品DNA,利用步骤一所得特异性扩增引物对采用HRM法进行扩增;步骤三,通过荧光曲线判断样品中是否含有沙门氏菌;上述的方法不涉及疾病的治疗和诊断方法。采用本发明的分型方法对沙门氏菌菌株进行血清分型时,检测速度快,结果准确可靠,操作简单,检测成本低。
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