一种紫点海葵酶解多肽的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN112458138A

    公开(公告)日:2021-03-09

    申请号:CN202011374405.3

    申请日:2020-11-30

    申请人: 海南医学院

    摘要: 本发明提供一种紫点海葵酶解多肽的制备方法及其应用,其制备方法包括以下步骤:S1、预处理:收集紫点海葵,洗净后剪碎,超声破碎至溶液浑浊,置于有机溶剂浸泡去脂,冲洗、沥干,得到紫点海葵样品;S2、海葵总蛋白的提取:取步骤S1的紫点海葵样品,加入混合后的RIPA裂解液与PMSF蛋白酶抑制剂,静置20‑40min后超声破碎至溶液浑浊;低温离心,收集上清液得到粗品,真空冷冻干燥,制得海葵蛋白冻干粉;S3、酶解:取步骤S2的海葵蛋白冻干粉用纯水溶解,加入碱性蛋白酶,进行酶解酶解后煮沸灭活,得到酶解产物经超滤管离心,收集滤液,冷冻干燥,制得紫点海葵多肽。本发明制得紫点海葵多肽具有高效抗肿瘤活性。

    一种紫点海葵多肽毒素Hc-GQ及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN114262370B

    公开(公告)日:2023-07-14

    申请号:CN202111540613.0

    申请日:2021-12-16

    申请人: 海南医学院

    摘要: 本发明公开了一种紫点海葵多肽毒素Hc‑GQ及其制备方法和应用,通过采用多肽固相合成法(SPPS)合成了线性肽Hc‑GQ,对线性肽进行HPLC纯化,然后利用空气氧化法对合成的线性肽进行一步法氧化折叠,经二硫键定向氧化后获得含3个二硫键的氧化肽Hc‑GQ(二硫键方式C1‑C6,C2‑C5,C3‑C4),并对氧化折叠终产物进行HPLC纯化和质谱鉴定,得到紫点海葵多肽毒素Hc‑GQ,即氧化肽Hc‑GQ。本发明将合成的氧化肽Hc‑GQ以昆虫注射法测试对黄粉虫杀虫作用,可为研发新型、高效、安全生物杀虫剂奠定基础。

    一种海葵多肽毒素Ap-GT及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN113735953B

    公开(公告)日:2023-04-14

    申请号:CN202110763780.5

    申请日:2021-07-06

    申请人: 海南医学院

    摘要: 本发明提供一种海葵多肽毒素Ap‑GT及其制备方法和应用,本发明合成海葵多肽毒素Ap‑GT,对黄粉虫具有更加显著杀虫作用,半数致死剂量为14.8nM。本发明合成特定序列的海葵多肽毒素Ap‑GT,在应用中不但能够有效控制其添加量,而且最大发挥其功效,减少药剂用量,最大化提高安全性。本发明获得高效杀虫效果而对哺乳动物毒性小的海洋多肽,可为研发新型、高效、安全生物杀虫剂奠定基础。

    海葵多肽Ap-TxⅠ及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN112724220A

    公开(公告)日:2021-04-30

    申请号:CN202110048423.0

    申请日:2021-01-14

    申请人: 海南医学院

    摘要: 本发明提供海葵多肽Ap‑TxⅠ及其制备方法与应用。本发明利用高通量转录组学从套膜海葵(Aiptasia pallida)中发现海葵多肽Ap‑TxⅠ,其序列为SGACAEICVHRCIPSCNFACCVAR,形成3个二硫键。采用多肽固相合成法(SPPS)合成线性肽Ap‑TxⅠ,经二硫键定向氧化法获得后含3个二硫键的氧化肽Ap‑TxⅠ(二硫键方式C1‑C6,C2‑C5,C3‑C4),再采用高效液相色谱纯化。本发明合成的多肽Ap‑TxⅠ具有高效杀虫效果,且对哺乳动物毒性小,可为研发新型、高效、安全生物杀虫剂奠定良好基础。

    一种紫点海葵多肽毒素的制备方法及其抗肿瘤应用

    公开(公告)号:CN113683671B

    公开(公告)日:2023-08-25

    申请号:CN202110605437.8

    申请日:2021-05-31

    申请人: 海南医学院

    摘要: 本发明提供一种紫点海葵多肽毒素的制备方法及其应用,其制备方法包括以下步骤:1、海葵粗毒液的提取:活海葵经过饥饿期后,使用手动挤压法或/和电刺激法提取含有海葵粗毒的水溶液,将含有海葵粗毒的水溶液进行冷冻干燥,使用生物CE膜透析袋透析脱盐;2、海葵粗毒分子滤过:将提取得到的海葵粗毒液,使用超滤管进行离心,得到滤过组分;3、海葵毒素的纯化:将步骤2得到的滤过组分经微孔滤膜过滤,通过反相高效液相色谱仪梯度洗脱得到F1‑F3组分,收集F1组分进行冷冻干燥,得到纯化后的紫点海葵多肽毒素。本发明制得紫点海葵多肽毒素不仅可以抑制结肠癌细胞HCT‑116活性而且能够促进结肠癌细胞HCT‑116的凋亡。

    一种紫点海葵酶解多肽的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN112458138B

    公开(公告)日:2023-05-05

    申请号:CN202011374405.3

    申请日:2020-11-30

    申请人: 海南医学院

    摘要: 本发明提供一种紫点海葵酶解多肽的制备方法及其应用,其制备方法包括以下步骤:S1、预处理:收集紫点海葵,洗净后剪碎,超声破碎至溶液浑浊,置于有机溶剂浸泡去脂,冲洗、沥干,得到紫点海葵样品;S2、海葵总蛋白的提取:取步骤S1的紫点海葵样品,加入混合后的RIPA裂解液与PMSF蛋白酶抑制剂,静置20‑40min后超声破碎至溶液浑浊;低温离心,收集上清液得到粗品,真空冷冻干燥,制得海葵蛋白冻干粉;S3、酶解:取步骤S2的海葵蛋白冻干粉用纯水溶解,加入碱性蛋白酶,进行酶解酶解后煮沸灭活,得到酶解产物经超滤管离心,收集滤液,冷冻干燥,制得紫点海葵多肽。本发明制得紫点海葵多肽具有高效抗肿瘤活性。

    山蛭提取物在制备镇痛药物中的应用

    公开(公告)号:CN115177639A

    公开(公告)日:2022-10-14

    申请号:CN202210913245.8

    申请日:2022-08-01

    申请人: 海南医学院

    IPC分类号: A61K35/62 A61P29/00

    摘要: 本发明公开山蛭提取物在制备镇痛药物中的应用。本发明首次发现了在‑2~32℃条件下用水提取海南山蛭所得提取物对于动物物理性疼痛有良好的镇痛作用,明显提高痛阈值。小鼠给药105min后痛阈提高率达到150%左右。本发明山蛭提取物提取方法极为简便,操作简单,容易推广使用。本发明提取物给药剂量低,在0.25~1.0%质量浓度下即可达到良好的镇痛效果。