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公开(公告)号：CN117965508B
公开(公告)日：2024-12-03
申请号：CN202410088844.X
申请日：2024-01-23
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于分子生物学及蛋白质工程技术领域，具体涉及一种褐藻胶裂解酶突变体Pl7M及其应用。本发明以褐藻胶裂解酶Pl7AaM为出发模板，通过定点饱和突变和组合突变获得酶比活提升的突变体Pl7M。本发明获得的突变体Pl7M酶比活为658.9U/mg，是出发模板Pl7AaM的1.53倍。而且，本发明以枯草芽孢杆菌为宿主实现了突变体Pl7M高效表达，为突变体Pl7M的产业化应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN118325879A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202410756047.4
申请日：2024-06-13
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于分子生物学及蛋白质工程技术领域，具体设计一种褐藻胶裂解酶突变体PL31PtM及其应用。本发明通过密码子优化获得褐藻胶裂解酶基因序列PL31Pt，其核苷酸序列信息如SEQ ID NO.1所示，并将该序列用于重组褐藻胶裂解酶PL31Pt工程菌的构建过程，进一步以重组PL31Pt为模板，通过蛋白理性设计获得热稳定性提升的突变体PL31PtM，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；通过高密度发酵实现突变体PL31PtM高效制备。本发明获得的突变体PL31PtM可用于褐藻胶寡糖的制备过程，应用范围广泛。
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公开(公告)号：CN115948373A
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202211412004.1
申请日：2022-11-11
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于蛋白质理性设计及酶工程领域，具体涉及一种褐藻胶裂解酶突变体Pl7AaM及其应用。本发明以褐藻胶裂解酶Pl7Aa为出发模板，通过结合二硫键和自由能优化两种蛋白质理性设计策略，获得了热稳定性提升的褐藻胶裂解酶突变体Pl7AaM，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。将本发明获得的褐藻胶裂解酶突变体Pl7AaM在40℃和45℃的水浴处理1小时后，剩余酶活分别是Pl7Aa的2.2倍和8.2倍，具有良好的热稳定性。本发明获得的褐藻胶裂解酶突变体Pl7AaM可用于制备重组载体、重组菌株，以毕赤酵母为重组表达宿主，实现了Pl7AaM的高效表达，用于制备褐藻胶寡糖，进一步为其广泛应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN114736891B
公开(公告)日：2022-08-16
申请号：CN202210675775.3
申请日：2022-06-15
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于酶工程领域，具体涉及一种几丁质酶突变体ChiM‑SS及其应用。本发明提供的几丁质酶突变体ChiM‑SS是以几丁质酶ChiM为出发模板，通过理性设计二硫键突变体以及组合突变获得热稳定性提升的突变体ChiM‑SS，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明突变体ChiM‑SS在60℃、65℃和70℃热处理60分钟后的剩余酶活分别为59.6%、45.8%和33.2%，分别是出发模板ChiM的2.71倍，5.1倍和4.7倍。本发明通过结合基因拷贝数、分子伴侣共表达，以毕赤酵母为重组表达宿主，实现突变体ChiM‑SS的高效表达，可用于制备突变体ChiM‑SS，进一步为其广泛应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN114540330A
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202210419863.7
申请日：2022-04-21
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
IPC: C12N9/54 , C12N15/57 , C12N15/75 , C12N15/67 , C12N15/62 , C12N1/21 , C12P21/06 , A01N37/46 , A01P21/00 , C12R1/125
Abstract: 本发明属于酶工程及微生物工程领域，具体涉及一种碱性蛋白酶突变体AprBpM及其应用。首先，本发明以碱性蛋白酶AprBp为出发模板，通过增加二硫键和点突变获得突变体AprBpM，本发明获得的碱性蛋白酶突变体AprBpM在70℃热处理5分钟后的酶活保留率是AprBp的3.52倍；其次，通过优化启动子和信号肽实现突变体AprBpM在枯草芽孢杆菌高效表达，在高密度发酵培养条件下最高酶活达到65230U/mL；最后，通过突变体AprBpM水解废弃虾蟹壳制备多肽应用于农业种植领域。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113249360B
公开(公告)日：2021-10-01
申请号：CN202110762467.X
申请日：2021-07-06
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于酶工程领域，具体涉及一种酶比活提升的几丁质酶突变体ChiM及其应用。本发明提供的几丁质酶突变体ChiM是以几丁质酶ChiAm为出发模板，通过定点包含突变、组合突变获得酶比活提升的突变体ChiM，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的几丁质酶突变体ChiM酶比活为71U/mg，是ChiAm的1.48倍。本发明以毕赤酵母为重组表达宿主，实现了ChiM的高效表达，可用于制备突变体ChiM，为进一步为其广泛应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN113215136A
公开(公告)日：2021-08-06
申请号：CN202110762374.7
申请日：2021-07-06
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种壳聚糖酶突变体CsnT及其应用。本发明提供的壳聚糖酶突变体CsnT是以壳聚糖酶Csnbm为出发模板，通过增加二硫键获得突变体CsnT，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的壳聚糖酶突变体CsnT，在55℃、60℃以及65℃热处理30分钟后的酶活保留率分别为Csnbm的4.46倍、6.4倍和7.5倍，可用于制备重组载体、重组菌株。本发明获得的壳聚糖酶突变体CsnT具有良好的热稳定性，可用于壳寡糖制备领域，并进一步为其广泛应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN111996205A
公开(公告)日：2020-11-27
申请号：CN202010795529.2
申请日：2020-08-10
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种几丁质酶基因、几丁质酶及其制备方法和应用。本发明几丁质酶基因chiam的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其是通过对来源于地中海拟无枝菌酸菌Amycolatopsis mediterranei几丁质酶的序列进行综合优化得到。本发明几丁质酶ChiAm的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，其不仅丰富了几丁质酶的种类和来源途径，而且酶比活为48U/mg，在较宽的温度范围和较宽的pH范围内均表现出良好的稳定性，具有良好的应用前景和产业价值。
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公开(公告)号：CN111893126A
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN202010619034.4
申请日：2020-07-01
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种碱性蛋白酶基因、碱性蛋白酶及其制备方法和应用。本发明碱性蛋白酶基因aprbp的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其是通过对来源于芽孢杆菌Bacillus patagoniensis碱性蛋白酶的序列(GenBank:WP_078392427.1)进行综合优化得到。本发明碱性蛋白酶AprBp的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，其不仅丰富了碱性蛋白酶的种类和来源途径，且其自身具有较高的酶活性，在5L发酵罐中的最高酶活可达18035U/mL，同时，在较宽的温度范围和碱性条件下均表现出良好的稳定性，具有良好的应用前景和产业价值。
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公开(公告)号：CN111893125A
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN202010621314.9
申请日：2020-07-01
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种壳聚糖酶基因、壳聚糖酶及其制备方法和应用。本发明壳聚糖酶基因csn的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其是通过对来源于多枝横梗霉的壳聚糖酶的序列根据毕赤酵母密码子的偏好性进行综合优化得到。本发明壳聚糖酶Csn的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，是一种真菌壳聚糖酶，不仅丰富了壳聚糖酶的种类和来源途径，且其自身具有较高的酶活性，在较宽的温度和pH范围内均表现出良好的稳定性，具有良好的应用前景和产业价值。
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