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公开(公告)号：CN117230051A
公开(公告)日：2023-12-15
申请号：CN202311522949.3
申请日：2023-11-16
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于分子生物学以及蛋白质工程领域，具体涉及一种褐藻胶裂解酶突变体Pl7MaM及其制备方法与应用。本发明以褐藻胶裂解酶Pl7Ma为出发模板，首先通过截短不同蛋白功能模块获得Pl7Ma2，其酶比活是Pl7Ma的1.31倍；然后以Pl7Ma2为模板，通过结合二硫键和温度因子优化两种蛋白质理性设计策略，获得了热稳定性提升的突变体Pl7MaM。本发明获得的突变体P17MaM在45℃、50℃和55℃的水浴处理60分钟后的剩余酶活分别是Pl7Ma的3.14倍、4.83倍和6.52倍，酶活力及热稳定性均显著提升，可进一步用于制备海藻寡糖，为下一步产业化应用奠定了坚实基础。
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公开(公告)号：CN115896072A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202211329966.0
申请日：2022-10-27
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于蛋白质理性设计及酶催化领域，具体涉及一种氨肽酶BmAp、突变体BmApM及其应用。本发明提供的氨肽酶BmAp来源于莫海威芽孢杆菌。本发明通过同源克隆、异源表达以及特性表征获得氨肽酶BmAp及其酶学特性。以氨肽酶BmAp为出发模板，通过蛋白自由能优化获得热稳定性提升的突变体BmApM。以毕赤酵母为宿主，实现氨肽酶BmAp和突变体BmApM的高效制备。本发明最终将氨肽酶BmAp及其突变体BmApM应用于蛋白水解，为其下一步产业化应用提供技术参考。
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公开(公告)号：CN111944790B
公开(公告)日：2022-09-09
申请号：CN202010619037.8
申请日：2020-07-01
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种中性蛋白酶基因、中性蛋白酶及其制备方法和应用。本发明中性蛋白酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明通过将中性蛋白酶Np的第422位氨基酸和第433位氨基酸突变为半胱氨酸，可以形成二硫键，使所得中性蛋白酶的热稳定性得到显著提升，具有更广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN114736891A
公开(公告)日：2022-07-12
申请号：CN202210675775.3
申请日：2022-06-15
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于酶工程领域，具体涉及一种几丁质酶突变体ChiM‑SS及其应用。本发明提供的几丁质酶突变体ChiM‑SS是以几丁质酶ChiM为出发模板，通过理性设计二硫键突变体以及组合突变获得热稳定性提升的突变体ChiM‑SS，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明突变体ChiM‑SS在60℃、65℃和70℃热处理60分钟后的剩余酶活分别为59.6%、45.8%和33.2%，分别是出发模板ChiM的2.71倍，5.1倍和4.7倍。本发明通过结合基因拷贝数、分子伴侣共表达，以毕赤酵母为重组表达宿主，实现突变体ChiM‑SS的高效表达，可用于制备突变体ChiM‑SS，进一步为其广泛应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN113832129B
公开(公告)日：2022-02-22
申请号：CN202111428154.7
申请日：2021-11-29
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于分子生物学以及酶工程领域，具体涉及一种壳聚糖酶突变体CsnBa1及其应用。本发明公开了一种热稳定性提高的突变体CsnBa1及其酶学特性。以前期获得的壳聚糖酶CsnBaa为模板，通过二硫键以及糖基化突变获得热稳定性提升的突变体，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明获得的壳聚糖酶突变体CsnBa1，在45℃到55℃范围内具有良好的稳定性，热处理30分钟后剩余酶活均大于80%，在60℃热处理30分钟后，剩余酶活为41.2%，为壳聚糖酶CsnBaa剩余酶活约17.8%的2.3倍，可用于制备重组载体、重组菌株。本发明获得的壳聚糖酶突变体CsnBa1具有良好的热稳定性，可用于壳寡糖制备领域，并进一步为其广泛应用奠定基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113862241A
公开(公告)日：2021-12-31
申请号：CN202111459576.0
申请日：2021-12-02
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，特别涉及一种壳聚糖酶Csncv及其突变体CsnB和应用，其中突变体CsnB通过优化密码子后的壳聚糖酶Csncv突变得到，优化的壳聚糖酶Csncv氨基酸序列和核苷酸序列如SEQ ID NO.16‑17所示，突变体CsnB的氨基酸序列和核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑14所示，通过构建CsnB的高效表达工程菌，提高了壳聚糖酶的热稳定性，水解壳聚糖得到含有壳二糖、壳三糖、壳四糖、壳五糖和壳六糖的壳寡糖产物；本发明获得的壳聚糖酶Csncv及其突变体CsnB能够应用于壳寡糖的制备和医药、农业、食品等行业，为壳聚糖酶产业化应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN110526768A
公开(公告)日：2019-12-03
申请号：CN201910765358.6
申请日：2019-08-19
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于农业肥料技术领域，具体涉及一种作物营养肥及其制备方法和促进柑橘果实膨大的方法。本发明所提供的作物营养肥，施用于柑橘的膨果期，包括重量份组分：沼液10-20份；氮肥10-15份；磷肥5-10份；钾肥15-25份；糖醇10-20份；钙肥10-20份；微量元素肥1-5份；水5-10份；丙三醇5-10份；其中，微量元素肥包括锌肥和硼肥，且锌肥和硼肥的重量比为1:(1-3)。本发明作物营养肥营养均衡，将其施用于柑橘的膨果期，对柑橘的产量和品质的提升作用明显。
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公开(公告)号：CN118325879B
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410756047.4
申请日：2024-06-13
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于分子生物学及蛋白质工程技术领域，具体设计一种褐藻胶裂解酶突变体PL31PtM及其应用。本发明通过密码子优化获得褐藻胶裂解酶基因序列PL31Pt，其核苷酸序列信息如SEQ ID NO.1所示，并将该序列用于重组褐藻胶裂解酶PL31Pt工程菌的构建过程，进一步以重组PL31Pt为模板，通过蛋白理性设计获得热稳定性提升的突变体PL31PtM，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；通过高密度发酵实现突变体PL31PtM高效制备。本发明获得的突变体PL31PtM可用于褐藻胶寡糖的制备过程，应用范围广泛。
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公开(公告)号：CN117230051B
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202311522949.3
申请日：2023-11-16
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于分子生物学以及蛋白质工程领域，具体涉及一种褐藻胶裂解酶突变体Pl7MaM及其制备方法与应用。本发明以褐藻胶裂解酶Pl7Ma为出发模板，首先通过截短不同蛋白功能模块获得Pl7Ma2，其酶比活是Pl7Ma的1.31倍；然后以Pl7Ma2为模板，通过结合二硫键和温度因子优化两种蛋白质理性设计策略，获得了热稳定性提升的突变体Pl7MaM。本发明获得的突变体P17MaM在45℃、50℃和55℃的水浴处理60分钟后的剩余酶活分别是Pl7Ma的3.14倍、4.83倍和6.52倍，酶活力及热稳定性均显著提升，可进一步用于制备海藻寡糖，为下一步产业化应用奠定了坚实基础。
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公开(公告)号：CN116790561B
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202310889388.4
申请日：2023-07-20
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于分子生物学以及蛋白质工程领域，特别涉及一种几丁质酶突变体ChiPcM及其应用。本发明通过基因克隆获得几丁质酶ChiPc，进一步利用理性设计获得热稳定性提升的突变体ChiPcM，最终获得的突变体ChiPcM的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，其热稳定性显著提高，在55℃、60℃和65℃热处理60分钟后的剩余酶活分别是出发模板ChiPc的2.1倍，5.1倍和9.8倍。本发明构建的几丁质酶突变体ChiPcM为其下一步产业化应用奠定基础。
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