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公开(公告)号：CN112175974A
公开(公告)日：2021-01-05
申请号：CN202011011189.6
申请日：2020-09-23
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司 , 深圳诺普信农化股份有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种几丁质脱乙酰酶基因、几丁质脱乙酰酶及其制备方法和应用。本发明几丁质脱乙酰酶基因cdaba的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其是通过对来源于萎缩芽孢杆菌Bacillus atrophaeus几丁质脱乙酰酶的序列进行综合优化得到。本发明几丁质脱乙酰酶CdaBa的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，其不仅丰富了几丁质脱乙酰酶的种类和来源途径，而且酶比活可达352U/mg，在较宽的温度范围和较宽的pH范围内均表现出良好的稳定性，具有良好的应用前景和产业价值。
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公开(公告)号：CN112430615A
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN202011392286.4
申请日：2020-12-02
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司 , 华南理工大学 , 深圳诺普信农化股份有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种壳聚糖酶基因csnbaa、壳聚糖酶及其制备方法和应用。本发明壳聚糖酶基因csnbaa的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其是通过对来源于萎缩芽孢杆菌Bacillus atrophaeus壳聚糖酶的序列进行综合优化得到。本发明壳聚糖酶CsnBaa的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，其不仅丰富了壳聚糖酶的种类和来源途径，而且发酵酶活可达4630U/mL，在较宽的温度范围和较宽的pH范围内均表现出良好的稳定性，具有良好的应用前景和产业价值。
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公开(公告)号：CN111944790B
公开(公告)日：2022-09-09
申请号：CN202010619037.8
申请日：2020-07-01
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种中性蛋白酶基因、中性蛋白酶及其制备方法和应用。本发明中性蛋白酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明通过将中性蛋白酶Np的第422位氨基酸和第433位氨基酸突变为半胱氨酸，可以形成二硫键，使所得中性蛋白酶的热稳定性得到显著提升，具有更广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN113832129B
公开(公告)日：2022-02-22
申请号：CN202111428154.7
申请日：2021-11-29
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于分子生物学以及酶工程领域，具体涉及一种壳聚糖酶突变体CsnBa1及其应用。本发明公开了一种热稳定性提高的突变体CsnBa1及其酶学特性。以前期获得的壳聚糖酶CsnBaa为模板，通过二硫键以及糖基化突变获得热稳定性提升的突变体，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明获得的壳聚糖酶突变体CsnBa1，在45℃到55℃范围内具有良好的稳定性，热处理30分钟后剩余酶活均大于80%，在60℃热处理30分钟后，剩余酶活为41.2%，为壳聚糖酶CsnBaa剩余酶活约17.8%的2.3倍，可用于制备重组载体、重组菌株。本发明获得的壳聚糖酶突变体CsnBa1具有良好的热稳定性，可用于壳寡糖制备领域，并进一步为其广泛应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN113862241A
公开(公告)日：2021-12-31
申请号：CN202111459576.0
申请日：2021-12-02
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，特别涉及一种壳聚糖酶Csncv及其突变体CsnB和应用，其中突变体CsnB通过优化密码子后的壳聚糖酶Csncv突变得到，优化的壳聚糖酶Csncv氨基酸序列和核苷酸序列如SEQ ID NO.16‑17所示，突变体CsnB的氨基酸序列和核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑14所示，通过构建CsnB的高效表达工程菌，提高了壳聚糖酶的热稳定性，水解壳聚糖得到含有壳二糖、壳三糖、壳四糖、壳五糖和壳六糖的壳寡糖产物；本发明获得的壳聚糖酶Csncv及其突变体CsnB能够应用于壳寡糖的制备和医药、农业、食品等行业，为壳聚糖酶产业化应用奠定基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113215136B
公开(公告)日：2021-12-07
申请号：CN202110762374.7
申请日：2021-07-06
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种壳聚糖酶突变体CsnT及其应用。本发明提供的壳聚糖酶突变体CsnT是以壳聚糖酶Csnbm为出发模板，通过增加二硫键获得突变体CsnT，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的壳聚糖酶突变体CsnT，在55℃、60℃以及65℃热处理30分钟后的酶活保留率分别为Csnbm的4.46倍、6.4倍和7.5倍，可用于制备重组载体、重组菌株。本发明获得的壳聚糖酶突变体CsnT具有良好的热稳定性，可用于壳寡糖制备领域，并进一步为其广泛应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN113832129A
公开(公告)日：2021-12-24
申请号：CN202111428154.7
申请日：2021-11-29
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于分子生物学以及酶工程领域，具体涉及一种壳聚糖酶突变体CsnBa1及其应用。本发明公开了一种热稳定性提高的突变体CsnBa1及其酶学特性。以前期获得的壳聚糖酶CsnBaa为模板，通过二硫键以及糖基化突变获得热稳定性提升的突变体，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明获得的壳聚糖酶突变体CsnBa1，在45℃到55℃范围内具有良好的稳定性，热处理30分钟后剩余酶活均大于80%，在60℃热处理30分钟后，剩余酶活为41.2%，为壳聚糖酶CsnBaa剩余酶活约17.8%的2.3倍，可用于制备重组载体、重组菌株。本发明获得的壳聚糖酶突变体CsnBa1具有良好的热稳定性，可用于壳寡糖制备领域，并进一步为其广泛应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN113249360A
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN202110762467.X
申请日：2021-07-06
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于酶工程领域，具体涉及一种酶比活提升的几丁质酶突变体ChiM及其应用。本发明提供的几丁质酶突变体ChiM是以几丁质酶ChiAm为出发模板，通过定点包含突变、组合突变获得酶比活提升的突变体ChiM，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的几丁质酶突变体ChiM酶比活为71U/mg，是ChiAm的1.48倍。本发明以毕赤酵母为重组表达宿主，实现了ChiM的高效表达，可用于制备突变体ChiM，为进一步为其广泛应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN111944790A
公开(公告)日：2020-11-17
申请号：CN202010619037.8
申请日：2020-07-01
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种中性蛋白酶基因、中性蛋白酶及其制备方法和应用。本发明中性蛋白酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明通过将中性蛋白酶Np的第422位氨基酸和第433位氨基酸突变为半胱氨酸，可以形成二硫键，使所得中性蛋白酶的热稳定性得到显著提升，具有更广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN114540330B
公开(公告)日：2022-07-12
申请号：CN202210419863.7
申请日：2022-04-21
Applicant: 深圳润康生态环境股份有限公司
IPC: C12N9/54 , C12N15/57 , C12N15/75 , C12N15/67 , C12N15/62 , C12N1/21 , C12P21/06 , A01N37/46 , A01P21/00 , C12R1/125
Abstract: 本发明属于酶工程及微生物工程领域，具体涉及一种碱性蛋白酶突变体AprBpM及其应用。首先，本发明以碱性蛋白酶AprBp为出发模板，通过增加二硫键和点突变获得突变体AprBpM，本发明获得的碱性蛋白酶突变体AprBpM在70℃热处理5分钟后的酶活保留率是AprBp的3.52倍；其次，通过优化启动子和信号肽实现突变体AprBpM在枯草芽孢杆菌高效表达，在高密度发酵培养条件下最高酶活达到65230U/mL；最后，通过突变体AprBpM水解废弃虾蟹壳制备多肽应用于农业种植领域。
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