细胞尺度可控的工程菌及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN117165507A

    公开(公告)日:2023-12-05

    申请号:CN202311143257.8

    申请日:2023-09-06

    申请人: 清华大学

    摘要: 本发明涉及一种细胞尺度可控的工程菌及其构建方法和应用。主要是用含有目标基因及调控目标基因的启动子的重组载体转化谷氨酸棒杆菌构建而成,目标基因包括阿拉伯糖转运蛋白基因araE和细胞形态调控基因,调控细胞形态控制基因的启动子为弱启动子PBAD;调控阿拉伯糖转运蛋白基因araE的启动子为强启动子。该工程菌的细胞尺度受双启动子诱导剂浓度的精密调控,最多增至原尺度两倍,操作简单,并且本申请所能够调控的细胞尺度,有效避免细胞过度变形,从而有效避免对细胞正常生长与分裂带来不利影响。

    一种重组转氨酶和所述重组转氨酶的突变体及其应用

    公开(公告)号:CN112280761B

    公开(公告)日:2022-04-12

    申请号:CN202011280191.3

    申请日:2020-11-16

    申请人: 清华大学

    摘要: 本发明公开了一种重组转氨酶和所述重组转氨酶的突变体及其应用。本发明通过对转氨酶编码基因的密码子进行优化,得到了一种核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的转氨酶编码基因。在此基础上,通过构建转氨酶的突变体库得到了一系列所述转氨酶突变体,并筛选出最优突变体。本发明所获得的重组转氨酶催化剂能够不对称催化合成17种高附加值的手性氨基醇及手性胺,反应转化率最高可达99%,产物光学纯度可达99%以上。且通过蛋白质工程改造获取的转氨酶突变体相比野生型母本活力提高明显,最优突变体相比野生型母本的活力提升105倍,且产物ee在99%以上。

    一种重组转氨酶和所述重组转氨酶的突变体及其应用

    公开(公告)号:CN112280761A

    公开(公告)日:2021-01-29

    申请号:CN202011280191.3

    申请日:2020-11-16

    申请人: 清华大学

    摘要: 本发明公开了一种重组转氨酶和所述重组转氨酶的突变体及其应用。本发明通过对转氨酶编码基因的密码子进行优化,得到了一种核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的转氨酶编码基因。在此基础上,通过构建转氨酶的突变体库得到了一系列所述转氨酶突变体,并筛选出最优突变体。本发明所获得的重组转氨酶催化剂能够不对称催化合成17种高附加值的手性氨基醇及手性胺,反应转化率最高可达99%,产物光学纯度可达99%以上。且通过蛋白质工程改造获取的转氨酶突变体相比野生型母本活力提高明显,最优突变体相比野生型母本的活力提升105倍,且产物ee在99%以上。