公开(公告)号：CN118291503A

公开(公告)日：2024-07-05

申请号：CN202410177464.3

申请日：2024-02-08

Applicant: 清华大学深圳国际研究生院

Inventor： 黄晶 ,  维杰·潘迪 ,  郝俊丞 ,  黄鹏 ,  林可 ,  张熙 ,  陈淑 ,  罗贝·彼特

IPC: C12N15/65 ,  C12N15/64 ,  C12Q1/02 ,  C12Q1/32 ,  C12Q1/66 ,  G01N33/66

Abstract: 本发明公开了一种基于人LDHA基因启动子区的双荧光素酶报告基因载体及其构建方法和应用，该双荧光素酶报告基因载体记为pGL3‑LDHA‑promoter核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，利用高效酶和同源重组原理，利用BgL II以及HindⅢ完成了LDHA基因启动子目的片段与pGL3‑Basic线性化载体的克隆重组获得，双酶切的方法可以极大的降低载体的自连，提高重组载体的阳性率。pGL3‑LDHA‑promoter可实现对LDHA启动子表达量进行敏感识别和准确的检测。

公开(公告)号：CN116355929A

公开(公告)日：2023-06-30

申请号：CN202310380697.9

申请日：2023-04-11

Applicant: 清华大学深圳国际研究生院

Inventor： 黄晶 ,  维杰•潘迪 ,  黄鹏 ,  郝俊丞 ,  张熙 ,  陈淑 ,  林可 ,  罗贝•彼特

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/64 ,  C12N15/65 ,  C12N15/113 ,  C12Q1/66 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明公开了一种基于人LDHB基因启动子区的双荧光素酶报告基因载体及其构建方法和应用，该双荧光素酶报告基因载体记为pGL3‑LDHB‑promote核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，利用高效酶和同源重组原理，利用BgLII以及HindⅢ完成了LDHB基因启动子目的片段与pGL3‑Basic线性化载体的克隆重组获得，双酶切的方法可以极大的降低载体的自连，提高重组载体的阳性率。pGL3‑LDHB‑promote可实现对LDHB启动子表达量进行敏感识别和准确的检测。

公开(公告)号：CN114921493A

公开(公告)日：2022-08-19

申请号：CN202210654292.5

申请日：2022-06-10

Applicant: 清华大学深圳国际研究生院

Inventor： 陈淑 ,  罗贝·彼特 ,  维杰·潘迪 ,  张熙 ,  木兰 ,  黄鹏 ,  黄晶 ,  郝俊丞

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/53 ,  C12N5/10 ,  C12N5/09 ,  A01K67/027 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明公开了一种稳定表达Luciferase的他莫昔芬耐药细胞株及其构建方法和应用，通过将稳定表达荧光素酶基因的肿瘤细胞进行裸鼠原位异种移植成瘤实验，裸鼠成瘤后，注射他莫昔芬治疗，治疗结束后，取出治疗压力下稳定增殖的肿瘤块，进行原代培养，得到他莫昔芬耐药细胞株。本发明还公开一种他莫昔芬耐药细胞株CS‑MCF7‑TR，其保藏编号为CCTCCNO:C2022118。本发明构建方法模拟临床给药，循序渐进地增大给药剂量，创新性地从体内构建他莫昔芬耐药细胞模型，且该构建方法专一性强。同时，荧光素酶也有利于稳定标记与活体示踪，尤其对微小转移灶具有更高敏感性。

公开(公告)号：CN116463368A

公开(公告)日：2023-07-21

申请号：CN202310380694.5

申请日：2023-04-11

Applicant: 清华大学深圳国际研究生院

Inventor： 黄晶 ,  维杰·潘迪 ,  郝俊丞 ,  黄鹏 ,  林可 ,  张熙 ,  陈淑 ,  罗贝·彼特

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/64 ,  C12N15/65 ,  C12N15/113 ,  C12Q1/66 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明公开了一种基于人LDHA基因启动子区的双荧光素酶报告基因载体及其构建方法和应用，该双荧光素酶报告基因载体记为pGL3‑LDHA‑promote核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，利用高效酶和同源重组原理，利用BgLII以及HindⅢ完成了LDHA基因启动子目的片段与pGL3‑Basic线性化载体的克隆重组获得，双酶切的方法可以极大的降低载体的自连，提高重组载体的阳性率。pGL3‑LDHA‑promote可实现对LDHA启动子表达量进行敏感识别和准确的检测。

公开(公告)号：CN116286995A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202310297747.7

申请日：2023-03-24

Applicant: 清华大学深圳国际研究生院

Inventor： 黄鹏 ,  维杰·潘迪 ,  黄晶 ,  林可 ,  罗贝·彼特 ,  张熙 ,  陈淑

IPC: C12N15/867 ,  C12N15/66 ,  C12N15/16 ,  C12N7/01 ,  C12N5/10 ,  C07K14/575 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种多西霉素浓度梯度依赖性TFF3诱导表达质粒及其应用，所述质粒以pCW‑puro为骨架载体，以EcoRI和BamHI为剪接位点将编码TFF3蛋白的核苷酸序列插入其中。本发明基于tet‑on系统的多西霉素浓度梯度依赖性TFF3诱导表达质粒为TFF3在肿瘤生物学中的剂量依赖性功能及分子机制研究提供细胞模型构建的必须工具，相较于双质粒tet‑on系统，单质粒系统对构建操作的友好性；具有puromycin抗性基因作为真核筛选基因，对所构建的细胞模型进行大规模阳性克隆筛选具有友好性；在慢病毒转染的稳定性与puromycin的筛选压力的作用下更容易筛选出稳转的阳性克隆。

公开(公告)号：CN113604436A

公开(公告)日：2021-11-05

申请号：CN202110921008.1

申请日：2021-08-11

Applicant: 清华大学深圳国际研究生院

Inventor： 陈淑 ,  罗贝·彼特 ,  维杰·潘迪 ,  张熙 ,  木兰 ,  黄鹏

IPC: C12N5/10 ,  A01K67/027 ,  A61K49/00 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明公开了一种肿瘤内分泌治疗药物诱导的休眠或复发细胞株的构建方法，通过生物学手段，转染表达荧光素酶基因的载体进入肿瘤细胞，筛选稳定表达荧光素酶基因的肿瘤细胞进行裸鼠原位异种移植成瘤实验，裸鼠成瘤后，注射肿瘤内分泌治疗药物治疗。治疗结束后，取出不增殖的肿瘤块和恢复增殖的肿瘤块，分别进行原代培养，得到休眠样细胞株和复发样细胞株。本发明还公开了氟维斯群诱导的人源雌激素受体阳性乳腺癌的休眠细胞株MCF7‑FD和复发细胞株MCF7‑FR。本发明构建方法模拟临床给药，创新性地从体内构建休眠或复发细胞模型，且该构建方法专一性强。同时，荧光素酶也有利于稳定标记与活体示踪，尤其对微小转移灶具有更高敏感性。