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公开(公告)号:CN118291503A
公开(公告)日:2024-07-05
申请号:CN202410177464.3
申请日:2024-02-08
Applicant: 清华大学深圳国际研究生院
Abstract: 本发明公开了一种基于人LDHA基因启动子区的双荧光素酶报告基因载体及其构建方法和应用,该双荧光素酶报告基因载体记为pGL3‑LDHA‑promoter核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,利用高效酶和同源重组原理,利用BgL II以及HindⅢ完成了LDHA基因启动子目的片段与pGL3‑Basic线性化载体的克隆重组获得,双酶切的方法可以极大的降低载体的自连,提高重组载体的阳性率。pGL3‑LDHA‑promoter可实现对LDHA启动子表达量进行敏感识别和准确的检测。
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公开(公告)号:CN116355929A
公开(公告)日:2023-06-30
申请号:CN202310380697.9
申请日:2023-04-11
Applicant: 清华大学深圳国际研究生院
Abstract: 本发明公开了一种基于人LDHB基因启动子区的双荧光素酶报告基因载体及其构建方法和应用,该双荧光素酶报告基因载体记为pGL3‑LDHB‑promote核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,利用高效酶和同源重组原理,利用BgLII以及HindⅢ完成了LDHB基因启动子目的片段与pGL3‑Basic线性化载体的克隆重组获得,双酶切的方法可以极大的降低载体的自连,提高重组载体的阳性率。pGL3‑LDHB‑promote可实现对LDHB启动子表达量进行敏感识别和准确的检测。
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公开(公告)号:CN116463368A
公开(公告)日:2023-07-21
申请号:CN202310380694.5
申请日:2023-04-11
Applicant: 清华大学深圳国际研究生院
Abstract: 本发明公开了一种基于人LDHA基因启动子区的双荧光素酶报告基因载体及其构建方法和应用,该双荧光素酶报告基因载体记为pGL3‑LDHA‑promote核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,利用高效酶和同源重组原理,利用BgLII以及HindⅢ完成了LDHA基因启动子目的片段与pGL3‑Basic线性化载体的克隆重组获得,双酶切的方法可以极大的降低载体的自连,提高重组载体的阳性率。pGL3‑LDHA‑promote可实现对LDHA启动子表达量进行敏感识别和准确的检测。
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公开(公告)号:CN116286995A
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202310297747.7
申请日:2023-03-24
Applicant: 清华大学深圳国际研究生院
IPC: C12N15/867 , C12N15/66 , C12N15/16 , C12N7/01 , C12N5/10 , C07K14/575 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种多西霉素浓度梯度依赖性TFF3诱导表达质粒及其应用,所述质粒以pCW‑puro为骨架载体,以EcoRI和BamHI为剪接位点将编码TFF3蛋白的核苷酸序列插入其中。本发明基于tet‑on系统的多西霉素浓度梯度依赖性TFF3诱导表达质粒为TFF3在肿瘤生物学中的剂量依赖性功能及分子机制研究提供细胞模型构建的必须工具,相较于双质粒tet‑on系统,单质粒系统对构建操作的友好性;具有puromycin抗性基因作为真核筛选基因,对所构建的细胞模型进行大规模阳性克隆筛选具有友好性;在慢病毒转染的稳定性与puromycin的筛选压力的作用下更容易筛选出稳转的阳性克隆。
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