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公开(公告)号：CN118272523B
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202410707340.1
申请日：2024-06-03
申请人： 湖南工程学院
IPC分类号： C12Q1/6883 , C12Q1/682 , C12Q1/6825 , C12N15/11
摘要： 本发明提供了一种基于裂开型G四聚体编程的循环式AIE生物传感器免标记检测急性肾损伤miRNA的体系及其方法，属于分子探针荧光传感技术领域，设计G4‑a、G4‑b、P1、P2四条DNA单链序列，利用碱基互补配对自组装形成PG探针，以AKI靶标miRNA为启动剂，激活PG探针toehold介导的链置换反应，利用λ核酸外切酶水解链置换反应过程中产生的废弃物，实现靶标miRNA的循环利用，同时不断产生可与AIE信号分子MG特异性结合的split‑G‑Quadruplex结构，构建基于靶标循环的split‑G‑Quadruplex‑AIE激活式信号放大系统，实现靶标miRNA的高灵敏、免标记及快速检测。
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公开(公告)号：CN117816262A
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202410020677.5
申请日：2024-01-05
申请人： 湖南工程学院
IPC分类号： B01L3/00 , C12M1/34 , C12M1/00 , C12Q1/6837 , C12Q1/6886 , C12Q1/6825 , C12Q1/682 , C12N15/11
摘要： 本发明提供了一种检测癌症突变基因的一步式微流控微珠阵列芯片、试剂盒及其应用，属于基因芯片技术领域。一步式微流控微珠阵列芯片，包括微流控芯片和功能化微珠；微流控芯片内部设置有若干个中空的微室、若干个与所述微室的一侧连通的进样口和与所述微室另一侧连通的出样口；进样口和出样口均为上部开口的孔洞；功能化微珠置于所述微室中；连通进样口和微室的微通道允许微珠通过；连通微室和出样口的微通道阻碍微珠通过。所述功能化微珠和反应缓冲液采用DNA纳米技术所构建的级联信号放大策略，结合微流控芯片提供的密封反应环境，实现一次加液即完成检测目的，简化操作步骤，同时大大提高了检测效率，有利于实现疾病的早期诊断。
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公开(公告)号：CN114921576A
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202210755452.5
申请日：2022-06-29
申请人： 湖南工程学院
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/682 , C12N15/113 , C12N15/11 , C12R1/32
摘要： 本发明提供了一种检测牛结核分枝杆菌的试剂、试剂盒及检测方法，属于分子生物学检测技术领域；所述试剂包括基于CRISPR/Cas12a正反馈循环机制的识别元件、超支化杂交链式反应信号放大反应用试剂和比色分析用试剂；本发明以CRISPR/Cas12a为特异性识别元件，自催化后引发超支化杂交链式反应并形成n层分支的DNA纳米结构，并在DNA纳米结构上构建多维G‑四链体‑血红素DNA酶矩阵，从而实现多重信号放大，完成对牛结核分枝杆菌‑DNA的超灵敏检测。本发明对牛结核分枝杆菌DNA具有较高的特异性选择，检出限为8.9aM(LOD＝3σ/S)，实现了对牛结核分枝杆菌DNA的超灵敏检测。
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公开(公告)号：CN114107510A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202111503274.9
申请日：2021-12-10
申请人： 湖南工程学院
IPC分类号： C12Q1/6886 , C12Q1/6825 , C12Q1/682 , C12N15/11
摘要： 本发明提供了基于DNA三链介导构建多维DNA酶矩阵的超灵敏循环核酸检测体系、试剂盒和方法，涉及基因检测技术领域。本发明以三链DNA为信号扩增技术核心，将杂交链式反应(HCR)扩增和G‑四链体‑血红素DNA酶酶促信号扩增整合起来。在ctDNA存在的情况下，通过三链DNA引发多维网状杂交链式反应并形成三维立体网状DNA纳米线结构，此结构具有明显的细化分层及空间分布规律，支链上延伸出低层次分支，每个分支还可再延伸出更低层次的子分支。在此基础上，通过三链DNA介导构建分子间裂分式G‑四链体‑血红素DNA酶矩阵，从而实现循环核酸的超灵敏检测，具有无酶促信号扩增及可视化检测特征，具有极大发展潜力。
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公开(公告)号：CN107828861B
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN201711166840.5
申请日：2017-11-21
申请人： 湖南工程学院
IPC分类号： C12Q1/6837
摘要： 本发明提供了基于微流控芯片和G‑四链体‑血红素DNA酶检测循环核酸用试剂盒及其制备方法和应用，属于生物分子检测技术领域。所述检测循环核酸用试剂盒，包括以下组成：包被有功能化微球的微流控检测芯片；所述功能化微球为通过生物素‑亲和素系统将第一探针修饰于微球表面；表面修饰有第二探针和引发探针的金纳米颗粒液；第一发夹探针试剂，第二发夹探针试剂和发光体系。本发明提供的试剂在检测循环核酸的应用。所述试剂盒能够较好的解决微量医学分析技术领域或微创、无创诊断领域中存在的微量样品条件下高通量、高灵敏特性难以并存的难题。
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公开(公告)号：CN108252101B
公开(公告)日：2020-12-08
申请号：CN201810143614.3
申请日：2018-02-11
申请人： 湖南工程学院
IPC分类号： D06M15/564 , D06M11/46 , D06M11/74 , D06M101/06
摘要： 本申请涉及纺织品整理技术领域，具体涉及一种新型远红外复合纺织品整理其制备方法和应用。将氧化石墨烯和锆钛以氧化物形式与氧化石墨烯含氧官能团通过化学键进行结合，对氧化石墨烯进行纳米纳米复合改性，制备出GO‑TiO2‑ZrO2复合材料和基于GO‑TiO2‑ZrO2复合材料的远红外纺织品整理剂，并将其应用于棉纺织品的远红外整理，提高了织物的远红外发射率，且制作简单，成本低廉。
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公开(公告)号：CN106191042B
公开(公告)日：2018-10-19
申请号：CN201610564293.5
申请日：2016-07-16
申请人： 湖南工程学院
IPC分类号： C12N15/11 , C12Q1/6816
摘要： 一种基于核酸外切酶III辅助的双循环串联信号放大DNA组合探针组合，包括：包含G‑四链体形成序列的引发DNA探针；发卡DNA探针，3′端与5′端互补形成茎状区，环状区序列与所述引发DNA探针互补；汞离子识别探针，和核酸外切酶III。在少量Hg2+引发后，两个自发循环过程可产生大量的G‑四链体DNA探针，与血红素结合产生G‑四链体‑血红素DNA酶，催化ABTS‑H2O2反应，生成可通过肉眼观察或分光光度法测定的浅绿色的ABTS●＋。该方法具有极高的灵敏度和特异性、检测快速、操作简单，适合发展为环境监测现场实时分析技术；特别适合多种重金属离子同时存在的环境，适合应用于多种金属污染物存在时监测Hg离子的环境。
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公开(公告)号：CN106367497A
公开(公告)日：2017-02-01
申请号：CN201610772798.0
申请日：2016-08-30
申请人： 湖南工程学院
摘要： 本申请提供了一种基于滚环扩增的串联G-四链体-血红素DNA酶免标记信号放大方法，包括以下步骤：1)采用亲和洗脱液和生物素化捕获探针对链霉亲和素功能化微球进行处理，得到预处理微球；2)将样品基因组DNA进行循环扩增和纯化，得到环化DNA；3)将所述步骤1)得到的预处理微球和所述步骤2)得到的环化DNA混合后进行滚环扩增，得到滚环扩增产物；4)将所述步骤3)得到的滚环扩增产物与血红素结合，得到信号放大的滚环扩增产物，所述信号放大的滚环扩增产物形成放大的检测信号；所述步骤1)和步骤2)之间没有时间顺序限定。本发明的方法对沙门氏菌的检测限为0.03pmol/L，检测成本低、操作简单、灵敏度极高、检测快速且可通过肉眼判断样品中是否含有沙门氏菌。
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公开(公告)号：CN106191042A
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201610564293.5
申请日：2016-07-16
申请人： 湖南工程学院
CPC分类号： C12Q1/6832 , C12Q2525/301 , C12Q2521/319
摘要： 一种基于核酸外切酶III辅助的双循环串联信号放大DNA组合探针组合，包括：包含G-四链体形成序列的引发DNA探针；发卡DNA探针，3′端与5′端互补形成茎状区，环状区序列与所述引发DNA探针互补；汞离子识别探针，和核酸外切酶III。在少量Hg2+引发后，两个自发循环过程可产生大量的G-四链体DNA探针，与血红素结合产生G-四链体-血红素DNA酶，催化ABTS-H2O2反应，生成可通过肉眼观察或分光光度法测定的浅绿色的ABTS●＋。该方法具有极高的灵敏度和特异性、检测快速、操作简单，适合发展为环境监测现场实时分析技术；特别适合多种重金属离子同时存在的环境，适合应用于多种金属污染物存在时监测Hg离子的环境。
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公开(公告)号：CN103333967A
公开(公告)日：2013-10-02
申请号：CN201310293950.3
申请日：2013-07-12
申请人： 湖南工程学院
摘要： 本发明公开了一种基于微流控微珠阵列芯片的核酸检测方法。本发明主要是：将特异性捕获探针和电子富集蛋白固定于微球表面形成功能化微球，并将该微球固定在微流控芯片检测区中；将辣根过氧化物酶和检测探针修饰到纳米颗粒上作为信号标记；将目标核酸序列及纳米颗粒流入微流控微珠阵列检测芯片的检测区与微珠阵列反应；通过多酶纳米信号放大技术将生物素化的酪胺结合到微球表面的电子富集蛋白上，洗脱后流入亲合素标记的量子点，该量子点能与微球表面电子富集蛋白上结合的生物素识别并固定，通过荧光进行定量检测。本发明能解决当前核酸分析方法中存在的灵敏度低、检测流程复杂及难以实现微量样品分析的问题，并促进该技术领域的进一步发展。
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